三氧化二砷对骨髓增生异常综合征粒单系细胞体外作用的研究

为了探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对骨髓增生异常综合征 (MDS)粒单系细胞的体外作用 ,用半固体、液体培养及APAAP法检测不同浓度As2 O3 对 2 4例MDS患者CFU GM和CD33,CD15 ,bcl 2表达的影响。结果发现 ,As2 O3 随着浓度的增加对CFU GM的抑制作用增强 ;0 .388μmol/L时对丛的抑制大于集落 ,其中低危组 70 .78%对 34.0 5 % ,高危组 86.76%对 65 .86% (P <0 .0 1) ;0 .194 μmol/L时使低危组丛减少 ,而使集落增加 ,高危组丛减少 ,集落不变。高浓度 (1.94 μmol/L)时CD33与CD15表达降低 ,bcl 2表达减少 ,细胞出现核染色质固缩 ,胞浆浓缩 ;低浓度 (0 .194μmol/L)时低危组CD33减少 ,CD15增加 ,高危组CD33减少 ,CD15不变 ,bcl 2减少 ,且出现上述细胞形态学改变。由上述结果推测 ,高浓度As2 O3 抑制MDS粒单系造血 ,促使粒单系细胞凋亡 ;低浓度诱导低危组粒单系细胞增殖分化 ,抑制高危组粒单系细胞生长 。

鸡血藤对小鼠粒单系血细胞的影响

目的：研究鸡血藤对小鼠粒单系血细胞的影响。方法：采用造血祖细胞体外培养等技术。结果：鸡血藤灌胃组对放、化疗引起的贫血小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数与粒系细胞分裂指数下降均有升高作用，并对小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的增殖也显示出明显的刺激作用。结论：鸡血藤可通过多途径激活造血系统。

藻蓝蛋白对小鼠粒单系祖细胞生成的影响

藻蓝蛋白(C—phycocyanin,C—PC)是从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中分离、纯化所得。采用造血祖细胞体外培养技术,研究了C—PC对小鼠粒单系祖细胞生成的影响。实验结果表明,C—PC能够提高粒单系祖细胞(CFU—GM)的生成,亦能明显提高正常小鼠血清的集落刺激活性。C—PC体内或体外刺激制备的小鼠脾细胞条件培养液能明显增加CFU—GM的集落数。在有集落刺激因子(GM—CSF)存在时,体外加入C—PC培养粒单系祖细胞,C—PC能明显提高CFU—GM的集落生成率。

当归多糖对人粒单系造血祖细胞增殖分化的调控机理研究

目的 研究当归多糖 (APS)对人粒单系血细胞发生的影响及其调控的机理。 方法 采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测 ,核酸分子原位杂交和免疫细胞化学等实验血液学技术 ,研究APS对人粒单系造血祖细胞 (CFU GM)增殖分化的影响。 结果 APS在体外能显著刺激CFU GM的增殖 ;经APS诱导制备的人胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞条件培养液能明显促进CFU GM增殖 ;经APS体外刺激后骨髓基质细胞、脾细胞和胸腺细胞的GM CSF蛋白和mRNA表达水平显著提高。 结论 APS可能通过直接或间接途径促进淋巴细胞和造血微环境中的基质细胞合成和分泌GM CSF或GM CSF样物质 。

枸杞多糖对小鼠骨髓造血干细胞、粒单系祖细胞增殖分化的影响

枸杞多糖(LBP)10mg·kg^(-1)·d^(-1)ip,连续3d,可促进正常小鼠骨髓造血干细胞(CFU-S)增殖,明显增加骨髓粒单系祖细胞(CFU-GM)数量,促进CFU-GM向粒系分化。

当归多糖对人粒单系祖细胞和粒系白血病细胞株增殖分化的实验研究

目的 :研究当归多糖 (APS)对人粒单系造血祖细胞 (CFU -GM )和急性早幼粒白血病细胞株 (HL - 6 0 )增殖分化的影响。方法 :采用造血细胞体外培养 ,形态学观察 ,流式细胞术和免疫细胞化学等实验血液学技术。结果 :APS对正常CFU -GM的体外增殖有显著刺激作用 ;而对HL - 6 0细胞的增殖却有明显的抑制作用 ;APS可能通过阻止HL - 6 0细胞从静止期进入增殖周期 ,抑制DNA的合成等途径来抑制细胞增殖 ;APS可能诱导HL - 6 0细胞发生凋亡。结论 :APS有可能成为既能促进正常造血 ,又能抑制白血病等肿瘤细胞增殖 ,并诱导其凋亡或分化的天然诱导剂。

