大环内酯抗生素抑制气道粘液高分泌的分子机制

为了解大环内酯抗生素抑制慢性炎症气道粘液高分泌的分子机制。利用大鼠慢性支气管炎模型 ,对其进行主要抗生素品种的持续药物干预后 ,采用免疫荧光和免疫酶联方法分别检测支气管肺泡灌洗液中性粒细胞 (PMN)炎性反应强度 (PMN比例×膜结合弹力酶水平 )和粘蛋白 (MUC)含量。采用原位杂交方法检测肺组织MUC5AC转录水平的表达。红霉素、克拉霉素均可明显抑制PMN炎性反应强度 ,同时也减少灌洗液MUC含量 ,杯状细胞独立标记物MUC5AC的转录水平出现显著下降。阿莫西林和环丙沙星未见上述作用。大环内酯抗生素可以从转录水平抑制MUC的产生 。

核转录因子-κB在慢性气道粘液高分泌大鼠肺组织中的表达及意义

目的 探讨核转录因子κB(NF κB)在大鼠慢性气道粘液高分泌信号转导过程中的作用。方法 2 4只Wistar大鼠随机分组后分别给予生理盐水吸入 (正常组 )、内毒素 (LPS)雾化吸入(实验组 )及内毒素雾化吸入 +吡咯烷二硫氨基甲酸盐 (PDTC)注射 (干预组 ) ,以免疫印迹法及原位杂交技术分别检测各组大鼠肺组织中NF κB及粘蛋白 (MUC) 5AC、MUC2mRNA含量。结果 实验组NF κB、MUC2及MUC5ACmRNA含量与正常组相比明显增高 (P <0 0 5 ) ;干预组中NF κB及MUC2mRNA与实验组相比明显受抑制 (P <0 0 5 ) ,MUC5ACmRNA受抑制程度较小 (P >0 0 5 ) ,与MUC2有明显差异。结论 NF κB参与气道粘液高分泌的信号转导过程 ,但对不同粘蛋白表型存在差异 ,其调控重点更侧重于有基础分泌特性的MUC2。

丙烯醛刺激小鼠气道粘液高分泌新的分子机制-p38 MAPK/MMP-9信号通路调控MUCIN5AC表达

目的探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路及其特异性抑制剂SB203580在气道粘液高分泌中的作用,阐明p38 MAPK、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粘蛋白基因转录中的相互作用机制。方法小鼠吸入丙烯醛21d建立模型,对照组采用生理盐水吸入,干预组予SB203580腹腔注射。于第7天、第21天处死动物。结果小鼠吸入丙烯醛21d后出现明显的气道粘液高分泌表现,经SB203580治疗后粘液分泌明显减轻;拮抗p38MAPK后MUCIN5ACTMMP-9蛋白、mRNA表达量下降(P<0.01)。结论丙烯醛吸入可致小鼠气道粘液高分泌,p38 MAPK信号通路可在转录水平调节MMP-9,最终调控MUCIN5AC基因表达,揭示新的引起气道粘液高分泌的分子机制和有效的治疗靶点。

COPD气道粘液高分泌分子机制研究进展

慢性阻塞性肺疾病（ Chronic obstructive pulmo-nary disease,COPD）是一种以持续气流受限为特征的可预防、可治疗的常见病,病情呈进行性进展,肺功能进行性减退,严重影响患者的劳动能力和生活质量,最终出现肺动脉高压、慢性肺源性心脏病和呼吸衰竭。 COPD发病率、住院率、病死率高,给社会和经济造成了沉重的负担,至2020年COPD将位居世界疾病经济负担的第5位,成为了全球性公共卫生问题[1]。国内外学者对COPD气道粘液高分泌进行了大量的研究,现就其分子机制最新研究进展作一介绍。

