粒—巨噬细胞集落刺激因子治疗化疗相关性口腔黏膜炎的临床疗效

目的 观察粒—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)治疗化疗相关性口腔黏膜炎(CIOM)的临床疗效。方法 选取2020年11月—2022年8月福建医科大学附属第二医院收治的CIOM患者89例作为研究对象,采用随机数字表法分为GM-CSF组(45例)和浓替硝唑组(44例)。浓替硝唑组患者接受浓替硝唑含漱液漱口,GM-CSF组患者在浓替硝唑组治疗的基础上给予注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子喷涂口腔溃疡处。比较2组临床疗效,治疗前后生活质量特异性量表(OMQoL)评分、化疗依从性行为问卷(CCBQ)评分及化疗延期率。结果 GM-CSF组总有效率为88.89%,高于浓替硝唑组的68.18%(χ^(2)=5.681,P=0.017)。治疗2个疗程后,2组OMQoL及CCBQ评分高于治疗前,且GM-CSF组高于浓替硝唑组(P<0.01)。GM-CSF组化疗延期率低于浓替硝唑组(12.92%vs.22.44%,χ^(2)=5.246,P=0.022)。结论 GM-CSF治疗CIOM的有效率更高,患者的生活质量更好,而且患者的化疗依从性更高,值得推广应用。

粒巨细胞集落刺激因子预防化疗后口腔溃疡的研究

目的 :为减轻化疗所致口腔溃疡给患者带来的痛苦 ,探讨预防化疗所致口腔溃疡的有效方法。方法 :6 3例患者随机分成两组 ,从第 2疗程化疗中开始 ,A组用 3%的碳酸氢钠漱口液 ,B组用粒巨细胞集落刺激因子 (GM -CSF)漱口液。结果 :患者对两组漱口液均能耐受使用 ,但两组相比 ,粒巨细胞集落刺激因子漱口液改善口腔粘膜反应程度效果优于碳酸氢钠漱口液。结论 :粒巨细胞集落刺激因子对化疗所致口腔溃疡有显著疗效 ,可减轻化疗所致口腔溃疡患者的痛苦 。

双黄升白冲剂与粒-巨噬细胞集落刺激因子治疗肺癌化疗骨髓抑制44例临床研究

目的:观察中药双黄升白冲剂对非小细胞肺癌患者化疗所致骨髓抑制、白细胞减少的疗效.方法:选择化疗复治为主的中医辨证为气阴两虚的非小细胞肺癌患者44例,按自身交叉对照随机分为AB、BA两组,每例连续化疗两个周期.A为治疗周期,化疗后白细胞(WBC)≤2.5×109/L起口服双黄升白冲剂;B为对照周期,化疗后WBC≤2.5×109/L起用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)皮下注射.动态检测WBC、嗜中性粒细胞计数(ANC),并观察临床症状变化.结果:升高WBC有效率A、B两周期分别为77.27%、79.55%,两周期差异无显著性(P＞0.05);WBC与ANC减少持续时间A周期长于B周期;临床症状改善率A周期优于B周期.结论:中药双黄升白冲剂对肺癌化疗所致骨髓抑制具有明显的升高白细胞、改善临床症状的作用.

烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子表达的影响

目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响及其可能机制。方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20 mg/L)的烟曲霉菌提取物(Aspergillus fumigatus extract,AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间(12、24、48、72 h)。同时还应用热处理的AFE(heat-treated AFE,HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)、蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)激动剂(SLIGLV-NH2)和PAR-2阻断剂(FSLLRY-NH2)作用16HBE-14o细胞。应用ELISA法检测细胞上清液GM-CSF含量,同时应用RT-PCR法检测GM-CSF mRNA的表达。结果:正常培养条件下的对照组细胞仅表达分泌少量GM-CSF,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌GM-CSF的量较对照组明显增加(P<0.05),并呈明显的时间和浓度依赖性。PAR-2激动剂同样可以促进细胞合成分泌GM-CSF。丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2阻断剂几乎完全抑制AFE的上述作用。HT-AFE的蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞GM-CSF表达增加。结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活PAR-2受体,促进呼吸道上皮细胞GM-CSF合成和分泌,从而促进哮喘的发生和发展。

