南方鲶泌粘细胞的传代培养及其PAS反应的研究

南方鲶晚期胚胎用半消化法进行原代培养获得成功。在传代培养过程中发现并分离出一批粘液细胞，这种粘液细胞为上皮型，胞内有由小到大的糖蛋白分泌颗粒或大型分泌囊泡，细胞可随囊泡一起脱落。把这些脱壁细胞接种后它们释放出分泌物并继续生长繁殖形成单层。用这种方法进行传代培养已形成一个鲶鱼泌粘细胞系。

粘类小麦细胞质雄性不育基因的初步研究

许多细胞质雄性不育(CMS)基因涉及ATP合成酶基因或细胞色素氧化酶基因的片段,该研究选用中国春小麦(Triticum aestivum)的atp1+atp9、atp6、atp8、cox2、cox3、nad9和T型小麦不育系的orf256基因片段作探针,对粘类小麦不育系、保持系、恢复系及其F1进行Northern杂交分析,以探寻粘类小麦不育系的CMS候选基因.结果发现,atp6在4种粘类不育系中的转录本大于保持系;cox3在4种不育系中的转录本小于保持系.由此推测atp6或cox3基因可能参与了粘类小麦CMS的形成.

大银鱼卵细胞粘丝扫描电镜观察

用扫描电镜观察了大银鱼的第Ⅲ时相、第Ⅳ时相、第Ⅴ时相卵母细胞和受精卵的卵细胞粘丝的外部形态特征和它们的粘性。

尖锐湿疣组织CD1a、上皮细胞钙粘素分子及其mRNA的表达和朗格汉斯细胞的电镜观察

目的:研究尖锐湿疣(Condyloma accuminatum,CA)组织中朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)数目、形态和功能改变及其分子机制。方法:免疫组化SP法和逆转录RT-PCR法分别检测LC表面标记分子CD1a、粘附分子上皮细胞钙粘素(E-cadherin)及其mRNA表达,透射电镜观察LC的超微结构,并以正常包皮组织作为对照。结果:与正常对照组(21.59±10.48)相比,CA组织中CD1a+LC数目(10.66±11.71)减少(P<0.05),胞体缩小,树突减少。CD1a mRNA表达(0.4066±0.2671)低于正常(0.7444±0.3667)(P<0.01);CA组织中E-cadherin染色变淡,平均积分值(2.36±1.41)低于正常对照(7.67±1.64)(P<0.01),E-cadherin mRNA表达(0.1737±0.1083)较正常对照(0.3786±0.1460)相比显著降低(P<0.01);CD1a+细胞数目与E-cadherin表达强度之间存在正相关关系(r=0.9404,P<0.05)、CD1a mRNA与E-cadherin mRNA的表达呈正相关(r=0.8381,P<0.05);CA组织LC胞质内细胞器稀少,Birbeck颗粒少见。结论:CA组织中存在着LC的缺失和抗原提呈功能异常,可能导致HPV持续性感染,LC的减少可能与E-cadherin表达下降导致LC在表皮内难以滞留有关。

