氨磷汀与峰龄多糖对人外周血粒-巨噬祖细胞的化疗保护作用

目的 观察氨磷汀 (amifostine ,化学代号 :WR 2 72 1)和峰龄多糖 (fenglingpolysaccharide ,FLPS)对人外周血粒 -巨噬祖细胞 (CFU GM )及HL60白血病细胞的化疗保护作用。方法 应用Ficoll分离单个核细胞 (MNC) ;甲基纤维素半固体培养法测定CFU GM集落 ;XTT法测定HL60细胞存活率 ;WR 2 72 1及FLPS处理的MNC ,与VP 16作用后 ,测定CFU GM集落产率 ,研究WR 2 72 1和FLPS对CFU GM的保护作用。结果 经WR 2 72 1和FLPS处理的MNC与VP 163 7℃作用 14h后 ,CFU GM集落产率均明显高于VP 16对照组 ,CFU GM集落数在VP 16对照组、空白对照组、WR 2 72 1+VP 16组、FLPS +VP 16组和WR 2 72 1+FLPS +VP 16组分别为每 1× 10 5个MNC 3 0 .9± 2 2 .5、83 .2± 43 .8、64 .6± 41.2、5 5 .3± 3 3 .5和 78.3± 48.2 ,与VP 16对照组相比 ,P值均 <0 .0 1;WR 2 72 1处理后的HL60细胞对VP 16的敏感性增强 ,IC50 由 5 2 .5 μg/ml下降为 40 .5 μg/ml ;VP 16对FLPS处理前后的HL60细胞的作用无明显改变。结论 WR 2 72 1和FLPS对人外周血CFU GM具有明显化疗保护作用。WR 2 72 1能增强HL60细胞对VP 16的敏感性。

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞对粒-巨噬系祖细胞生长的影响

为了进一步阐明放射损伤复合烧伤(放烧复合伤)时骨髓造血基质细胞支持粒-巨噬系祖细胞造血能力的变化,采用小鼠骨髓基质细胞体外融合培养和粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)培养的方法,观察了5Gy照射复合15％Ⅲ度烧伤时基质细胞对支持CFU-GM生长的影响。结果表明:①单纯5Gy照射,单纯烧伤及放烧复合伤后,其骨髓基质细胞支持正常粒-巨噬系祖细胞造血的能力明显下降,以伤后3-5天最为显著,伤后10天仍未恢复至正常;②当骨髓基质细胞和粒-巨噬系祖细胞均受到致伤因素作用时,单纯照射及放烧复合伤组的CFU-GM形成能力下降更为明显,至正常对照组的10％以下,单纯烧伤组也有明显下降,但恢复较快;③在本研究所涉及的各种情况下,损伤的效应均有伤后3-5天达最低值的规律,之后可不同程度地恢复。实验结果提示,在上述损伤因素的作用下骨髓基质细胞的功能确已受到了不同程度的损伤,因此在治疗由此所引起的造血功能障碍时,同时加强促进基质细胞修复的措施,可能会取得更满意的疗效。

人参皂甙Rg1和Rb1对骨髓粒-巨噬系祖细胞增殖的作用

用体外造血祖细胞集落形成技术 ,观察人参皂甙Rg1和Rb1对正常人粒 巨噬系祖细胞(CFU GM )的刺激增殖作用。实验结果表明 :Rg1浓度为 2 .5 ,5 ,10和 5 0 μg ml时CFU GM集落产率均显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,提高率分别为 (39.8± 3.6 ) % ,(70 .6± 6 .8) % ,(6 3.0± 6 .4 ) %和 (6 0 .8± 5 .9) %。Rb1浓度为 0 .5 ,2 .5 ,5 ,10和 5 0 μg ml时CFU GM集落产率均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,提高率分别为 (2 4 .5± 2 .3) % ,(45 .6± 4 .7) % ,(5 4.6± 6 .1) % ,(6 5 .1± 6 .3) %和(5 8.3± 5 .7) %。高浓度 (5 0 μg ml)不显示抑制作用。上述结果说明 ,Rg1和Rb1对CFU GM具有明显的刺激增殖作用 。

