人类粒─—巨噬细胞集落刺激因子的临床研究进展

人类粒─—巨噬细胞集落刺激因子的临床研究进展青海医学院附属医院李湛全综述贾乃镛审校粒─—巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）是一种多向性造血生长因子，近年来对ＧＭ－ＣＳＦ的临床应用作了大量研究，并取得了引人注目的成就。现在重组人类ＧＭ－ＣＳＦ（ｒｈＧ...

聚乙二醇修饰重组人粒细胞集落刺激因子反应过程的优化

采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰重组人粒细胞集落刺激因子rhG-CSF,考察了各因素对蛋白质平均修饰度及体外生物活性的影响,并对修饰产物的稳定保存条件进行了初步探讨.通过四因素四水平正交法和单因素实验结合,优化修饰条件为:PEG与G-CSF摩尔比为25:1,pH7.6的硼酸盐缓冲环境,反应时间40min,反应温度22℃.在此条件下,PEG-G-CSF的平均修饰度为50%,活性可保留40%左右.研究还发现,不同的添加剂影响PEG-G-CSF的保存稳定性,人血清白蛋白和甘露醇是两种效果最好的保护剂,在它们的存在下,PEG-G-CSF溶液在4℃放置一个月后活性保留92%,三个月后保留51%.

支气管哮喘患者粒-巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达的研究

目的探讨利用无创伤性方法寻找较为特异性地反映哮喘患者气道炎症的客观指针。方法通过研究哮喘者患者气道粘膜细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)mRNA表达,并以此为参照,分析哮喘患者诱导痰细胞GM-CSFmRNA表达变化;利用免疫组化结合逆转录聚合酶链反应(TR-PCR)技术,分析哮喘组(10例)气道粘膜细胞GM-CSFmRNA表达;用3％高渗盐水诱导痰液,利用TR-PCR技术分析哮喘组(15例)、慢性支气管炎组(15例)和对照组(11例)诱导痰细胞GM-CSFmRNA表达。结果(1)哮喘组气道粘膜嗜酸细胞、淋巴细胞和活化嗜酸细胞EG2细胞数与病情程度呈正相关(r=0.82,P<0.05);(2)哮喘组气道粘膜细胞GM-CSFmRNA表达与对照组比较差异有显著性(P<0.05),并且GM-CSFmRNA的表达与EG2细胞数明显相关(r=0.73,P<0.05)。(3)嗜喘组诱导痰嗜酸细胞相对计算与慢性支气管炎组和对照组比较差异均有显著性(P<0.05);(4)哮喘组诱导痰细胞GM-CSFmRNA表达与慢性支气管组和对照组比较差异均有显著性(P<0.05);慢性支气管炎组与对照组比较,差异也有显著性(P<0.05)。结论诱导痰细胞GM-CSFmRNA过度表达能够较为特异地判断哮喘气道炎症。

支气管哮喘病人三维正脊治疗前后血清TNF-α、GM-CSF测定的临床意义

目的:探讨支气管哮喘病人三维正脊治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平测定的临床意义。方法:选取支气管哮喘患者60名,按入院时间随机分为正脊组、模型组(各30名),另选取30名健康成人作对照组。分别于患者入院后及正脊治疗后10天应用放射免疫分析方法测定血清TNF-α、GM-CSF含量。结果:治疗前支气管哮喘病人血清TNF-α、GM-CSF水平显著高于正常组(p<0.01),经三维正脊仪治疗10d后二者水平与正常人比较则无显著性差异(p>0.05)。结论:三维正脊治疗对支气管哮喘病人具有积极的治疗作用,检测支气管哮喘患者血清TNF-α、GM-CSF水平的变化对了解病情及预后观察具有一定的临床价值。

脑梗死患者血清NSE、GM-CSF含量的临床意义

目的:探讨了脑梗死患者血清NSE和GM-CSF水平。方法:应用放射免疫分析对40例脑梗死患者进行了血清NSE和GM-CSF含量测定,并与35名正常健康人作比较。结果:脑梗死患者血清NSE和GM-CSF水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),经治疗3月后与正常人比较仍有差异(P<0.05)。结论:脑梗死的发生、发展与NSE和GM-CSF水平密切相关。

支气管哮喘患儿TNF、IL-8和GM-CSF检测的临床意义

目的:探讨了支气管哮喘患儿血清TNF、IL-8和集落刺激因子(GM-CSF)水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析测定了32例支气管哮喘患儿血清中TNF、IL-8和GM-CSF含量,并与30名正常健康儿童作比较。结果:支气管哮喘患儿血清中TNF、IL-8和GM-CSF水平均非常显著地高于正常组(P<0.01)经一周治疗后与正常人组比较仍有显著性差异(P<0.05)。结论:观察支气管哮喘患儿血清中TNF、IL-8和GM-CSF水平的变化,对探讨其发病机理,指导临床用药具有十分重要的临床价值。

GM—CSF治疗化疗所致白细胞减少症的疗效观察

我们自1996年7月～1997年7月,运用粒细胞—单核巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)

肺泡蛋白沉积症的职业吸入暴露与血清GM粒-巨噬细胞集落刺激因子自身抗体

肺泡蛋白沉积症（pulmonary alveolar proteinosis，PAP）是以肺泡腔内过量的脂蛋白沉积引起气体交换障碍，造成进行性呼吸功能不全的肺部少见病。PAP可分为先天性、原发性（特发性）和继发性3种类型，其中90％以上为原发性。有关PAP发病机制研究显示患者肺泡腔内脂蛋白沉积主要是由于各种原因导致肺泡巨噬细胞及肺泡Ⅱ型上皮细胞分解代谢肺泡表面活性物质功能障碍所致，粒巨集落刺激因子（GM—CSF）是维持肺泡腔表面活性物质代谢的关键因子。