淤泥湖近太湖新银鱼卵细胞粘丝的电镜观察

用电镜观察淤泥湖的近太湖新银鱼第Ⅳ时相、第Ⅴ时相的卵母细胞和受精卵的卵细胞粘丝的出现时相；卵细胞粘丝的外部形态特征；并讨论了卵细胞粘丝的功能。

中药益胃冲剂对大鼠胃黏膜PGE2及上皮细胞内粘蛋白的影响

目的:观察益气养阴、活血化瘀、清热解毒中药复方“益胃冲剂”对大鼠胃黏膜内源性PGE2及上皮细胞内粘蛋白的影响.方法:实验采用Indomethacin为胃黏膜损伤剂,米索前列醇(PGE1)为对照药物,实验动物为Ⅱ级♂SD大鼠;实验动物共分为两批,两批实验条件一致;每批完全随机化分为四组(n=32):控制组(S):0.9NaCl%+0.9NaCl%、损伤组(M):0.9NaCl%+吲哚美辛、益胃冲剂治疗组(YM):益胃冲剂+吲哚美辛、米索前列醇治疗组(PM):米索前列醇+吲哚美辛;所有大鼠24h禁食不禁水后,每组先后相隔30min两次经口灌胃给药;最后一次给药4h后,腹腔麻醉下手术摘除胃.第一批大鼠用于刮取胃黏膜,放射免疫检测胃黏膜内源性PGE2含量(ng/kg);第二批大鼠用于制作病理切片,在PAS—AB染色和PAS—AB—苏木精染色病理切片上,放大400倍,进行计算机图像定量分析胃黏膜表面上皮细胞内粘蛋白和黏膜内黏液指数(%).结果:胃黏膜内源性PGE2含量:益胃冲剂和米索前列醇均可保持PGE2含量明显高于Indomethacin损伤组(200.0±61.1pg/g&302.9±77.2pg/gvs35.6±16.5pg/g,P<0.01),但也明显低于控制组(vs636.9±104.9pg/g,P<0.01)的水平,胃窦部的结果与胃体部相似.在胃体部两治疗组组间比较有明显的差别(P<0.01),而在胃窦部却无差别;胃黏膜上皮细胞内粘蛋白指数:益胃冲剂可使粘蛋白保持在控制组和损伤组水平以上(41.1±3.3vs35.1±4.9&17.9±3.8,P<0.01),米索前列醇与益胃冲剂及控制组比较无差别(38.2±4.0vs41.1±3.3&35.1±4.9,P>0.05);胃黏膜内黏液指数:益胃冲剂可使黏液指数保持在与控制组及米索前列醇治疗组相当的水平(10.2±3.3vs11.7±3.0&7.8±2.1,P>0.05),上述三组与损伤组比较均有明显差异(vs3.8±1.3,P<0.01).结论:益胃冲剂对胃窦部较胃体部黏膜细胞有更好的促进PGE2合成作用,其效力相当于外源性给予米索前列醇的黏膜保护效力,而对胃体部黏膜细胞PGE2合成的促进作用却低于外源性给予米索前列醇的黏膜保护效力;但益胃冲剂能明显增加胃体部黏膜表面上皮细胞内粘蛋白含量和黏膜内黏液量,与米索前列醇作用相当,而这种促进黏液合成的作用与促进胃黏膜内源性前列腺素素E2的合成有关,同时也明显提示与其他胃黏膜保护机制有关.

人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4基因真核表达载体的构建和生物信息学分析

目的:构建人T细胞免疫球蛋白粘蛋白-4(TIM-4)基因的真核表达载体,用生物信息学分析了解TIM-4蛋白的特性。方法:采用Trizol法从人外周血单个核细胞提取总mRNA,逆转录合成cDNA,以此为模版,两步法RT-PCR扩增TIM-4,将其克隆至表达载体pcDNA3.1(+)中,构建FTIM-4质粒,通过PCR及测序进行鉴定。同时,我们构建pEGFP-N1-TIM-4真核表达载体,并测序鉴定其准确性;将pEGFP-N1-TIM-4质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和荧光显微镜证实其表达。应用生物信息学初步分析TIM-4蛋白的物理化学性质、结构域和功能。结果:从逆转录的cDNA扩增出TIM-4;经PCR、酶切鉴定、测序分析表明扩增产物与GenBank提供的序列完全相同。真核表达载体pEGFP-N1-TIM-4在CHO细胞中稳定表达,表达蛋白主要位于细胞质和细胞膜上。生物信息学分析表明TIM-4蛋白为不稳定亲水性蛋白,有1个跨膜螺旋结构,含约10.32%的α-螺旋,29.89%的延伸链,59.79%的不规则卷曲,有1段由24个氨基酸组成的信号肽。亚细胞主要定位于细胞质、细胞核、分泌系统的小囊泡、线粒体、内质网、高尔基体上。功能分析预测该蛋白具有受体和信号转导功能。结论:成功构建TIM-4基因真核表达载体,利用生物信息学分析洞察了TIM-4蛋白的性质,为进一步研究该基因的免疫调节机制奠定了基础。

脑卒中时的白细胞粘聚及治疗研究现状

近年来，有关白细胞在急性脑卒中时的作用机制方面有了较多的发现，本文就急性脑缺血时白细胞粘聚及治疗的研究现状综述如下。１脑缺血时白细胞的粘聚和浸润目前的研究已经证实，白细胞及其因子触发的血管炎症反应在脑缺血性损伤中具有重要的作用［１］。在白细胞激活及趋...