黄连素对COPD大鼠气道炎症和粘液高分泌的调控作用研究

目的探讨黄连素对COPD大鼠气道炎症和粘液高分泌的影响及研究其相关分子机制。方法清洁级雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、COPD模型组和黄连素组各10只,通过熏香烟加气管注内毒素方法建立大鼠COPD模型。采集支气管肺泡灌洗液用ELISA法检测中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)、IL-10含量。采集支气管-肺组织标本用免疫组织化学法(SP法)检测NF-κB、粘蛋白Muc5ac表达,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Muc5ac mRNA表达。结果 COPD模型组大鼠BALF细胞总数、中性粒细胞数(PMN)、巨噬细胞数(AM)、NE较正常对照组显著升高(P<0.01),IL-10水平显著下降(P<0.01)。黄连素组BALF细胞总数、PMN、AM较COPD组显著降低(P<0.01),L-10水平升则高(P<0.05)。COPD模型组大鼠气道黏膜上皮NF-κB、Muc5ac mRN及蛋白表达较正常对照组显著升高(P<0.01)。黄连素组气道黏膜上皮NF-κB、Muc5ac mRN及蛋白表达较COPD组显著下降(P<0.01)。结论黄连素可负向调节气道炎症和粘液高分泌,其机制可能与黄连素抑制NE、NF-κB炎症因子,促进抗炎因子IL-10,下调粘蛋白Muc5ac表达有关。

依拉普利对大鼠气道粘液高分泌的干预作用

目的本研究观察依拉普利对吸入丙烯醛诱导的大鼠气道粘液高分泌的作用,并探讨其可能的机制。方法24只SD大鼠随机分为4组(n=6):①对照组;②依拉普利自身对照组;③模型组;④依拉普利干预组。于21d处死大鼠,采集标本。采用HE染色和阿辛兰-过碘酸雪夫染色(AB-PAS)的组织学检查;免疫组化检测气管和肺内气道的Muc5ac、肺内血管紧张素Ⅱ、肺内气道的核转录因子NF-κB。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测肺内气道Muc5ac mRNA。结果模型组肺内AngⅡ的表达、气管和肺内气道的Muc5ac的表达,肺组织Muc5ac mRNA、NF-κB入核率明显高于空白对照组和依拉普利干预组,差异均有统计学意义。AB-PAS染色得到与免疫组化相似的结果。结论丙烯醛刺激可以增加大鼠肺内AngⅡ的表达;增加Muc5ac的表达;也可以增加气道上皮的AB-PAS染色的面积百分比,增加NF-κB入核率。应用依拉普利干预后可抑制上述改变。本研究结果表明依拉普利具有抑制气道粘液高分泌的作用,其机制可能与核转录因子NF-κB的活化有关。

p38MAPK与MMP-9在气道粘液高分泌中的调控作用

目的了解基质金属蛋白酶9(MMP-9)与p38丝裂原激活蛋白激酶(p38M APK)在气道粘液高分泌中的调控作用。方法利用小鼠吸入丙烯醛(21天)构建气道粘液高分泌模型,对照组采用生理盐水吸入,干预组予p38MAPK特异性抑制剂SB 203580腹腔注射。应用A日-PA S、1mmU nO h istO chem ist叮、RT-PCR和W estefri-b,ot等方法,于第7天、第21天时间点取标本检测。结果丙烯醛可致小鼠出现明显的气道粘液高分泌表现,拮抗p38M APK后气道粘液物质减少、MUC 5AC和MMP-9蛋白、mRNA表达量下降。结论p38M APK信号通路特异抑制剂可减轻气道粘液分泌,其机制可能涉及调控MMP-9,从而下调MUC 5AC表达。

依那普利对慢性阻塞性肺疾病患者缓解期Ang-Ⅱ表达水平和粘液高分泌的影响

目的研究依那普利对COPD患者血清中血管紧张素Ⅱ(Angiotensin-ⅡAng-Ⅱ)表达水平及黏液高分泌的影响,初步探讨依那普利在COPD黏液高分泌中的治疗作用及机制.方法以合并原发性高血压(2级及2级以下)的COPD缓解期住院患者为研究对象,入选病例单盲随机分为常规治疗组(常规使用舒利迭、异丙托溴胺、氨茶碱、氨氯地平);依那普利治疗组(常规治疗的基础上加用依那普利10 mgqd).分别于患者出院前1 d,出院后第3周、第6周分别采取每名患者的静脉血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Ang-Ⅱ蛋白含量,同时计量患者痰量.结果依那普利治疗组与常规治疗组相比第3、6周血液中的Ang-Ⅱ明显降低(P<0.05),且依那普利治疗组痰量较常规治疗组减少(P<0.05).结论依那普利治疗能有效减少患者气道粘液高分泌,其作用机制可能与Ang-Ⅱ的下调有关.

