基于肠道菌群探讨粗壮女贞总苷对高脂血症金黄仓鼠的降脂作用机制

目的评价粗壮女贞总苷(total phenylpropanoid glycosides extracted from Ligustrum robustum(Roxb.)Blume,LRTPG)对高脂血症金黄仓鼠的降脂作用并探讨其对肠道菌群的调节作用。方法60只仓鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组、LRTPG-L组、LRTPG-M组、LRTPG-H组。高脂饲料诱导造模成功后连续给药4周,进行血脂和肝脂含量检测,并采集对照组、模型组和LRTPG-H组仓鼠结直肠部位成形粪便进行16S rDNA测序。结果LRTPG对高脂血症仓鼠具有降低血清TG、TC、LDL-C水平和肝脏TG、TC含量的作用。肠道菌群测序结果显示,与模型组比较,LRTPG在门水平降低厚壁菌门相对丰度,增加拟杆菌门和疣微菌门相对丰度(P<0.01);科水平上明显升高克里斯滕森菌科、消化球菌科、疣微菌科相对丰度(P<0.05或P<0.01);属水平上明显升高颤螺菌属、颤杆菌克属、解黄酮菌属和阿克曼氏菌属的相对丰度(P<0.05或P<0.01)。这些菌群的变化均有益于LRTPG降脂作用的发挥。结论LRTPG可能通过改善高脂饮食导致的金黄仓鼠肠道菌群紊乱发挥降脂功效。

粗壮女贞及其产品营养成分与活性成分比较

该文以粗壮女贞为研究对象,通过标准方法分别对原叶(Ligustrum robustum(Roxb.)Blume,LR)及其产品(Ligustrum robustum(Roxb.)Blume Products,LRP)中的营养成分与活性成分进行分析比较。结果表明:一般营养成分中,LR的蛋白质含量(9.23 g/100 g)远高于LRP(8.01 g/100 g),LR中灰分含量(3.90 g/100 g)较高于LRP(3.10 g/100 g),水分和粗纤维含量二者相差不大。LR和LRP中EAA/TAA分别为40.30%和43.98%,EAA/NEAA分别为67.48%和78.50%,∑n6 PUFA/∑n3 PUFA比值分别为0.13和0.12。同时,LR和LRP富含多种矿物质元素和维生素,LR中Ca含量(7646.67 mg/kg)最高,LRP中K含量(5576.67 mg/kg)最高,二者VE含量分别高达37.10 mg/100 g和27.50 mg/100 g。此外,LR和LRP主要活性成分为粗多糖、茶多酚、总黄酮和总皂苷,除茶多酚含量均为14.30 g/100 g以外,其余活性成分都存在一定差异。其中,LR的总黄酮含量(2.24 g/100 g)高于LRP(0.98 g/100 g),LRP中粗多糖含量(2.90 g/100 g)远高于LR(0.93 g/100 g),总皂苷含量(9.02 g/100 g)略高于LR(8.89 g/100 g)。综上,LR营养成分较高,是典型的“高钾高钙低钠”食品;LRP经过发酵等工艺后其活性成分显著提高,功能性价值更高,“高钾高钙低钠”的食用特性更加显著。该研究为粗壮女贞植物资源的综合利用及粗壮女贞产品研发提供参考依据和新思路。

粗壮女贞提取物成分的抗氧化能力分析

采用不同溶剂萃取粗壮女贞(Ligustrum robustum,LR)提取物,测定粗壮女贞不同提取物多酚、总黄酮、粗多糖、总生物碱的含量,通过清除DPPH自由基、氧自由基吸收能力、清除ABTS自由基、清除羟自由基(·OH)、清除超氧阴离子自由基(O_(2)^(-·))、铜离子还原法(CUPRAC)、铁离子还原能力(FRAP)、亚铁离子螯合法(FIC)8个测定试验考察不同溶剂提取物的抗氧化活性,并通过相关性分析探讨成分含量和抗氧化活性的关系。结果表明,正丁醇层的总黄酮、多酚含量较高;剩余水层中粗多糖含量较高。正丁醇提取层在7个抗氧化指标试验(羟自由基试验除外)中抗氧化能力最强,剩余水层清除羟自由基能力最强。8个测定试验中粗壮女贞粗提物的金属离子还原/螯合能力高于各萃取层。相关性分析表明,多酚含量与7个抗氧化试验结果呈显著或极显著正相关关系。