不同质量浓度粒巨噬细胞集落刺激因子对Lewis大鼠骨髓源性树突状细胞诱导分化的影响

背景：体内成熟和不成熟树突状细胞（dendritic cells,DC）数量极少,仅占外周血单核细胞的1%,占脾细胞的0.2%-0.5%,几乎不能直接从体内分离出大量的纯化的DC,要获得足够的DC,只有依靠体外培养增殖。目的：以不同剂量粒巨噬细胞集落刺激因子诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,拟建立合适的大鼠骨髓源性未成熟DC的培养方法。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/2008-05在苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室和附属儿童医院骨科实验室完成。材料：雄性SPF级Lewis大鼠用于培养骨髓源性DC,雄性SPF级Brown Norway大鼠用于混合淋巴细胞反应实验。方法：采用密度梯度离心法从Lewis大鼠股骨和胫骨获取骨髓源性单个核细胞,分别以2.5,5,10,20μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子和5μg/L白细胞介素4诱导分化获得大鼠骨髓源性DC,采用黏附法纯化DC。主要观察指标：以流式细胞仪分析DC表型。混合淋巴细胞反应中以Lewis大鼠DC作为刺激细胞,以Brown Norway大鼠脾脏T细胞作为反应细胞,检测其刺激同种T细胞增殖能力。ELISA测定分泌细胞上清液中白细胞介素12、干扰素水平。结果：随粒巨噬细胞集落刺激因子质量浓度的增高,诱导的细胞获得率逐渐升高,但DC比例逐渐下降。CD86、MHC-II表达阳性率随培养时间延长逐渐增加。培养第5,7天,DC不能有效刺激同种异体T细胞的增殖反应,培养第13天,DC刺激同种异体T细胞的增殖反应能力明显增强（P〈0.01）。培养7d以后,DC上清液中白细胞介素12水平明显增高（P〈0.01）,脂多糖刺激以后升高更加明显（P〈0.01）。脂多糖刺激后DC表型MHCII、CD86表达明显增加,白细胞介素12分泌增加,刺激同种T细胞增殖能力轻度增强。结论：5μg/L粒巨噬细胞集落刺激因子为诱导大鼠骨髓源性未成熟DC的最佳剂量,培养9d可以获得足够数量和纯度的未成熟DC。

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和N端测序鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构

目的 :应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI -TOF -MS)和N端测序方法鉴定重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构。方法 :1 用Edman降解法进行N端测序。 2 应用MALDI-TOF -MS测定分子量并鉴定纯度。 3 通过还原、烷基化确定rhGM -CSF分子中二硫键数目。 4 通过蛋白内切酶Glu -C酶切的肽质量指纹谱确证氨基酸序列并确证其中两对二硫键的配对。结果 :1 测定的rhGM -CSFN端 15个氨基酸序列与从cDNA推导的序列一致。 2 测定的rhGM -CSF分子量与理论计算值一致。 3 证明rhGM -CSF没有自由巯基 ,含有两对二硫键 ,与理论值一致。 4 证明rhGM -CSF的氨基酸序列是正确的 ,并确证其中的两对二硫键配对正确。结论 :确证重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM -CSF)的结构是正确的 ,没有修饰、变异和氨基酸的丢失。应用的方法灵敏、准确。

白细胞介素15和粒-单核集落刺激因子激活的自然杀伤T细胞对神经母细胞瘤细胞的杀伤作用

目的 研究白细胞介素 15 (IL 15 )和粒 单核集落刺激因子 (GM CSF)对健康儿童自然杀伤T细胞(NKT)增殖和对NKT细胞介导的神经母细胞瘤 (NB)细胞的细胞毒作用的影响。方法 采集分离健康儿童外周血T细胞 ,分别加入IL 15 ,GM CSF培养 ,MTT法检测T细胞增殖程度的变化 ,流式细胞仪检测NKT/T比例并分选出NKT细胞 ,MTT法检测NKT细胞对NB细胞毒作用。结果 IL 15刺激组、GM CSF刺激组和IL 15 +GM CSF刺激组T细胞增殖程度分别是对照组的 1.2 5倍、1.2倍和 1.4倍 (均P <0 .0 1) ;NKT/T比例分别是对照组的 2 .5 6倍、3.2 7倍和 4 .39倍 (P <0 .0 1或 0 .0 5 ) ;GM CSF组和IL 15 +GM CSF组NKT细胞毒作用高于对照组 (均P <0 .0 1) ,IL 15组NKT细胞毒作用与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。与GM CSF组比较 ,IL 15 +GM CSF组T细胞增殖程度增高但NKT/T比例和NKT细胞毒作用差异无显著性。与IL 15组比较 ,IL 15+GM CSF组NKT/T比例和NKT细胞毒作用增高但T细胞增殖程度差异无显著性。IL 15组与GM CSF组T细胞增殖程度、NKT/T比例和细胞毒作用差异无显著性。结论 NKT细胞对NB具有细胞毒作用 ,IL 15和GM CSF联合应用可以促进健康儿童外周血NKT细胞增殖 ,增强NKT细胞对NB细胞毒作用。

