粗毛豚草素的抗肿瘤活性研究

目的:研究艾蒿提取物粗毛豚草素(hispidulin,HPDL)的抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测HPDL对体外培养的3种人肿瘤细胞增殖的抑制作用;体内试验采用小鼠实体瘤S180、肝癌H22细胞株接种小鼠,然后连续给药10d,计算抑瘤率。结果:HPDL在30～100μg/ml剂量范围内对3种肿瘤细胞均有抑制作用,且呈剂量依赖关系(r=0.985,P<0.01);体内试验小鼠分别灌胃给予2.5、5、10mg/kg3个剂量的HPDL,对接种的实体瘤S180、肝癌H22细胞株的抑瘤率分别为25.7%～67.7%和33.8%～75.6%。结论:HPDL对体外培养的人肿瘤细胞和接种的小鼠肿瘤具有明显抑制作用。

粗毛豚草素对人肺癌细胞A-549的抑制作用研究

目的探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制。方法粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期蛋白cyclin D1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21和p27的表达;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达。结果 A-549细胞经不同浓度(15、30、60、120μmol/L)粗毛豚草素作用72h后,细胞存活率分别为(57.30±3.92)%、(43.91±4.32)%、(17.82±2.73)%和(13.20±2.46)%,均低于对照组(96.30±2.08)%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。粗毛豚草素(15、30μmol/L)作用A-549细胞24h,可使细胞发生G1/S期阻滞。3种浓度(15、30、60μmol/L)的粗毛豚草素作用24h,可抑制A-549细胞周期蛋白cyclinD1、CDK4的表达,使p21蛋白表达增高,但对p27蛋白表达无明显影响。粗毛豚草素(15、30、60μmol/L)可显著抑制PCNA表达,其表达强度分别为(35.7±2.3)%、(26.6±2.1)%和(14.1±2.2)%,均低于对照组(45.2±3.3)%(P﹤0.01)。结论粗毛豚草素可抑制肺癌细胞A-549增殖,其机制可能与改变细胞周期分布,下调cyclinD1、CDK4表达,上调p21的表达等有关。

粗毛豚草素生物合成途径研究进展

粗毛豚草素是分布于多种药用植物的天然类黄酮,具有广泛的药理活性,包括抗炎、抗惊厥、抗骨质疏松,特别是抗癌活性。然而粗毛豚草素在药用植物中含量较低,且多以苷类形式存在,不易提取纯化,因此无法满足临床需求。随着黄酮类化合物生物合成途径相关酶基因研究的深入,粗毛豚草素的合成途径也越来越清晰。本研究对粗毛豚草素生物合成途径以及相关基因的研究现状进行综述,以期为生产粗毛豚草素或提高其产量提供思路与途径。

粗毛豚草素脂质体的制备及其体外抗肿瘤作用的评价

目的制备粗毛豚草素脂质体,优化其处方并评价其体外抗肿瘤作用。方法采用薄膜分散法制备粗毛豚草素脂质体,对脂质体的粒径、Zeta电位进行表征;并采用磺酰罗丹明B蛋白(SRB)法考察脂质体对A549细胞的抗增殖作用。结果采用最优处方,制备的目标脂质体中粗毛豚草素的包封率为(87.06±0.6)%;平均粒径为(104.83±1.40)nm;Zeta电位为(-4.61±0.32)mV。制备得到的粗毛豚草素脂质体对A549细胞具有较强的抑制作用。结论本实验组制备脂质体的方法简单易行,脂质体粒径均一,包封率较高且体外抗肿瘤作用较强。

粗毛豚草素壳聚糖微球的制备及体外抗肿瘤作用评价

为将粗毛豚草素（hispidulin,HPDL）通过静脉注射输送至病变部位,该研究制备了粗毛豚草素壳聚糖微球并评价其体外抗肿瘤作用以及对A549细胞肿瘤球的生长抑制作用。以壳聚糖为药物载体,采用乳化-交联法制备粗毛豚草素壳聚糖微球,高效液相色谱测定粗毛豚草素的含量;运用扫描电镜观察目标微球形态;透析法进行目标微球的体外释放特性研究;采用磺酰罗丹明B蛋白（SRB）法考察载药微球对A549细胞的生长抑制作用并采用流式细胞仪考察载药微球对A549细胞的早期凋亡作用;培养肺腺癌A549细胞肿瘤球,加入载药微球,分别于给药后0,1,3,7 d在倒置显微镜下观察肿瘤球的形态、体积变化。结果显示制备的载药微球中粗毛豚草素的包封率为（75.32±0.52）%,载药量为（7.76±0.67）%;目标微球形态圆整,表面光滑。制备得到的载药微球对A549细胞的增殖具有较强的抑制作用;流式细胞仪检测结果表明,给药后将细胞培养至24h时,肺腺癌A549细胞早期凋亡率为（37.0±0.75）%,经载药微球干预后肿瘤球体积明显受到抑制,干预7 d后肿瘤球体积缩小（50.09±11.06）%,表面细胞裂解。该制备载药微球的方法简单易行,微球形态圆整,包封率高,能显著抑制肺腺癌A549细胞增殖并诱导细胞凋亡,同时可引起肺腺癌A549细胞肿瘤球的裂解死亡。