小麦淀粉对粗壮女贞苦丁茶提取物的负载、活性保护及缓释作用

目的:研究小麦淀粉对粗壮女贞苦丁茶提取物(Ligustrum robustum(Rxob.)Blume extract,LRE)的负载、抗氧化活性保护及缓释能力,为其在食品及生物医药行业的高附加值开发利用提供理论基础。方法:采用质谱、核磁共振波谱鉴定LRE主要成分,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、还原能力等体外抗氧化方法测定LRE体外抗氧化能力,以总酚累计释放量表征淀粉对LRE负载能力及负载稳定性,并分析淀粉对LRE抗氧化活性的保护作用,探究模拟体外消化过程淀粉对LRE的缓释作用。结果:经鉴定LRE主要活性成分为粗壮女贞苷B(C_(31)H_(44)O_(13))、粗壮女贞苷N(C_(35)H_(46)O_(18))和紫茎女贞苷J(C_(35)H_(46)O_(19)),具有较强的DPPH自由基清除能力和还原能力,不同添加量的小麦淀粉可以较为稳定地负载LRE,一定程度上延缓了LRE的自由基清除能力和还原能力的衰减以及在体外模拟消化系统中的释放。

苦丁茶(粗壮女贞)成分结构特征、活性作用机制及质量控制研究进展

苦丁茶(粗壮女贞)是一种应用广泛和极具经济价值的传统药食同源植物,在我国贵州省、云南省和四川省等地区作为民族药和代茶饮料使用历史悠久,近年来备受关注。其化学成分复杂,已从中分离得到苯丙素、苯乙醇、单萜、环烯醚萜、黄酮及挥发油等成分;药理作用广泛,具有降脂、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗炎、免疫调节和抗癌等活性作用。但近几年针对粗壮女贞基原的苦丁茶综述报道较少,仅在女贞属植物或苦丁茶大类的研究进展中稍作提及,不利于苦丁茶(粗壮女贞)的规范化研究和开发利用。本文较为全面地对近年来国内外关于苦丁茶(粗壮女贞)的成分基础、药理活性及其质量控制现状研究进行归纳总结,并重点分析其特征性成分的结构基础特征和药理活性机制,为苦丁茶(粗壮女贞)后续的特征性成分的制备分离、结构鉴定和药理活性机制研究提供理论参考。

粗壮女贞的降压作用

粗壮女贞叶提取物静脉注射0．098、0．140和0．200g／kg可使麻醉大鼠的血压显著下降，峰值下降37．7％、38．6％和50．2％：灌胃给药（ig）1．36g／kgqd×3d，不影响清醒大鼠的血压。清醒自发性高血压大鼠ig1．08和2．16g／kgqd×5d，血压由24．3±0．5和24．3±0．6降至18．1±0．9和16．6±0．7kPa，降压作用显著（P＜0．001，＜0．001）；对清醒二肾-夹型高血压大鼠，ig粗壮女贞0．5g／kgqd×7d，血压由20．3±3．9降至16．2±3．9kPa，血压下降20％。以上结果提示具有降压作用。昆明小鼠急性毒性试验，ig49g／kg10d内动物生长良好，未出现死亡；腹腔注射5个剂量组（每组10只）按简化机率单位法测得LD502．64±0．21g／kg（P＝0．95）。