中医药对慢性阻塞性肺疾病气道粘液高分泌粘蛋白Muc5ac的影响研究概况

慢性阻塞性肺疾病是一种严重威胁人类健康的常见病和多发病,气道粘液高分泌是其重要特征,Muc5ac作为气道粘液中最为重要的粘蛋白,通过其防治COPD已备受关注。中医药在治疗本病方面手段多样化,疗效也得到广泛认可。

慢性炎症气道粘液高分泌治疗药物研究进展

目的:介绍慢性炎症气道粘液高分泌的治疗进展。方法:查阅近年来国内外文献。结果:多种针对粘液高分泌发生过程不同环节的抑制性药物开发取得了一定进展,或处于临床前期实验阶段,或已应用于临床治疗。结论:通过使用新型药物,可加强粘液纤毛系统清除功能并改善异常的粘液流变学性质,此方面观念的加强和使用实践必将对慢性气道炎症性疾病的治疗产生积极影响。

二陈汤通过抑制IL-13/STAT6通路对慢阻肺大鼠气道粘液高分泌的影响及作用机制

观察二陈汤对慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠肺组织中的IL-13、支气管肺泡灌洗液中的STAT6蛋白、肺组织黏蛋白MUC5AC的影响,探讨二陈汤通过抑制IL-13/STAT6通路对慢阻肺大鼠气道黏液高分泌的影响及影响机制。方法:将60只SPF级健康WISTAR雄性大鼠随机分为6组,空白组、模型组、地塞米松组以及二陈汤低、中、高剂量组各10只。除空白组外,其余组采用烟熏联合脂多糖(LPS)复合感染法建立大鼠慢阻肺模型,造模结束后,二陈汤各组分别给予相应剂量二陈汤灌胃,地塞米松组给予地塞米松灌胃,空白组和模型组给予生理盐水灌胃。药物干预后,观察各组大鼠毛发发育、行为活动和精神反应等相应情况,运用苏木素一伊红(HE)染色观察各组大鼠肺组织形态变化;运用Western blot法检测慢阻肺大鼠IL-13/STAT6通路蛋白表达水平;采用免疫组织化学染色观察黏蛋白基因MUC5AC的表达;采用气道酚红排泌实验检测二陈汤的排痰功效。结果:与空白组比较,模型组、二陈汤组、阳性对照组大鼠毛发变灰黄无光泽且行动迟缓(P<0.05); MUC5AC、IL-13和STAT6表达显著增高(P<0.05)。与模型组比较,药物干预组大鼠毛发发育、行为活动和精神反应均有改善(P<0.05),MUC5AC、IL-13和STAT6表达明显降低(P<0.05)。通过气道酚红排泌实验得知,与空白组相比,模型组酚红排泌量减少(P<0.05),与模型组比较,药物干预组酚红排泌量显著增加(P<0.05)。结论:二陈汤可能通过抑制IL-13/STAT6通路对慢阻肺大鼠发挥保护作用,增加气道酚红排泌,减轻上皮杯状细胞异常增生,缓解炎症反应,从而缓解COPD气道黏液高分泌症状。