人参多糖对粒单系造血祖细胞增殖分化的影响

本文采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测、免疫细胞化学等实验血液学技术检测人参多糖 (GPS)体外作用对人粒单系造血祖细胞 (CFU GM)增殖分化的影响及GPS刺激制备的胸腺细胞培养上清液(HTCM)、脾细胞培养上清液 (HSCM)、骨髓基质细胞条件培养液 (HBMSCM)中GM CSF的生物活性。结果发现 :①在有外源性粒单系集落刺激因子 (GM CSF)存在的情况下 ,GPS能显著促进CFU GM的增殖与分化。②经GPS体外诱导制备的胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞的条件培养液能明显提高人CFU GM的产率。③经GPS体外刺激后 ,胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞GM CSF蛋白表达水平较对照组明显提高。结果表明GPS可能通过直接和 或间接途径促进胸腺细胞、脾细胞和造血诱导微环境中的基质细胞合成和分泌GM CSF或GM CSF样活性 ,进而促进CFU

黄芪注射液对人巨细胞病毒感染的粒-单系祖细胞体外增殖的影响

目的 探讨黄芪注射液对人巨细胞病毒 (HCMV)感染的粒—单系祖细胞 (CFU GM )体外增殖的影响。方法 采用造血祖细胞体外培养技术 ,用黄芪干预HCMV感染的CFU GM ,观察计数CFU GM的产率 ,大小 ,峰期及维持时间。结果 ①黄芪组每 2× 10 5个细胞中CFU GM簇和集落的产率分别为 333.33± 12 .6 9和81.2 3± 4 .93,病毒组每 2× 10 5个细胞中簇和集落的产率分别为 16 7.80± 16 .6 3,5 3.70± 1.6 7,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。②黄芪组大集落的比例占 (9.5± 0 .8) % ,明显高于病毒组 (2 .7± 1.0 ) % ,P <0 .0 1。③黄芪组大集落峰期出现早 ,集落和大集落维持时间长。结论 在体外黄芪注射液可以促进HCMV感染的CFU GM增殖。

当归多糖对小鼠粒单系血细胞发生的影响

采用造血祖细胞体外培养等技术研究当归多糖(AP)对小鼠粒单系血细胞发生的影响.结果表明:注射AP对正常或骨髓抑制,贫血鼠的粒单系祖细胞(CFU-GM)增殖有明显刺激作用;AP体内、外刺激制备的脾细胞条件培养液,腹腔巨噬细胞培养上清液对CFU-GM增殖具有较高刺激活性;AP体内注射制备的肌条件培养液亦对CFU-GM增殖有较高调控活性;注射AP对骨髓粒单系造血有显著促进作用;并能增高外周血白细胞.提示AP可能通过直接和/或间接途径激活造血微环境中的巨噬细胞、淋巴细胞等,也可刺激肌组织,促进其产生造血调控因子,进而促进多能造血干细胞和CFU-GM增殖分化,这或许是当归"补血"的细胞生物学机理之一.

乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周白细胞的影响

目的探讨乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周血WBC的影响。方法用不同剂量的乌贼墨灌胃正常小鼠、环磷酰胺(Cy)和辐射骨髓损伤模型小鼠,采用造血祖细胞体外培养方法和实验血液学技术,检测小鼠骨髓造血干细胞生成数(CFU-S)、粒-单系祖细胞集落生成数(CFU-GM)和外周血WBC数量。结果乌贼墨能够显著提高正常小鼠CFU-S,CFU-GM和外周血WBC数量,有效拮抗模型小鼠体内CFU-S,CFU-GM及外周WBC的降低,并显著促进模型小鼠上述各指标的恢复。结论乌贼墨具有显著的促进小鼠骨髓粒系造血作用。其作用机制可能通过调节机体的免疫机能,诱导机体产生粒/单核细胞集落刺激因子和多种细胞因子,促进造血细胞的增殖,并诱导造血细胞向粒单系细胞分化。

黄芪对辐照小鼠粒-单系造血祖细胞的影响

目的 :探讨黄芪对造血功能的影响及作用机制。方法 :采用造血祖细胞体外培养和体内扩散盒植入技术 ,观察黄芪对辐照小鼠粒 单系造血祖细胞 (CFU GM)的影响。结果 :体内培养证明 ,辐照前、后用药组CFU GM分别为 (2 7 14± 5 88)个 / (4× 10 5BMC)和 (2 6 38± 4 90 )个 / (4× 10 5BMC) ,均较辐照对照组 (16 5 8± 3 37)个 / (4×10 5BMC)明显增高 (P <0 0 1) ,而体外培养未显示刺激活性。结论 :黄芪可刺激体内造血干细胞的增殖与分化 ,对辐照小鼠的骨髓具有保护作用。

