粉红粘帚菌对番茄促生作用及施用方式研究

粉红粘帚菌（Clonos tachys ros e a）是一种具有生防作用真菌,但其对作物促生作用研究少有报道。文章旨在明确粉红粘帚菌WY-1菌株对番茄幼苗促生作用、最佳施用浓度和施用方式。采用平板种子萌发和温室盆栽方法,测定不同施用浓度和施用方式下WY-1菌株对番茄幼苗生长影响。结果表明,WY-1菌株对番茄种子萌发和幼苗生长均有促进作用,最佳浓度为4×106cfu·m L-1。不同处理方式对番茄幼苗生长均有促进作用,4~5叶期幼苗,拌土处理最佳;8~9叶期幼苗,浸种处理最佳。由此可知,WY-1菌株是一株有益于番茄生长的生防真菌,具有应用于蔬菜无公害生产的前景。

粉红聚端孢菌胞外几丁质酶纯化、特性及抗菌活性

粉红聚端孢菌 (Trichothecium roseum)在 SMCS中恒温摇床 (2 0 0 r/ min,2 8℃ )上培养 12 d,诱导产生了大量的胞外几丁质酶。培养滤液经 (NH4) 2 SO4分级沉淀、DEAE- Sepharose FF阴离子交换柱层析和 CM- Sepharose FF阳离子交换柱层析获得了 SDS- PAGE纯的胞外几丁质酶 ,分子量约为39k Da。几丁质酶最适作用温度为 4 0℃ ,最适 p H范围为 4 .0～ 7.0。抗菌活性显示 ,纯酶对供试病原菌都有不同程度的抑菌作用 ,其中对棉花黄萎菌的抑制作用最强。

粉红粘帚菌代谢物对南方根结线虫卵孵化及二龄幼虫的影响(英文)

粉红粘帚菌(Gliocladium spp.)是一类对植物病原菌具有潜在生物控制作用的真菌,为了探讨粘帚菌对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的抑制作用,实验室条件下研究了粉红粘帚菌挥发性代谢产物和非挥发性代谢产物不同稀释度对南方根结线虫卵孵化及二龄幼虫活性的影响。结果显示非挥发性代谢产物在原液、5倍、10倍、20倍、50倍稀释浓度下,12 d后对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率分别为80.4%、12.0%、10.5%、6.7%和5.2%,对二龄幼虫的矫正死亡率分别为32.0%、9.3%、2.0%、0.6%和0.1%,与对照组相比差异显著;挥发性代谢产物对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率为22.5%,对二龄幼虫的相对死亡率为17.4%。因此,粉红粘帚菌的非挥发性和挥发性代谢产物对南方根结线虫卵孵化及二龄幼虫活性均有一定的抑制作用。

重寄生菌粉红粘帚霉SS-1-1菌株的发酵条件优化

采用正交试验和单因素试验对粉红粘帚霉(Gliocladium roseum)SS-1-1菌株发酵条件的优化进行了研究。SS-1-1菌株最佳发酵培养基配方为:麸皮40g/L,玉米粉50g/L,豆饼粉20g/L,KH2PO4 0.5g/L;最佳发酵条件为:培养基初始pH值为4.5,发酵温度为28℃,摇床转速为200r/min,最佳培养时间为5d。

粉红粘帚菌几丁质酶基因cDNA克隆及表达

为研究粉红粘帚菌(Clonostachys rosea)生防机制并获得生物防治相关基因,文章利用RT-PCR方法克隆粉红粘帚菌1个几丁质酶基因T-ech42,对该基因进行生物信息学分析,并在大肠杆菌原核表达系统中进行外源表达。该基因长度为1 263 bp,编码420个氨基酸。推导T-ech42氨基酸序列以及蛋白质结构的生物信息学分析表明,该蛋白等电点为5.85,理论分子质量为45.13 ku,N端含信号肽,长度为20个氨基酸;T-ech42属于糖基水解酶18家族内切几丁质酶,包含SIGGW底物结合位点和FDGIDXDWE活性位点。将该基因构建到原核表达载体p ET-22b(+)上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,经终浓度1 mmol·L-1的IPTG诱导4 h后,可见酶蛋白活性表达。