运脾泻肺化痰汤抑制NF-κB信号通路和改善幼龄哮喘大鼠气道粘液高分泌的作用

目的探讨运脾泻肺化痰汤改善哮喘模型大鼠气道粘液高分泌的作用机制。方法采用卵蛋白(OVA)致敏建立SD大鼠哮喘模型,将70只幼龄大鼠分为正常组、模型组、运脾泻肺化痰汤低、中、高剂量组(0.005mL·g^(-1)、0.01mL·g^(-1)、0.02mL·g^(-1))、羧甲司坦组(0.01mL·g^(-1))、联合组(中药0.01mL·g^(-1)+西药0.01mL·g^(-1)),共7组,每组各10只。在第1天和第8天腹腔注射1ml混悬液[含OVA(100mg)+Al(OH)_(3)(100mg)/ml]致敏,正常组以生理盐水1ml代替。第16天开始药液灌服,连续4周后心尖采血制备血清,留取肺组织。用酶联免疫吸附试验(ELSA)检测大鼠血清中白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素8(IL-8)炎症因子;用苏木素伊红(HE)染色观察取材的肺组织病理学改变;用蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测大鼠肺组织中NF-κB的抑制单位IκBα、IκBβ的蛋白表达,NF-κB的异源二聚体(p-50、p-65)的蛋白表达以及黏蛋白5AC(MUC5AC)的蛋白表达。结果HE染色病理学改变:与正常组比较,模型组大鼠肺组织病理改变明显,支气管结构发生改变,多种炎性细胞浸润及支气管周围平滑肌增生明显,黏膜褶皱增多,管腔内未见粘液栓及脱落的肺泡上皮,经药物治疗后,支气管周围炎性细胞浸润减少,气道平滑肌增厚程度减轻,管腔内粘液栓减少。其中以中药高剂量组及联合组效果最佳。ELSA检测:与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-4、IL-8含量明显升高(P<0.05);WB检测肺组织中相对蛋白表达量,与正常组对比,模型组肺组织中IκBα、IκBβ相对蛋白表达量降低,结果有差异性(P<0.05);与模型组对比,其余组大鼠肺组织中IκBα、IκBβ蛋白表达升高均有差异性(P<0.05),依次为联合组>中药中组>中药高组>西药组>中药低组。与正常组对比,模型组肺组织中p-50、p-65、MUC5AC相对蛋白表达量升高,结果有差异性(P<0.05);与模型组对比,其余组大鼠肺组织中p-50、p-65、MUC5AC相对蛋白表达降低均有差异性(P<0.05)。结论运脾泻肺化痰汤可以改善幼龄哮喘大鼠气道粘液高分秘,减轻气道炎症,从而减少MUC5AC,缓解气道粘液高分泌状态,这可能与其调节NF-κB信号通路有关。

大环内酯类抗生素对慢性气道炎症黏液高分泌的干预机制

探讨大环内酯类抗生素对慢性气道炎症黏液高分泌的干预机制。方法:利用大鼠慢性支气管炎模型,对其进行3种大环内酯类抗生素的持续给药干预,采用底物检测法、ELISA法和原位杂交技术分别检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性、气道黏蛋白5AC(MUC5AC)含量和MUC5ACmRNA的表达。结果:红霉素、克拉霉素、阿奇霉素干预后各指标与对照组比较,均具有显著性差异(P<0.01),但阿奇霉素的作用又弱于红霉素和克拉霉素(P<0.05)。结论:大环内酯类抗生素的黏液抑制性调理作用可能是由于其内在化于中性粒细胞抑制NE释放而间接实现的。

磷酸二酯酶4抑制剂对大鼠肺粘液分泌的影响

目的探讨磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂YM976对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺粘液分泌的影响。方法将40只SD大鼠随机等分为4组:正常对照组、药物对照组、COPD模型组、药物干预组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数和巨噬细胞绝对计数及百分比,阿辛蓝和MUC5AC免疫组化染色检测MUC5AC表达,RT-PCR检测MUC5AC mRNA在肺组织中的表达。结果YM976可以降低丙烯醛诱导的COPD大鼠BALF中的细胞总数和肺泡巨噬细胞计数及百分比,降低其肺组织MUC5AC的mRNA水平和MUC5AC蛋白表达。结论YM976能有效减少大鼠BALF中细胞总数和巨噬细胞数,从蛋白和基因水平抑制大鼠肺组织MUC5AC的表达。

中医药治疗COPD气道黏液高分泌的研究新进展

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种高发病率、高死亡率的疾病,气道黏液高分泌是影响COPD病死率和预后的独立危险因素之一。中医药对治疗COPD气道黏液高分泌有良好的疗效,本文通过对近3年相关文献的梳理,就中医药治疗COPD气道高黏液分泌的研究新进展进行系统分析和综述,期望为下一步的研究提供参考。

慢性阻塞性肺疾患小气道粘液潴留形态学改变的危急意义

目的 :了解慢性阻塞性肺疾患 (COPD)小气道粘液潴留的病理特点 ,探讨其恶化病情的形态学基础。方法 :取正常肺组织、COPD临床缓解期及急性发作期死亡患者肺组织 ,行免疫组化染色 ,图象分析系统检测杯状细胞化生指数、上皮粘液储备指数、腔内粘液潴留指数及腔内粘液连体指数。结果 :COPD患者上述指数较正常人普遍增加 ,临床缓解期与急性发作期死亡患者的杯状细胞化生指数和上皮粘液储备指数无明显差异 ,但两者腔内粘液潴留指数和连体指数相差显著 ,后者尤其突出。结论 :小气道粘液潴留的增加尤其是腔内粘液与气道壁杯状细胞呈开放式连体现象的增加是导致病情恶化的重要形态学基础。