胎盘血移植特性的研究——Ⅰ.人胎盘血粒单系祖细胞体外长期培养观察

本文采用体外甲基纤维素长期培养观察脐血(又称胎盘血)粒单系集落形成单位(CFU—GM)生长情况。结果:脐血(n=20)7、14、21、28天CFU—GM产率分别为28.78±37.82、143.30±168.64、286.40±497.00、107.93±131.98/2×10~5,35天(n=13)为93.27±111.20,42天(n=6)为68.67±103.30/2×10~5;14、21、28天脐血与7天骨髓的产率(180.91±134.07)无明显差异(P>0.05)。正常骨髓CFU-GM产率:14天(n=11)、21天(n=9)、28天(n=6)分别为115.14±87.85、59.81±68.05、25.00±20.45/2×10~5,14天集落产率开始下降,21天后明显减少;14天后集落脐血明显大于骨髓,细胞>1000个细胞,有些特大集落,>5000个细胞;脐血集落细胞于35天开始部分溶解(骨髓为14天,21天时多已完全溶解)。可见脐血造血细胞体外培养维持时间明显长于骨髓造血细胞(4～6^+周/3周~±),表明脐血造血细胞的生物学特性不同于骨髓造血细胞——富含扩增潜能更强、可维持长期造血重建的早期造血干细胞群。

人类巨细胞病毒对粒单系祖细胞分化过程中HOXB6、A5基因的影响

目的探讨人类造血干细胞(HSPC)向粒单系(CFU-GM)增殖过程中HOXB6、A5基因的表达情况,及人类巨细胞病毒(HCMV)对其的影响。方法采用real-timePCR技术测定正常对照组与HCMV组HSPC向CFU-GM增殖过程中HOXB6、A5基因的表达水平。结果①HOXA5基因表达多为阴性,HOXB6基因在增殖过程的第3天开始表达,第7天增高,第12天显著降低(P<0.05)。②相对于正常组,HCMV感染组HOXB6基因表达下调(P<0.05)。结论HOXA5可能不是人类HSPC向CFU-GM增殖分化过程的主控基因;HOXB6是人类HSPC向CFU-GM定向分化的主控基因之一,其表达呈现时间规律性;HCMV干扰的细胞组HOXB6表达下调的同时,其细胞集落生成较正常组差。提示HCMV可能通过调控HOXB6基因表达异常,引起造血干细胞增殖分化异常。

粒单系造血祖细胞CFU-GM琼脂半固体培养的原位固定及鉴定染色

用粒单系造血祖细胞 (CFU- GM)体外琼脂半固体培养法 ,琼脂块原位固定 ,Wright染色与细胞化学和免疫细胞化学技术 ,对培养人的骨髓 CFU- GM进行集落性质鉴定。结果表明 :Wright染色能区别集落的性质及细胞的分化程度 :CFU-GM的细胞中 PAS、POX呈阳性反应 ;CD14、CD15分别在单核细胞和粒细胞的胞浆或胞膜上表达。该方法对鉴定细胞集落类型、集落中细胞的分化与成熟程度是简便可靠的手段。

骨髓基质细胞对放射损伤复合烧伤小鼠粒单系祖细胞生长的影响

研究骨髓基质细胞对放射损伤复合烧伤小鼠粒单系祖细胞的影响。结果表明：（１）基质细胞培养上清液可支持少量粒单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）生长；而骨髓贴壁细胞层对ＣＦＵ－ＧＭ有明显刺激生长作用。（２）加入外源性粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）时，未见到基质细胞对粒系祖细胞生长的影响。（３）烧伤、放射损伤、放射烧伤复合伤伤后３～５ｄ，均见到ＣＦＵ－ＧＭ生长受抑制。损伤后仍能见到基质细胞对粒系细胞生长的刺激作用。粒细胞受抑制严重的单放组和复合伤组，基质细胞的刺激作用较单烧伤组明显。以上结果说明，在放烧复合伤造血损伤的修复与重建过程中。

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者骨髓粒单系祖细胞的体外培养研究

本文采用造血祖细胞体外培养技术，研究了阵发性睡眠性血红蛋白尿（ＰＮＨ）病人骨髓粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）的增殖能力；骨髓细胞经酸化ＡＢ型血清处理后ＣＦＵ－ＧＭ的增殖能力；和ＣＦＵ－ＧＭ对粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的反应能力，发现ＰＮＨ病人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ集落数明显低于正常；骨髓细胞经新鲜酸化ＡＢ型血清处理后培养的ＣＦＵ－ＧＭ集落数明显低于经热灭活酸化ＡＢ型血清处理后培养的集落数；ＣＦＵ－ＧＭ对ＧＭ－ＣＳＦ的剂量反应曲线低平。因此认为ＰＮＨ病人骨髓粒单系祖细胞膜缺陷导致其在酸性条件下对补体的敏感性增高而致损伤或溶解和导致其对粒单系集落刺激因子的敏感性降低。