粗壮女贞总苷降脂作用及其基于AMPK通路的降脂作用机制研究

目的探讨粗壮女贞总苷(total phenylpropanoid glycoside from CN,CNTG)降脂作用及其基于AMPK通路的降脂作用机制。方法 Syrian金黄地鼠随机分为正常组、高脂模型组、阳性药非诺贝特组及CNTG高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组地鼠应用高脂饲料诱导建立混合型高脂血症模型。造模1周后取血,检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量,确定模型形成。之后连续给药4周,在给药2周、3周及4周后分别取血,检测血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。在给药4周后剖取肝脏,进行肝脏TG、TC含量测定和肝脏病理学检测。并应用实时定量PCR检测CNTG对肝脏中AMPK、CD36、CPT1、ACC的mRNA表达的影响;用Western blot法检测AMPK和其上游调控蛋白LKB1的磷酸化蛋白和总蛋白水平,并检测HMG-Co A还原酶的蛋白表达量。结果给药2周、3周、4周后,与模型组相比,CNTG高剂量组血清中的TC、TG、LDL-C含量均明显降低(P<0.05,P<0.01);肝脏中TC、TG含量明显降低(P<0.01);并可明显减轻肝细胞病变。实时定量PCR结果显示,与模型组相比,CNTG可以明显升高AMPK的相对表达量(P<0.01),但CD36、ACC和CPT1的相对表达量无明显变化。Western blot结果显示,与模型组相比,CNTG高剂量组肝脏中的LKB1、phospho-LKB1及phospho-AMPKα的相对表达量均提高(P<0.05),差异具有显著性。结论 CNTG能有效降低高脂血症金黄地鼠的血脂和肝脂水平,其机制可能是CNTG促进肝脏中LKB1磷酸化以激活AMPK,从而调控机体脂质代谢。

粗壮女贞(苦丁茶)不同种质材料遗传多样性的RAPD分析

木犀科苦丁茶是我国西南地区一大类重要的代茶饮料植物，其中以粗壮女贞[Ligustrum robustum （Roxb.） Blume]为代表.本研究应用随机扩增多态DNA（randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）分子标记技术，系统地研究了粗壮女贞种质材料的亲缘关系和遗传多样性.用所筛选出的19条RAPD随机引物对79份不同地域来源的粗壮女贞种质材料进行扩增，共扩增出369条谱带，多态性带百分率为86.0%；各种质材料间的GS值变化范围为0.466 4-0.973 6，平均GS值为0.662 3；有效等位基因数Ne=1.432 1，Nei’s基因多样性指数He=0.259 5，Shannon多样性信息指数Ho=0.396 0.这表明，粗壮女贞不同地域来源或不同类群种质材料之间存在着显著的遗传差异，其遗传多样性丰富；RAPD技术可以应用于粗壮女贞种内遗传多样性分析.基于RAPD遗传相似系数的UPGMA聚类结果表明，所有各供试材料均按其地理起源聚类，可把供试的79份粗壮女贞材料分为两大类群，即A类群（贵州-四川类群）和B类群（云南类群）.

GC法同时测定粗壮女贞苦丁茶中4种挥发性成分

目的建立同时定量测定水蒸气蒸馏法提取的粗壮女贞挥发油中芳樟醇、α-松油醇、β-月桂烯和D-柠檬烯的方法。方法采用毛细管气相色谱法,色谱柱为Agilent DB-17柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);程序升温方式,初始柱温为60℃,以3℃/min上升至75℃,保持5 min,以5℃/min上升至85℃,保持3 min,再以8℃/min上升至117℃,保持5 min,最后以50℃/min上升至240℃;进样口温度250℃;检测器FID;检测器温度300℃;载气为氮气,体积流量为1.0 mL/min;分流比为4∶1。结果芳樟醇、α-松油醇、β-月桂烯和D-柠檬烯分别在181.2～6 525μg/mL,84.4～3 036μg/mL,2.700～95.4μg/mL和4.000～144.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.5%,97.4%,95.7%,95.5%,RSD分别为1.7%,1.3%,1.8%,1.1%。结论该方法简便、快速、准确,可用于同时测定粗壮女贞中4种挥发油成分。