丹参注射液对家兔粒-巨噬系祖细胞动员作用的研究

以体外半固体琼脂培养方法观察了家兔循环血CFU-GM的一般特性及丹参注射液对家兔CFU-GM的动员作用。研究结果显示,家兔循环血CFU-GM正常值为9.10±7.45(范围0～27.33)CFU-GM/1×10~6MNC,其数量无明显性别差异,亦无明显日间周期性变化;丹参注射液可升高循环血CFU-GM数量;当给药剂量1g/kg,连续给药8d后,循环血CFU-GM数量达高峰,为对照组的6.18倍。作者分析,丹参注射液对家兔CFU-GM动员作用的机理可能包括改善骨髓造血微循环、促进造血细胞增殖分化并向外周血迁移等,确切机理尚待进一步研究。丹参具有毒性小、安全范围大、来源方便等优点,以其作为造血祖细胞动员剂,有进一步研究的价值。

放射损伤对骨髓基质细胞支持小鼠粒-巨噬系祖细胞生长的影响

为阐明放射损伤时骨髓造血基质细胞支持粒 -巨噬系祖细胞造血能力的变化。采用小鼠骨髓基质细胞体外融合培养和粒 -巨噬系祖细胞集落 (CFU -GM )培养法 ,观察 5Gy照射对基质细胞支持小鼠CFU -GM生长的影响。结果表明 ,经 5Gy照射后 ,骨髓基质细胞支持正常粒 -巨噬系祖细胞造血的能力明显下降 ,以伤后 3- 5d最为显著 ,伤后 10d仍未恢复至正常 ;当骨髓基质细胞和粒 -巨噬系祖细胞均受到致伤因素作用时 ,照射组的CFU -GM形成能力下降更为明显 ,至正常对照组的 10 %以下。说明放射损伤后骨髓基质细胞的功能受到了不同程度的损伤 ,因此 ,在治疗由此所引起造血功能障碍的同时 ,应加强促进基质细胞修复的措施 ,可能会取得更满意的疗效。

阵发性睡眠性血红蛋白尿症病人骨髓粒-巨噬细胞系祖细胞的特点

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是后天的细胞膜缺陷性疾病。这种缺陷累及红细胞、粒细胞和血小板,还累及骨髓造血祖细胞。本实验采用造血祖细胞体外培养技术研究PNH病人骨髓粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU—GM)的增殖能力;骨髓细胞经新鲜酸化AB型血清处理后培养的CFU—GM的增殖能力;以及CFU—GM对粒-巨噬细胞系集落刺激因子(GM—CSF)的反应能力。

人参茎叶皂苷对体外条件下小鼠骨髓间充质干细胞和粒-巨噬系祖细胞增殖的影响

目的:探讨人参茎叶皂苷(GSL)在体外培养条件下对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)和粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)生长的影响。方法:在小鼠骨髓细胞液体培养体系和半固体培养体系中加入不同浓度的GSL,应用体外集落形成法检测GSL对小鼠MSC和CFU-GM增殖的影响。结果:在培养体系中GSL浓度为25μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率与对照组无明显差异(P>0.05);50～200μg/ml的范围内,MSC和CFU-GM集落产率显著高于对照组(P<0.05),其中浓度为100μg/ml时效应最明显;但在400μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率却低于对照组(P<0.05)。结论:GSL在一定浓度范围内对体外培养条件下的小鼠骨髓MSC具有生长促进作用,而在高浓度时表现出生长抑制作用。

藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠粒-巨噬系造血功能的影响及机理研究

目的探讨藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠粒-巨噬系造血功能的影响及可能机理。方法60Coγ射线照射和环磷酰胺腹腔注射方式制造放射线-化学复合损伤小鼠模型,采用外周血细胞计数、造血祖细胞集落分析、实时荧光定量PCR,检测灌胃不同浓度巴桑母酥油丸后不同时间放射线-化学复合损伤小鼠外周白细胞数、骨髓粒-巨噬系(CFU-GM)造血祖细胞集落产率、粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)和粒-巨噬系集落刺激因子受体(GM-CSF R)mRNA相对表达量。结果灌胃14 d后,中、高剂量组的白细胞数显著高于生理盐水组;中剂量巴桑母酥油丸灌胃14 d后,骨髓CFU-GM集落产率、GM-CSF mRNA和GM-CSFR mRNA也显著高于空白组、生理盐水组。结论适当浓度的巴桑母酥油丸可以通过上调骨髓GM-CSF、GM-CSFR mRNA表达、促进CFU-GM增殖分化,进而促进放射线-化学复合损伤后小鼠外周血白细胞数的提前恢复。