重组白介素1α对粒单系祖细胞的辐射防护作用(英文)

高剂量(0.5或1.62 mg·kg^(-1))重组人白介素1α(IL-1α)在照射前给药时能抗辐射对C_3H小鼠骨髓粒单系祖细胞的损伤,照射前4h给药时GM-CFC的数目是照射前20h给药的1.70倍.实验进一步观察了IL-1α对血清粒单系集落刺激因子(GM-CSF)的产生以及GM-CFC在细胞周期中分布的变化,结果表明,IL-1α给药3.5 h后,使血清GM-CSF的产生达到最高水平,12 h后,恢复至给药前水平;相反,给药4h后对GM-CFC的细胞周期分布无影响,而20 h后,能诱导GM-CFC进入细胞周期的S期,提示IL-1α在照射前不同时间给药对GM-CFC的辐射防护作用的差异可能与GM-CFS产生及细胞周期的重分布有关。

三种巨噬细胞培养上清液对辐照小鼠粒-单系血发生的影响

目的探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对辐照小鼠粒-单系血细胞(CFU-GM)发生的保护作用。方法采用造血祖细胞体外培养技术观察三种不同部位的巨噬细胞培养上清液对粒-单系造血祖细胞(CFU-GM)集落数的影响。结果三种培养上清液均能促进辐射损伤小鼠的CFU-GM的分化与增值,而Kupffer细胞培养上清液的上述作用更明显。结论三个部位的巨噬细胞对辐射损伤小鼠的CFU-GM发生均具有保护作用,且以Kupffer细胞效果更好。

动态观察黄芪对人巨细胞病毒感染的粒—单系祖细胞体外增殖的影响

目的 :动态研究黄芪注射液对人巨细胞病毒 (HCMVAD1 6 9)感染的人脐血粒 -单系祖细胞 (CFU-GM)体外增殖的影响。方法 :隔日计HCMVAD1 6 9体外持续感染后 1～ 19天内黄芪注射液对CFU -GM细胞簇、集落、大集落及细胞总数变化规律。结果 :培养后各组CFU -GM增殖均有不同程度的增加 ,7天达峰后减少。病毒组CFU -GM增殖均较空白组有明显降低 (P <0 0 5 ) ;黄芪组、更昔洛韦组和空白组细胞增殖明显高于病毒组 (P <0 0 1) ;更昔洛韦组和黄芪组CFU -GM增殖显著高于病毒组 (P <0 0 5 )。结论 :黄芪注射液可以促进体外培养HCMV感染CFU -GM的增殖。

小鼠粒一单系祖细胞(CFU-GM)培养中几个影响因素的观察分析

目的 :观察分析影响小鼠粒单系祖细胞 (ColonyFormUnit GranulocyteandMonocyte ,CFU GM )在体外生长的因素 ,建立本实验室常规 ,稳定的CFU—GM培养方法。方法 :在含血清、刺激因子、培养液、琼脂和骨髓有核细胞 (BoneMarrowCell,BMC)的培养体系中 ,分别变换血清种类、刺激因子来源、琼脂配制方法和BMC浓度 ,计数、比较祖细胞集落。结果 :在其它条件相同时 ,马血清和新生小牛血清组的集落产率分别为 72± 12 9和 34± 4 78,P <0 0 1;第一次培养的鼠肌条件培养液和第二次培养的鼠肌条件培养液作为刺激因子组的集落产率分别为 5 8 2 5± 11 6 8和 44 5± 7 46 ,P <0 0 1,经冻存并自然融化后去除上清液的鼠肌条件液和未去除上清液的鼠肌条件液作为刺激因子组的集落产率分别为 42± 2 13和 6 0± 12 6 49;P <0 0 1,以三蒸水配制的琼脂和D -Hank’s液配制的琼脂作为支撑物 ,集落产率分别为 18 5 7±3 33和 42 5± 1 93 ,P <0 0 1;在含马血清、第一次培养的鼠肌条件液和D Hank’s液配制的琼脂的体系中 ,集落产率与所种入BMC的浓度的相关系数r =0 .91。结论 :在BMC浓度和培养液不变的条件下 ,以马血清为血清 ,第一次培养的肌条件液为刺激因子 ,D Hank’s液配制的琼脂为支撑物 ,集落产率最高 ,且方法稳?