重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子治疗放射性食管炎的疗效

目的探讨重组人粒一巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）对放射性食管炎的疗效。方法对31例出现3级放射性食管炎的患者口服5ml注射用水＋300μgrhGM-CSF＋75％甘油20ml的混合液分4次，每间隔1小时用药1次，连用5d。结果31例中，放射性食管炎自3级退回至0～1级者13例（41．94％），退至2级者15例（48．39％），继续维持在3级者3例（9．68％），总有效率为90．32％。结论rhGM-CSF对放射性食管炎具有明显的治疗作用。

撤除粒-巨噬细胞集落刺激因子对TF-1细胞生长的影响

采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF 1细胞的增殖活性 ,经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF 1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定凋亡过程中Caspase 3活性的改变。结果发现 ,撤除细胞因子后 4 8h ,细胞存活率为正常培养时的 4 8 8% ;电镜显示TF 1细胞出现了凋亡典型的变化。细胞凋亡率在撤除因子后 2 4h、4 8h时分别为 2 1 2 3%和 71 36 % ,TF 1细胞被阻滞在G0 G1 期。细胞内Caspase 3活性在撤除因子后 12h、36h时明显升高 ,荧光度分别为 6 32 1和 1782 3。结果表明 ,撤除因子后可导致TF 1细胞凋亡 ,Caspase 3活化参与了此凋亡过程。另外通过MTT实验观察到一种新型造血刺激因子粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF) 白细胞介素 3(IL 3)融合蛋白可维持TF

粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)临床应用现状及进展

粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)是诸多造血因子中重要一员,自90年代应用于临床以来,特别是肿瘤放疗、化疗所致的白细胞减少、骨髓移植、骨髓异常增生综合征、再生障碍性贫血等治疗取得了一定疗效.近年来的临床应用中又发现对放、化疗所致粘膜炎、真菌感染、病毒性肝炎、糖尿病合并脂肪渐进性坏死的不愈性小腿溃疡和肺泡蛋白沉积症等亦有较好的疗效,现综述如下.

严格掌握使用粒细胞集落刺激因子的适应证

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可以作用于粒系前体造血干细胞和外周成熟的效益细胞,促进其增殖、分化。G-CSF促使组织修复和血管生成的效能使其在临床上得到广泛使用,与此同时,G-CSF及受体在肿瘤中的表达及该药物的不良反应也引起了关注,本文旨在探讨G-CSF功效及副作用,引起临床医师的重视,把握适应证,指导合理用药。

粒-巨噬细胞集落刺激因子在流产患者血清中的浓度及在子宫蜕膜组织中的表达研究

目的测定粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在流产患者血清中的浓度及在子宫蜕膜组织中的表达量,探讨其意义并分析可能的影响因素。方法前瞻性留取2012年5月至2014年10月间就诊的先兆流产、难免流产患者与同期正常妊娠妇女外周血及子宫蜕膜组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定先兆流产(58例)、难免流产(40例)、正常妊娠妇女(50例)血清GM-CSF浓度,并采用实时PCR技术分别检测难免流产(16例)、正常妊娠者(23例)子宫蜕膜组织中GM-CSF mRNA的表达量。运用统计学方法比较各组间GM-CSF水平差异,分析血清GMCSF浓度与蜕膜GM-CSF mRNA的表达量的相关性,并探讨GM-CSF水平与患者年龄、孕龄、血清β人绒毛膜促性腺激素(β-h CG)水平及孕酮水平的关系。结果先兆流产组与正常妊娠组血清GM-CSF浓度分别为(497.8±25.4)pg/ml、(543.1±29.3)pg/ml,均显著高于难免流产组血清GM-CSF水平(186.7±16.8)pg/ml(P<0.05)。难免流产组子宫蜕膜组织中GM-CSF mRNA的表达相对值(1.952±0.166)显著低于正常妊娠组(3.203±0.257)(P<0.05)。难免流产组和正常妊娠组的血清与蜕膜组织中GM-CSF水平均呈高度正相关(r=0.921、0.854,P<0.05)。三组患者的血清GM-CSF水平均与其年龄因素无关,而与孕龄呈中度正相关(r=0.723、0.573、0.509,P<0.05),与血清β-h CG水平(r=0.417、0.381、0.453,P<0.05)及孕酮水平(r=0.359、0.302、0.467,P<0.05)低度正相关。结论(1)难免流产患者血清GM-CSF水平显著低于正常妊娠妇女,提示GM-CSF在妊娠维持中可能起保护作用,GM-CSF水平降低至一定水平将导致流产发生。(2)GM-CSF在先兆流产和难免流产患者体内水平有显著性差异,提示测定流产患者体内GM-CSF水平对于判断预后具有一定意义。(3)妊娠时的血清和蜕膜组织中的GM-CSF水平具有高度相关性,反映了血清GM-CSF主要来源于蜕膜组织。(4)GM-CSF在妊娠维持中的作用可能与h CG和孕酮作用有关。