重组血小板生成素对再生障碍性贫血患者巨核祖细胞的作用

应用重组血小板生成素(rTpo)对17例再生障碍性贫血(AA)患者进行CFU-MK和CFU-GM培养。研究结果表明:①Tpo 10ng/ml为CFU-MK培养的最佳浓度;②AA患者CFU-GM和CFU-MK增殖均明显低于正常人,P<0.001;③AA患者CFU-MK增殖较CFU-GM更低(CFU-MKx 3.2,CFU-GMx 17.5);④Tpo对骨髓小剂量照射后CFU-MK的增殖有促进恢复,对血小板的减少起到积极预防作用。

SPGL对白血病细胞系HL-60细胞增殖的影响

采用CFU-GM和白血病CFU-L集落培养、白血病HL-60细胞液体培养的方法,观察了光叶海酮总皂甙(SPGL)对正常人骨髓粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)和人急性髓系白血病HL-60细胞增殖的影响。结果表明:5 ×10^(-6)-5×10^(-4)mg/ml浓度SPGL能显著抑制HL-60细胞增殖,且具有明显的量-效关系。而对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用,提示SPGL有抗白血病作用。此结果为进一步研究SPGL提供了实验依据。

姜黄素对小鼠CFU-GM及WEHI-3B细胞增殖的影响(英文)

用体外半固体集落培养方法 ,观察不同浓度姜黄素 ( 10 - 8～ 10 - 4 mol·L- 1 )对BALB/c小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)及骨髓单核系白血病干细胞 (WEHI 3B细胞系 )增殖的影响。结果显示 ,姜黄素呈剂量依赖性抑制CFU GM和WEHI 3B细胞增殖 ,其半抑制剂量 (IC5 0 )分别为 1.0 36× 10 - 5 mol·L- 1 和 1.2 2 0× 10 - 6 mol·L- 1 。表明姜黄素对WEHI 3B白血病细胞的抑制作用强于对CFU

灵芪红胶囊对放化疗所致小鼠白细胞减少症的治疗作用

目的研究灵芪红胶囊对环磷酰胺和60Co-γ射线照射所致小鼠白细胞减少症的治疗作用,及其升高白细胞的作用机理。方法采用环磷酰胺和60Co-γ射线造模,观察灵芪红胶囊对两个模型所致白细胞减少症的作用。分别测定骨骼造血干细胞脾脏节结(CFU-S)和人粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)及外周白细胞数和骨髓DNA。结果环磷酰胺和60Co-γ射线照射能使小鼠骨髓白细胞生成减少,灵芪红胶囊能减少环磷酰胺和60Co-γ对小鼠造血系统的损伤作用。结论灵芪红胶囊升白细胞的作用优于盐酸小檗胺。

检测重组细胞因子生物活性的细胞培养方法的探讨

目前有关造血的基因重组的细胞因子不断出现,如EPO、TPO、G-CSF、SCF及多种白介素等等。如何评价这些细胞因子的生物活性,已成为重要研究课题,基中对造血祖细胞的增殖分化的影响是一个重要的技术途径。本文就常用的几种体外培养体系及方法作一探讨,以提供检测基因重组细胞因子活性的有效方法。 ①培养体系的选择,大致分为二大类:琼脂培养法主要用于粒-巨噬系祖细胞CFU-GM;培养甲基纤维素法,用于CFU-E、BFU-E、

清热解毒方剂对小鼠肺组织造血刺激活性的影响

以紫草、漏芦、虎杖、柴胡、连翘等清热解毒药组成的复方制剂（血泉片），经临床应用证明对再生障碍性贫血，特别是阴虚兼热毒型患者有显著的疗效［１］，并且已证明该药能刺激小鼠粒、红素祖细胞的增殖［２］，为探讨该药刺激造血的机制，我们观察了其对小鼠肺条件上清集...