开发使用GM-CSF的癌基因治疗

美国基因治疗的风险企业Somatix Therapy公司和东京大学医科研究所病态药理教授浅野茂隆宣布签订了共同开发基因治疗合同,即将该公司开发的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因导入患者的癌细胞,再移植,激活患者细胞免疫系统,治疗癌病灶。这项合同是继新泻大学医学部高密度无菌治疗部助教授森山美昭93年12月与美国Genetic Therapy公司签订合同之后在日本签订的第二个合同。

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对球囊损伤内膜修复的影响

目的建立兔髂动脉球囊损伤模型,观察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)对损伤内膜修复的影响。方法健康雄性新西兰大白兔24只随机分为GM CSF组和对照组。GM CSF组皮下注射GM CSF10μg·kg1·d1,对照组皮下注射同等量生理盐水。7d后球囊扩张损伤髂动脉。4周后提取损伤动脉标本,观察内皮修复、内膜增生情况并测定病理形态学参数。结果术后4周病理组织学见GM CSF组内膜增生程度明显轻于对照组,新生内膜中血管平滑肌细胞和纤维组织明显少于对照组,内皮较完整、光滑,管腔狭窄程度较轻。形态学参数见GM CSF组的管腔面积明显大于对照组(1.27mm2±0.31mm2vs0.92mm2±0.24mm2),新生内膜面积与内膜增生百分比明显小于对照组(0.85mm2±0.34mm2vs1.18mm2±0.38mm2;40%±7%vs55%±6%)。结论GM CSF能促进损伤内膜修复,减少内膜增生,降低再狭窄率。

改良CVP联合rhG-CSF动员方案外周血干细胞移植治疗血液肿瘤及实体瘤41例

目的:研究改良CVP联合rhG-CSF方案对血液肿瘤和实体瘤41例患者自体外周血干细胞移植(APBSCT)动员及造血重建效果。方法:2001年3月至2006年3月采用改良CVP联合rhG-CSF动员方案,完成APBSCT41例(血液肿瘤32例,实体瘤9例),平均年龄39.6岁(18岁～67岁)。WBC升至4.0×109/L左右采集单个核细胞(MNC)并计数MNC和CD34+细胞数;预处理结束48h～72h回输MNC。结果:动员期间患者WBC均降至1.0×109/L以下,PLT40×109以下。34例1次采集成功,7例(双次移植5例)作第2次采集。采集MNC数0.9×108/kg～8.3×108/kg(2.8±2.0×108/kg),CD34+细胞1.1×106/kg～9.4×106/kg(3.2±2.6×106/kg)。预处理后所有病例均达到骨髓抑制,WBC恢复到1.0×109/L时间为+8～+16d(平均+11.3d);38例PLT恢复到50×109/L时间为+13～+22d(平均+16.8d),3例PLT恢复延迟,最长+35d。随访15～65个月,持续完全缓解19例(46.3%),部分缓解或好转13例(31.7%),总有效率78.0%,无效9例(22.0%),无1例发生移植相关死亡(其中5例带瘤生存,17例死亡)。结论:改良CVP联合rhG-CSF动员方案行APBSCT是一种安全有效的动员自体外周血造血干细胞的方法,临床疗效满意。

猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达和纯化

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)是一种具有多种生物学活性的细胞因子。本试验根据GenBank发表的猪的GM-CSF基因序列设计特异性引物,对GM-CSF基因片段进行扩增,扩增后的PCR产物经酶切后克隆入pET-28a载体。重组质粒转化入大肠杆菌杆菌BL21中经IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果证明,重组蛋白获得了成功表达,并且主要以包涵体的形式存在。Western blot结果证明重组蛋白具有良好免疫反应性。以上结果为进一步应用重组GM-CSF作为血液干细胞动员剂提供了基础。

去甲斑蝥素对低白细胞模型大鼠骨髓GM-CSF表达的影响

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的低白细胞模型大鼠骨髓粒-单集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法:将90只SD大鼠随机分为模型对照组、空白对照组、NCTD高剂量组、NCTD低剂量组和升白药物对照组;采用腹腔注射CTX(30mg/㎏)方法复制低白细胞大鼠模型后,各药物对照组及空白对照组分别以一定浓度药物、双蒸水灌胃,并于灌胃后第3、6、9天采集外周血及骨髓组织样本进行以下指标检测:(1)全自动血细胞分析仪检测外周血WBC数量;(2)酶联免疫双抗夹心法(ELISA)检测外周血GM-CSF含量;(3)采用免疫组化(IHC)方法检测骨髓组织细胞中GM-CSF的表达。结果:(1)与空白对照组比较,CTX处理后各实验组大鼠白细胞数量显著降低(P<0.05);(2)在CTX诱导的低白细胞模型大鼠中,NCTD高、低剂量组和升白药物对照组外周血WBC显著升高(P<0.05),且GM-CSF在骨髓组织细胞中的表达显著增高(P<0.05),其在外周血中的含量也有增加趋势。结论:NCTD可以显著升高CTX处理后SD大鼠外周血白细胞数量,其机制可能与NCTD上调GM-CSF的表达有关。

医药生物技术产业化的发展与展望

在现代生物技术中,医药生物技术 起步最早,发展也最快。随着一系列基础理论研究的突破,到七十年代末,就有了基因重组的工程菌产生出人脑激素一生长激素释放抑制素。这是基因工程研究上历史性的突破。从那时到现在,只不过二十多年的时间,医药生物技术已发展成为各国竞争的产业。