10%粉红粘帚菌可湿性粉剂的研制

[目的]为获得符合国家化学农药标准的粉红粘帚菌分生孢子可湿性粉剂。[方法]选择常用助剂和粉红粘帚菌分生孢子进行生物相容性检测,初步筛选出影响较小或者没有影响的助剂,筛选出的助剂,进行粉红粘帚菌可湿性粉剂的研制。[结果]最终确定10%可湿性粉剂的配方为:粉红粘帚菌的分生孢子粉10%,润湿分散剂EFW 1%、K12 2%、D425 7%、NNO 7%,紫外保护剂黄原胶0.3%,载体凹凸棒土补足100%。[结论]检测结果表明粉红粘帚菌分生孢子可湿性粉剂的润湿时间为18s,质量悬浮率75.87%,孢子悬浮率72.05%,pH 5.9,含水量1.92%,98.34%可通过200目筛,符合国家化学农药可湿性粉剂的标准,为粉红粘帚菌可湿性粉剂的开发提供理论基础。

不同培养条件对粉红聚端孢菌孢子形态的影响

在不同的酸碱度、光环境和营养等条件下对粉红聚端孢菌的菌落形态和孢子大小进行了研究.结果表明:该菌在不同条件下培养后,菌落颜色、形态以及分生孢子的大小有一定差异,病原菌分生孢子长圆形或洋梨形,无色或半透明,孢基偏乳头突起,双细胞,隔膜处略缢缩;在pH近中性及光照条件下,分生孢子大型化现象最显著;该菌能利用所有供试碳源,孢子大型化的最适碳源为木糖醇,在可溶性淀粉培养基上产生的孢子最小;在供试氮源中,孢子大型化最适氮源为甘氨酸,在L-胱氨酸、尿素、氯化铵培养基上不产孢子.

入境旅客携带苹果中粉红聚端孢菌的检测与鉴定

首次建立了粉红聚端孢菌(Trichothecium roseum)实时荧光定量PCR检测方法,该检测方法扩增效率高、特异性好,灵敏度可达0.1 pg菌丝体DNA量;结合形态学观察及致病性测定,对从机场入境旅客携带的苹果中分离到的1株疑似菌株Tr-1685进行检测和鉴定。Tr-1685实时荧光PCR检测结果为阳性。该菌株在PDA培养基上生长较快,菌落平展,边缘不规则,表面形成淡粉红色的霉层,产孢量丰富。分生孢子梗直立,长短不一,顶端着生分生孢子。分生孢子双细胞、光滑、棍棒状,平均大小为17.5μm×8.7μm,基部细胞弯曲状。该病原菌接种苹果4 d后,出现褐色腐烂,8 d后出现淡粉色霉层及分生孢子。分离获得的菌株Tr-1685鉴定为粉红聚端孢菌,与实时荧光PCR结果一致。

一种巴尔喀什蘑菇发酵料腐生菌的鉴定及其生物学特性研究

【目的】制作巴尔喀什蘑菇培养料生产过程中,常发现一种腐生菌引起的病害,表现为棉籽壳发酵料发酵温度持续偏低,料面湿滑。研究该病害的病原和生物学特性,为该病害的有效控制提供依据。【方法】分离得到病原菌,观察形态特征和分析r DNA-ITS序列。【结果】该病原菌为粉红菌寄生菌(Hypomyces rosellus)的分生孢子阶段Cladobotryum noes菌寄生所致巴尔喀什蘑菇粉红菌病。该病原菌菌丝体最佳生长条件为20℃,属低温菌,pH 5.5偏酸性生长。葡萄糖为碳源,蛋白胨为氮源,光照对菌丝体生长有一定抑制作用。【结论】在食用菌生产过程中前期严格控制温度条件,做好二次发酵,加强通风和环境卫生管理有助于预防巴尔喀什蘑菇红菌病害发生。

不同杀菌剂对苹果霉心病菌的室内毒力测定

为筛选防治苹果霉心病高效、低毒、低残留的药剂,采用生长速率法测定了6种杀菌剂对苹果霉心病菌(粉红单端孢菌,Trichothecium roseum Bull)的室内毒力。结果表明,6种药剂对苹果霉心病菌菌丝生长的抑制效果不同,涂干剂EC抑菌效果最好,其EC50为3.715μg/mL;78%波尔.锰锌WP、70%丙森锌WP及10%苯醚甲环唑WG的抑菌效果差别不大,EC50在19.011～87.700μg/mL之间;80%代森锰锌WGEC50为7.161μg/mL,抑菌效果也较好;75%百菌清WP的抑菌效果较差,EC50为3 169.567μg/mL。

委内瑞拉链霉菌Snea253杀线虫活性化合物的分离纯化与结构鉴定

为研究委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)Snea253发酵液中具有杀线虫活性的脂溶性化学成分,利用薄层层析、柱层析、高效液相色谱等技术对其活性成分进行分离与纯化,以南方根结线虫二龄幼虫为靶标进行活性跟踪,通过HRMS、~1H-NMR、^(13)C-NMR等现代波谱技术,鉴定其结构为邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,简称DBP)。进一步检测DBP对9种植物病原真菌和3种细菌的抑菌活性发现,该化合物对粉红聚端孢菌(Trichothecium roseum)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)也具有抑制作用。