T细胞免疫球蛋白粘蛋白域基因多态性与哮喘关系的研究进展

哮喘是儿童时期最常见的慢性呼吸道变应性疾病,近些年来在全球范围有逐渐增加的趋势。大多数成年期哮喘由儿童哮喘发展而来,其病因既受环境因素的影响,又有明显的遗传倾向,是一种复杂的多基因遗传性疾病。人类的TIM基因家族有3个,即:TIM-1、TIM-3和TIM-4,定位于染色体5q33.2,此区域是哮喘的主要遗传易感位点之一。本文就TIM基因家族多态性与哮喘近年来的研究进展做一综述。

寡齿新银鱼卵细胞粘丝的亚显微结构

经电镜扫描寡齿新银鱼的第Ⅳ时相、第Ⅴ时相卵母细胞和受精卵的卵细胞粘丝，结果表明，卵细胞表面具有从受精孔发生的１２根左右粘丝，此粘丝于受精孔处微弱弯曲，经侧部渐向受精孔相对处呈现很强扭曲或互相缠绕。卵细胞粘丝不仅出现在受精卵和第Ⅴ时相卵母细胞表面。

槟榔提取物对口腔黏膜成纤维细胞表达细胞间粘黏分子-1的影响(英文)

目的咀嚼槟榔与口腔黏膜下纤维性变(OSF)有关,但其相关机制尚不清楚。观察槟榔提取物(ANE)对体外培养的人类口腔黏膜成纤维细胞(FB)表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,探讨FB与ICAM-1在OSF发生中的作用。以槟榔提取物对体外人口腔黏膜成纤维细胞表达细胞间黏附分子的影响,证明咀嚼槟榔与OSF发病机制相关的若干假设成立。方法所有口腔黏膜标本都采自1997-07/1998-04在中南大学湘雅二医院口腔科就诊的患者,经临床及病理确诊为OSF者(男8例,女3例)作为实验组。另外,从同时间来院的手术患者中,选择无槟榔、烟酒及辣椒嗜好,年龄与实验组匹配者(男6例,女5例),作为对照组。分别从正常(NM)及OSF患者的口腔黏膜中培养出FB,向培养基中加入不同浓度的ANE培养48h后,用细胞酶联免疫方法检测FB表达的ICAM-1水平。结果表示ICAM-1水平高低的OD值在OSF-FB为0.386±0.099,高于NM-FB的OD值0.324±0.030(F=18.177,P=0.001);ANE在50～150μg/ml内以浓度-效应依赖关系刺激FB产生ICAM-1。结论ANE能上调FB表达ICAM-1的水平,从而间接促进纤维化过程,引起OSF的发生。

SMMC7721肝癌细胞蛋白激酶B活性增高可驱动有功能的上皮钙粘着蛋白到细胞表面(英文)

为了研究蛋白激酶B (PKB)对上皮钙粘着蛋白 (E cadherin)的调节 ,使用了用胰岛素处理的野生型SMMC 772 1细胞及稳定表达持续激活PKB的SMMC 772 1细胞株 (Gag PKB/SMMC 772 1) .用RNA印迹法和蛋白质印迹法检测细胞E cadherin表达 ,发现通过胰岛素刺激或在细胞中表达持续激活PKB从而增加PKB活性 ,不影响E cadherin的转录和蛋白质合成 ,但用流式细胞术和免疫荧光定位E cadherin ,则发现PKB活性增加能明显驱动E cadherin到细胞表面 ,从而导致部分通过E cadherin途径的细胞粘聚增加和细胞调亡的抑制 .因此 ,我们提供新的证据表明 ,增加PKB活性可驱动有功能的E cadherin分子到细胞表面 .