粗壮女贞提取物对2型糖尿病小鼠的降血糖效果及作用机制

目的:研究粗壮女贞(Ligustrum robustum BL)对2型糖尿病小鼠的降血糖机制。方法:采用腹腔注射四氧嘧啶(200 mg·kg-1)建立小鼠2型糖尿病模型,实验分为正常对照组、阳性对照组、高、中、低剂量组(24.0g·kg-1·d-1、12.0 g·kg-1·d-1、8.0 g·kg-1·d-1),ELISA试剂盒检测2型糖尿病小鼠血清中血糖值水平(GLU)及血清胰岛素水平,Western blotting法检测小鼠脂肪组织中胰岛素受体(IR-β)、蛋白激酶B(PKB)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)蛋白表达。结果:粗壮女贞提取物能显著降低2型糖尿病小鼠血糖水平(GLU),增加血清胰岛素含量(P<0.05,P<0.01),促进脂肪中胰岛素受体(IR-β)、蛋白激酶B(PKB)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)蛋白的表达。结论:粗壮女贞提取物对2型糖尿病小鼠具有显著的降血糖作用,可显著改善2型糖尿病小鼠糖脂代谢并抑制胰岛素抵抗。

硒对粗壮女贞生理特性及叶绿素荧光参数的调控效应

采用国际上通用的营养液配方对粗壮女贞进行了砂培盆栽试验,研究了硒对粗壮女贞生理特性及叶绿素荧光参数的影响。结果表明:硒对粗壮女贞叶片叶绿素含量有显著影响,Chl a和Chl b含量随着硒质量浓度的增加而下降,表明高质量浓度硒抑制了粗壮女贞的光合作用。胡萝卜素(Car)和Chl a/b含量随着硒质量浓度的增加先减小后增加,并分别在硒质量浓度为1mg/L和3mg/L时最低。丙二醛(MDA)含量与超氧化歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性随着硒质量浓度的增加呈先减小后增加的变化,在硒质量浓度为1mg/L时最低。根系活力先增强后逐渐减弱,在质量浓度为1mg/L时最强。Fo、Fv和Fm′随着硒质量浓度的增加显著降低,Fv/Fm和NPQ呈先减小后增大的趋势,HDR则先增大后逐渐降低。研究认为,质量浓度为1mg/L的硒处理能增强粗壮女贞的抗氧化能力,提高粗壮女贞的光合能力。

粗壮女贞光合日变化的初步研究

为了对粗壮女贞的高产优质栽培提供理论依据,在无风的天气条件下,用LI-6400便携式光合仪测定了粗壮女贞的光合作用日变化特性,分析净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）和气孔导度（Gs）与叶表面蒸汽压亏缺（Vpdl）等光合指标。结果表明：粗壮女贞的Pn,Tr,Gs,Vpdlde的日变化均为典型的单峰曲线,未出现午休现象;Pn峰值约出现在16：00时,为10.21μmolCO2/（m^2·s）,在12：00-14：00时,Pn随光照强度增强大幅度上升,14：00-16：00时达到最高峰,之后为减少蒸腾作用,气孔关闭,Pn下降;粗壮女贞的Tr,Gs,Vpdl与Pn的日变化规律一致,也呈单峰曲线。

有机肥对粗壮女贞(苦丁茶)品质的影响

研究了5个肥种(饼肥、人畜粪尿、秸秆堆肥、尿素和蚕沙,施肥量均为3000kg/hm2,另设不施肥对照处理)和秸秆堆肥4个施肥量(0kg/hm2,1500kg/hm2,3000kg/hm2,7500kg/hm2)对粗壮女贞品质(茶多酚、总黄酮和茶皂甙)的影响。结果表明:施饼肥的粗壮女贞茶多酚含量要显著高于施秸秆堆肥、蚕沙与不施肥的;每公顷施秸秆堆肥1500kg与7500kg的显著高于不施肥的,每公顷施7500kg的也显著高于每公顷施3000kg的。关于粗壮女贞总黄酮含量,5个肥种和不施肥处理的差异均不显著,但每公顷施秸秆堆肥3000kg的要显著高于每公顷施1500kg的。粗壮女贞茶皂甙含量,5个肥种和不施肥处理的差异均不显著,但每公顷施秸秆堆肥3000kg的显著高于每公顷施1500kg的。

粗壮女贞中的新单萜配糖体(英)