套袋梨果黑点病病原菌分离及其抑菌药物室内筛选

近年来,套袋梨果的果面时有出现黑色或灰黑色小黑点的现象发生,据调查,各梨区均有不同程度的发生,且不同年份之间有一定差别,多雨年份发病较重,为摸清病害的致病原因,以有效控制病害的发生发展,2008年从套袋梨园内采回斑点病自然病果,对该病进行了病菌分离及鉴定,并从市场上选购不同种类的杀菌剂13种,进行室内抑菌活性筛选,抑菌剂的室内筛选采用抑菌活性(菌丝生长速率法)和孢子萌发法。

一种姬松茸菌床常见病害的病原菌分离鉴定

姬松茸栽培过程中有一种菌床易感染的常见病害,其主要特征为,播种后一周左右在菌床上开始出现,感染部位呈现灰色霉层,强光下可见浅桔色粉末状孢子层,通风不良、湿度大的情况下病害较为严重。通过病原菌分离,从3个病害样品中分别获得真菌菌株HMB-1、HMB-2和HMB-3。3个菌株长势和菌落形态基本一致,采用ITS序列分析对分离得到的菌株HMB-1、HMB-2和HMB-3进行鉴定,结果显示3个菌株均为粉红聚端孢菌,即姬松茸菌床呈灰色霉层感染的病原菌为粉红聚端孢菌。

金刺梨叶部病害发生规律调查及病原鉴定

[目的]明确金刺梨叶部病害的发生规律和主要病原菌种类。[方法]于2021年6、7、10月对安顺市普定山地金刺梨产业示范园金刺梨2种主要叶片病害黑斑病和白粉病进行调查,并采用组织分离法和科赫法则检测叶片黑斑病病原菌。[结果]6、7月金刺梨叶片的黑斑病和白粉病病株率分别为68.00%、68.00%和40.00%、62.00%,而10月黑斑病病株率则高达94.00%,白粉病病株率为0,病情指数分别为0.022 8±0.014 3、0.041 0±0.039 4、0.166 4±0.094 7和0.068 0±0.136 0、0.077 0±0.111 5、0.000 2±0.000 4。通过分离得到叶片黑斑病病原菌共2株,经过形态学与分子生物学鉴定,分别为紫荆间座壳菌(Diaporthe cercidis.)和粉红单端孢菌(Trichothecium roseum)。金刺梨2种主要叶部病害的发生率和病情指数随着季节变化而变化,其中10月黑斑病病害的发生最为严重,白粉病未见发病。[结论]报道了金刺梨叶片黑斑病的病原菌种类,为其病害防治提供了科学依据和参考。

板栗红粉病病原菌鉴定及其生物学特性研究

为明确板栗红粉病的病原及其生物学特性,采用组织分离法分离纯化病原菌,通过柯赫氏法则、形态学特征及分子生物学技术对病原菌进行鉴定,研究了温度、湿度、培养基、碳氮源、光照及pH对病原菌生长和产孢的影响。PDA培养基上病原菌菌丝生长初期为白色,后期菌丝中央橘粉色、边缘浅白色、具同心轮纹,分生孢子无色透明、单胞、梨形、表面光滑,有横膈膜0~1个,不具有纵膈膜,隔膜处缢缩。该病原菌ITS序列与粉红单端孢菌(Trichothecium roseum MN882763)的序列相似性为100%,结合形态学特征及分子生物学技术,板栗红粉病的致病菌为粉红单端孢菌(Trichothecium roseum)。该菌菌丝生长最适的碳源为阿拉伯树胶粉,氮源为蛋白胨,pH 8,温度为25℃,培养基为PDA培养基,光照条件为12 h光暗交替;产孢最适碳源为α-乳糖,氮源为蛋白胨,pH 7,温度为25℃,培养基为牛肉膏蛋白胨培养基,光照条件为12 h光暗交替,为该病的防治提供了科学依据。