骨髓基质体外功能与山莨菪碱治疗再生障碍性贫血的相关性研究

以培养 3周的骨髓基质细胞为滋养层 (SL)进行正常人骨髓细胞CFU GM培养 ,以无基质层的CFU GM为对照 ,评定骨髓基质功能 ,观察再生障碍性贫血患者骨髓基质功能与山莨菪碱疗效关系。结果显示 ,培养 3周的正常骨髓SL上CFU GM产率明显高于无基质层对照 ;10例再生障碍性贫血患者中 4例培养 3周的骨髓SL上CFU GM产率为对照的 80 %以下 ,余 6例为对照的 80 %以上。低于 80 %的 4例 ,山莨菪碱治疗后均取得一定疗效 ,其中 2例复查基质功能 ,基质层上CFU GM产率分别由为对照的 38.6 6 %和 39.71%增至 16 8.8%和 2 4 9.2 % ,而高于 80 %的 6例 ,仅 1例有效。结论 :正常骨髓基质融合层对粒系祖细胞生长具有明显支持作用 ;基质功能障碍所致再生障碍性贫血经山莨菪碱治疗后可改善基质功能 ,达到治疗目的。

苦参抗白血病作用及其机制

采用CFU GM和白血病CFU L集落培养、NBT/MTT还原试验和DNA的片段化分析法 ,观察了苦参对正常人骨髓、脐带血粒 巨噬系造血祖细胞 (CFU GM)和人急性髓系白血病HL 6 0细胞增殖、分化、凋亡的影响。结果表明 :5 ,10 ,15 ,2 0 μg·μl-1苦参均能明显抑制HL 6 0细胞增殖并诱导其凋亡 ,呈浓度 效应关系 ;其中 15 μg·μl-1苦参诱导HL 6 0细胞分化作用明显 ,且 5～ 15 μg·μl-1苦参对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用。提示苦参在一定浓度范围内有选择性抗白血病效应。此结果为进一步研究和开发苦参并应用于肿瘤临床提供了实验依据。

巴利昔单克隆抗体预防HLA不相合骨髓移植中移植物抗宿主病

目的研究巴利昔(商品名:舒莱)单克隆抗体体外对异基因反应T细胞和造血祖细胞的作用;探讨该抗体在预防HLA不相合骨髓移植中移植物抗宿主病(GVHD)的疗效。方法实验观察分两组。(1)巴利昔组:白血病患者72例,接受单倍型相合未去T细胞的骨髓移植,用巴利昔单克隆抗体预防GVHD;(2)对照组:2000年11月前进行上述相同骨髓移植的白血病患者15例,未用巴利昔单克隆抗体预防GVHD。用有限稀释方法检测巴利昔单抗对细胞毒介导的靶细胞前体(CTLp)的反应能力,在半固体造血祖细胞培养体系中检测巴利昔单抗对粒巨噬系祖细胞(CFUGM)、红系祖细胞(CFUE)及巨核系祖细胞(CFUMK)集落增殖的影响。结果巴利昔组72例骨髓移植后均取得造血重建,骨髓植活直接证据检测证实为完全供者造血,与对照组比较,差异无统计学意义。巴利昔组和对照组移植后急性Ⅱ～Ⅳ度GVHD发生率分别为12.5%(9例)和33.3%(5例),差异有统计学意义(P=0.045);两组的慢性广泛型GVHD发生率比较,差异无统计学意义。移植后18个月内动态观察免疫细胞重建,CD3、CD8、CD19、NK细胞及CD56细胞在12个月内可恢复至正常水平,CD4细胞在移植后18个月内恢复。随访中位数时间22个月,无病生存42例,KaplanMeier生存曲线分析,估计2年无病生存达58.3%。巴利昔组和对照组比较,无病存活和复发率差异无统计学意义。采用供者骨髓单个核细胞进行实验,显示巴利昔单抗能明显降低CTLp细胞生成,降低的数量在10～100倍,但不影响正常造血祖细胞CFUGM、BFUE和CFUMK集落的增殖。结论巴利昔单抗可选择性的限制和减少异基因反应T细胞,从而减少严重急性GVHD的发生率;白血病患者骨髓移植后造血重建未受影响,不增加复发率和感染率。