粒-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠体内树突状细胞增殖和活化的影响

目的:研究粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在体内对树突状细胞(DC)增殖和活化的影响。方法:将Balb/c小鼠随机分为GM-CSF处理组和对照组,致死量γ射线照射后移植入绿色荧光蛋白(GFP)标记的骨髓来源的造血干细胞(HSC),GM-CSF处理组隔天皮下注射0.1μg直至处死,对照组隔天皮下注射PBS。应用流式细胞仪分析和比较两组移植后1,2,3及4周小鼠脾脏内DC的数目、活化状态和随时间变化的DC动力学。结果:移植后各时间点GM-CSF处理组小鼠脾脏内DC数目明显高于对照组(均P<0.05),其中最大高出倍数为5倍;GM-CSF处理组DC的CD40,CD80和CD86均高于处理组;骨髓移植后第1周,小鼠脾脏内即出现HSC来源的DC,第2周数目开始上升,至第3周达到高峰,第4周开始下降。结论:GM-CSF对体内HSC分化为DC具有促进作用,并且可促进体内DC的成熟与活化。

重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子治疗放射性口腔黏膜炎疗效分析

目的观察重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)局部应用对放射性口腔黏膜炎的疗效。方法56例头颈肿瘤患者随机分为两组,治疗组32例,使用rhGM-CSF漱口液含漱(rhGM-CSF100μg冻干粉末用1ml蒸馏水溶解后加入200ml生理盐水中),5次/d;对照组24例,常规处理。根据RTOG急性放射性黏膜炎的分级标准进行临床评价。结果治疗组Ⅲ、Ⅳ度急性放射性口腔黏膜损伤发生率18.8%(6/32),明显低于对照组(75.0%,18/24;P=0.0001)。rhGM-CSF治疗放射性口腔黏膜损伤的有效率较对照组显著提高(87.5%对45.8%,P=0.0019),口腔黏膜溃疡平均愈合时间5d。结论rhGM-CSF局部应用,对放射性口腔黏膜损伤有很好的治疗作用,可刺激表皮生长因子活性,促进溃疡早日愈合。

粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合动员异基因造血干细胞移植

背景:目前FDA已批准应用于临床外周血造血干细胞移植的动员剂只有粒细胞集落刺激因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子,其中粒细胞集落刺激因子单药应用是目前最主要的动员方案,但可引起供者骨骼肌肉酸痛、发热等不良反应。目的:回顾性分析以粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案的异基因造血干细胞移植临床效果。方法:选择2004-01/2009-10河南省人民医院血液科以粒细胞集落刺激因子与粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案进行血缘全相合异基因造血干细胞移植51例,分析移植物成分、造血重建及移植物抗宿主病的发生率。结果与结论:动员96h后CD34+细胞占单个核细胞的比例为(0.97±0.13)%,CD34+CD38-细胞占CD34+细胞的比例为(37.49±4.03)%;移植后的快速造血重建与CD34+细胞、CD34+CD38-细胞输入量呈负相关。Ⅰ度、Ⅱ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病的发生率分别为25.5%,15.7%;局限性、广泛性慢性移植物抗宿主病的发生率分别为39.2%,21.2%。提示在血缘全相合异基因造血干细胞移植中,粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合可有效实现干细胞动员,所获CD34+细胞完全可以满足快速造血重建的需要;输入较多的CD34+细胞、CD34+CD38-细胞可能利于快速造血重建。