真菌NBERC49006的次级代谢产物及其除草活性研究

为明确除草活性真菌NBERC_49006中的活性物质基础,对其次级代谢产物进行研究。通过对菌株大量发酵,采用乙酸乙酯提取,凝胶柱色谱和制备高效液相色谱分离纯化得到7个化合物,并通过理化性质、LC-MS及NMR鉴定为trichothecin(1)、8-deoxy-trichothecin(2)、engleromycenolic acid a(3)、engleromycenolic acid b(4)、rosololactone(5)、rosenonolactone(6)、2α-hydroxy-cis-communic acid(7)。其中,化合物3、4和7首次从该菌种中得到,而且化合物7是首次从微生物中得到。除草活性测试表明化合物1和2对拟南芥具有较强的除草活性,LC 50值分别为9.30和28.98μg/mL。该研究可为真菌源除草先导化合物的发现提供良好的研究基础。

玉米粉红聚端孢穗腐病的识别与防治措施

玉米粉红聚端孢穗腐病是由粉红聚端孢菌侵染引起的真菌性病害。对玉米粉红聚端孢穗腐病的病原特征,侵染循环,流行规律,危害症状进行了总结,并与玉米青霉穗腐病、灰葡萄孢穗腐病、丝核菌穗腐病、小斑病T小种穗腐病、色二孢穗腐病等玉米常见穗腐病的病状特征进行了类比,最后提出针对性的农业及化学防治措施。

粉红粘帚菌的ATMT体系构建及定殖甘草条件优化

目的:建立并优化根癌农杆菌介导的甘草内生真菌粉红粘帚菌的遗传转化体系,优选粉红粘帚菌定殖甘草的条件,为生物菌肥的开发及优质甘草的育种奠定基础。方法:分别从乙酰丁香酮浓度、共培养时间和受体真菌分生孢子浓度3个方面对根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)条件进行优化并优选转化子。采用正交试验,以共培养温度、共培养时间和孢子浓度为考察因素,定殖率为指标,优化粉红粘帚菌定殖甘草的条件。结果:粉红粘帚菌最适转化条件为共培养时间60 h、孢子浓度1×10^(7) cfu·mL^(-1)、乙酰丁香酮浓度150μmol·L^(-1),此条件下的转化效率为每1×10^(7)个受体真菌孢子可获得135个转化子。通过标记基因绿色荧光蛋白(GFP)的克隆和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色结果检测转化的准确性与稳定性。粉红粘帚菌通过浸种法定殖甘草的最佳条件为共培养温度25℃、共培养时间36 h、孢子浓度1×10^(6) cfu·mL^(-1),此条件下定殖率71.11%。结论:本研究成功建立了稳定高效的粉红粘帚菌ATMT体系及其定殖甘草的技术体系,可为甘草生物菌肥的开发奠定基础。

Trichothecium roseum蛋白激发子诱导杏果抗黑斑病的作用机理

研究非亲和菌株粉红单端孢(Trichothecium roseum)菌体蛋白激发子对杏果实抗黑斑病的诱导效果及其作用机理。以‘兰州大接杏’为试材,通过处理后不同时间损伤接种杏果黑斑病菌(Alternaria alternata),研究T.roseum蛋白激发子对杏果实黑斑病抗病性的诱导及其时效性,同时进一步研究最佳处理质量浓度对杏果实组织活性氧及抗性相关酶的影响。结果表明,T.roseum蛋白激发子处理可显著抑制损伤接种杏果病斑的扩展(P<0.05),其中14.4μg/m L蛋白激发子的控制效果最好,且诱导处理72 h时杏果产生最大抗性。T.roseum蛋白激发子处理后杏果组织O2-·的生成速率和H2O2含量分别在48 h和72 h出现明显的峰值,同时处理的果实组织超氧化物歧化酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性均有所增强。T.roseum菌体蛋白激发子处理能显著增强杏果组织的抗性,其可能是通过激发活性氧爆发和提高杏果实抗病性相关酶的活性来实现的。可见T.roseum蛋白激发子可以作为一种有潜力的诱抗剂应用于采后病害的控制。

海南龙眼红粉病的病原鉴定

【目的】确定海南省近年发生的新病害——龙眼红粉病病原菌种类,为科学防治提供理论依据。【方法】采集海南省龙眼主产区龙眼红粉病病果样本,通过对病原菌形态观察、致病性测定,以及病原菌的rDNA 28S和rDNA ITS序列分析进行病原鉴定。【结果】经分离纯化获得病原菌,培养后回接健康龙眼果实,出现的病害症状与田间发病症状一致,再次分离得到同样病菌,确定其为致病菌;对病原菌进行传统形态学观察,病原菌分生孢子的形态为粉红单端孢菌属真菌,将待测菌株rDNA-ITS和rDNA-28S序列与GenBank中相关菌株的序列进行比较,发现其致病菌与Trichothecium roseum的相似性达到99%。【结论】确定海南省龙眼主产区新病害龙眼红粉病的病原菌为粉红单端孢菌Trichothecium roseum。