从粗壮女贞（Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍ ｒｏｂｕｓｔｕｍ）叶子中分离鉴定了４ 个新的单萜配糖体， 命名为粗壮女贞甙Ｄ、Ｇ、Ｈ和Ｌ． 通过波谱及化学方法，它们分别鉴定为香叶醇３′ＯαＬ吡喃鼠李糖基４′顺式香豆酰基βＤ吡喃葡萄糖甙（１） ，６羟基３，７二甲基２Ｅ，７葵二烯醇３′ＯαＬ吡喃鼠李糖基４′反式香豆酰基βＤ吡喃葡萄糖甙（２） ，６羟基３，７二甲基２Ｅ，７葵二烯醇３′ＯαＬ吡喃鼠李糖基４′顺式香豆酰基βＤ吡喃葡萄糖甙（３） 以及６，７二羟基３，７二甲基２Ｅ葵烯醇３′ＯαＬ吡喃鼠李糖基４′顺式香豆酰基βＤ吡喃葡萄糖甙（４） ． 此外，还从该植物得到了７ 个已知化合物，芹菜素（５）、ｃｏｓｍｏｓｉｉｎ（６） 、ｒｈｏｉｆｏｌｉｎ（７） 、山梨糖醇（８）、阿克苷（９） 、β谷甾醇（１０） 和齐墩果酸（１１） ．

贵州苦丁茶原植物粗壮女贞挥发油成分分析

对贵州苦丁茶原植物粗壮女贞(Ligustrum robustum BI.)的叶用水蒸气蒸馏乙醚提取挥发性成分,用气相色谱—质谱联用仪进行分析,结合计算机检索技术,对化学成分进行分离鉴定,NIST、WILEY化合物谱库检索,应用气相色谱峰面积归一化法测定各成分的相对含量。结果表明,从贵州苦丁茶中分离出92种成分峰,鉴定出53种,鉴定率为57.6％,主要成分是十六烷(Hexadecane),含量为9.43％;其次是α-石竹烯(alpha.-Caryophyllene),含量为6.31％。贵州苦丁茶原植物粗壮女贞挥发油成分主要是萜类,类型为单萜和倍半萜。

粗壮女贞RAPD-PCR实验体系优化的研究

以粗壮女贞嫩芽为材料,对粗壮女贞RAPD分析中一些重要影响因素,包括模板DNA浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq酶用量、退火温度、延伸时间以及循环次数等因子进行了比较系统的摸索和优化.建立了适合粗壮女贞RAP-PCRD分析的优化反应体系:即25μl反应体系中Mg2+浓度为2.5mM,dNTPs浓度为200μM,Taq酶用量为2.0U,引物浓度为10pmol,模板浓度为80ng.PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,37℃退火45s,72℃延伸120s,进行40个循环,最后于72℃延伸10min.以该优化的RAPD条件进行重复实验,其实验结果重现性良好.

粗壮女贞药理作用初探

黔产苦丁茶———粗壮女贞Ligustrumrobustum (Roxb)Bl的醇提和水提取液可降低大鼠实验性高血脂 ,有一定的镇痛作用和降低麻醉犬血压的作用。

粗壮女贞的化学成分与药理研究进展

苦丁茶原植物来源较为复杂,异物同名现象比较严重,多位学者采用多种方法研究了不同产地的粗壮女贞,该文仅就木犀科女贞属粗壮女贞的化学成分及药理作用作一综述。

粗壮女贞水提物在荷瘤裸鼠体内安全性的研究

目的研究粗壮女贞水提物在荷瘤裸鼠体内的安全性。方法建立裸鼠荷瘤模型,腹腔注射粗壮女贞或磷酸盐缓冲液(PBS)后,观察裸鼠体质量、精神行为、肢体活动变化;处死裸鼠后,采用脏器百分比和HE染色评价裸鼠脏器大小及其组织病理学改变;并进行血清超氧化物歧化酶(SOD)活性检测。结果各组裸鼠未发现精神行为和肢体活动异常;体质量及脏器百分比与对照组比较,差异无统计学意义(P<0.05);HE染色显示各组裸鼠脏器组织结构均正常。与对照组比较,粗壮女贞组裸鼠血清SOD活性明显增高(P<0.05)。结论粗壮女贞水提物在荷瘤裸鼠体内具有较好的安全性,能提高其抗氧化能力。