重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅱ)

目的 在成功构建人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)高效表达克隆的基础上对其表达产物进行分离纯化,并对rhGM—CSF在溶液中的构象、稳定性、变复性等进行研究。方法 在纯化研究基础上利用傅里叶变换红外光谱技术(FTIR)对rhGM—CSF的构象进行研究,同时应用聚乙二醇(PEG)和牛肝二硫键异构酶(PDI)对GM—CSF的复性及体外折叠作用进行分析。结果 利用FTIR技术可见GM—CSF在D_2O溶液中20℃时含35％0α—螺旋,32％β—螺旋,11％转角和20％无规卷曲。适当PEG可使蛋白得率和比活性均达到最高,PDI可以提高蛋白质的正确折叠率。结论 采用FTIR研究蛋白质在溶液中的构象耗时短、重复性好、样品耗量小,对产品的质量控制及批间产品的稳定性具有指导价值。加入适当比例的PEG和PDI可使蛋白得率和比活性明显提高。

糖尿病创面愈合与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子关系的研究

目的探讨糖尿病创面愈合与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的关系。方法70只C57BL/6小鼠分为野生小鼠组(对照组,n=35)和糖尿病模型组(DM组,n=35)。腹腔麻醉后在背部中线两侧各制作0.8cm×0.8cm创面。创面动态摄像并于相应时间段取标本,观察创面组织愈合情况,同时计算创面愈合率;ELISA法测定创面GM-CSF表达,显微镜下观察各组创面免疫细胞数目。结果创面形成后第3天起,DM组小鼠创面愈合率较对照组明显下降,以创面形成后7d内变化最为明显;创面形成后第1天,两组小鼠创面GM-CSF表达均明显增高;创面形成后第1天和第3天,对照组小鼠创面GM-CSF表达显著高于DM组。2组动物在伤后第5天,T淋巴细胞均达到峰值,DM组显著低于对照组,7～14天DM组稍高于对照组。结论GM-CSF的低表达则可能与创面愈合早期炎症细胞浸润减少有关。

粒细胞、粒巨噬细胞集落刺激因子在新生儿期的应用

新生儿感染的发病率及病死率较高，吞噬细胞系统不成熟是主要原因之一。粒细胞、粒巨噬细胞集落刺激因子可刺激粒巨噬细胞增殖、分化，增强中性粒细胞和单核巨噬细胞功能。临床上应用重组人类集落刺激因子治疗和预防新生儿感染取得了令人鼓舞的效果。

DISA显像对急性心肌梗死患者粒-巨噬细胞集落刺激因子治疗后的疗效评价

目的使用DISA心肌存活显像的方法,对粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)动员外周血干细胞辅助治疗急性心肌梗死患者的安全性及近期临床疗效进行评价。方法选取我院心内科收住的急性心肌梗死患者20例(均为男性),随机分为用药组(10例)和对照组(10例)。显像前,于静息状态下静脉注射99mTc-MIBI 925 MBq,调整血糖水平至7.8～8.8 mmol/L,1 h后静脉注射18F-FDG296 MBq,45～60 min后进行显像。采用Millinium VG+Hawkeye双探头hPET/CT仪,分别使用两个能窗[(140±20)kev;(511±30)kev]对99mTc-MIBI和18F-FDG同时采集(步进式采集,1帧/3,共采集60帧)。常规断层重建,同时获得99mTc-MIBI和18F-FDG图像。采用心肌20分区评分法判断心肌存活情况;对比灌注、代谢缺损面积。结果20例患者共检出心肌存活8例,检出率为40%,其中对照组2例、用药组6例(P<0.05)。用药组99mTc-MIBI靶心图缺损面积为40.00±13.36,18F-FDG图像缺损面积为33.33±9.30,后者较前者明显减小,提示存活心肌增加;对照组99mTc-MIBI靶心图缺损面积为38.40±13.54,18F-FDG图像缺损面积为37.45±14.84,后者与前者比较无明显变化,提示存活心肌未见增加。结论一日法DISA心肌灌注/代谢显像,能全面评价冠心病患者的心肌灌注及存活状况,可作为评价急性心肌梗死患者GM-CSF治疗后疗效的重要手段之一。