哮喘治疗的潜在新靶点:T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3

T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3(Tim-3)通过与CD4+CD25+调节性T细胞和(或)抗原提呈细胞上表达的Tim-3配体相互作用,抑制Th1免疫应答,在哮喘等免疫性疾病中发挥重要作用。由于Tim-3与哮喘的高度相关性,其可能成为哮喘治疗的新靶点。

粘附式细胞仪测试热带念珠菌耐药株DNA荧光强度的研究

为了研究念珠菌耐药株的DNA含量的变化,本文应用粘附细胞仪激光扫描技术,对热带念珠菌5-FC敏感株和耐药株的DNA荧光强度进行比较和分析,结果发现耐药株的平均DNA荧光强度低于敏感株,证实了热带念珠菌基因型耐药的存在,并为指导临床治疗提供了理论基础。

粘附分子及其受体在造血干/祖细胞增殖和分化中的作用

造血干 祖细胞 (HSC)的迁移、归巢以及在骨髓造血微环境的定位对保持造血稳定具有重要意义。骨髓造血微环境由多种细胞组成 ,并表达多种粘附分子及配体 ,分泌多种细胞因子 ,在维持HSC的自我更新。

利用自研新型脱落细胞粘取器提取接触类检材DNA

随着社会知识整体水平的提升及传媒技术的迅速发展,犯罪分子的作案手段不断的科技化、多元化,犯罪现场的高度破坏使留下的有用的破案线索越来越少,因此刑事技术鉴定面临的形式越来越严峻.近年来,犯罪分子对DNA检验技术也有了一定了解和认知,肉眼可见的血迹、唾液斑可能会被犯罪分子破坏,因此要加强接触类检材DNA鉴定能力,为破案提供线索.随着案件量的增多,接触类生物检材在实际检案中所占的比例越来越大[1].

食管癌中细胞粘附分子E-钙粘素和CD44变异体表达及其临床意义

目的 探讨细胞粘附分子E 钙粘素 (E CD)和CD44变异体 (CD44V6)的表达与食管癌临床病理及预后的关系。方法 对 5 8例食管癌标本应用SP免疫组化染色法进行E CD、CD44V 6检测 ,并对其中 42例进行术后 3年随访。结果 E CD低表达和CD44V 6高表达与食管癌的浸润转移、复发和预后相关 (P <0 .0 5 )。E CD低阳性表达率与食管癌细胞分化程度相关 (P <0 .0 5 )。食管癌中E CD和CD44V6的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 E CD和CD44V 6在食管癌中的表达与食管癌的发生发展、侵袭转移和预后密切相关 ,E CD和CD44V6在食管癌中的表达无相关性 ,在食管癌的发生、发展、侵袭转移中是 2个独立的调节因子 。

细胞体积调控细胞黏附和脱粘的力学机制

细胞与细胞外基质的黏附对细胞的许多生理功能有着重要的调控作用,比如细胞的迁移、细胞基底硬度的感知以及群体细胞的迁移等。目前很多关于细胞黏附的研究,都忽视了细胞与外界环境物质的交换而把细胞视为一个体积恒定的封闭系统。但是,有研究表明细胞体积在细胞动态黏附过程中会发生明显的变化,而且细胞体积的变化可以进一步影响许多细胞的生理功能,包括细胞的力学性质、蛋白质的合成、新陈代谢、细胞的迁移、增殖和分化等。因此十分有必要研究黏附过程中细胞体积的变化对细胞力学响应的调控机制。构建了一个理论模型来研究细胞与外界环境水和离子的交换如何影响黏附细胞的形貌和脱粘时的动力学响应。通过数值模拟发现,对于黏附在两平板间的细胞,依赖于细胞大小、可变形板的硬度、两平行板间的间隔和细胞与板间的黏附能密度,细胞有可能形成稳定的(内凹或者外凸)或不稳定的(自发破裂和崩塌)的黏附形貌,不稳定的形貌是直接由体积变化引起的。还给出了不同参数下细胞形貌分布的相图。此外,作为一个可以与外界环境交换物质的开放系统,细胞脱粘时的力学响应还与加载历史相关和加载速率相关。因此,本文结果指出了细胞与无活性系统间的重要差别。有许多研究表明黏附基底的力学和物理性质,比如基底的硬度、可黏附面积和黏附能密度的大小能够调控细胞增殖、干细胞的分化趋势等。但是这些性质能否调控黏附细胞的体积大小还不清楚。通过理论和实验研究,发现细胞在动态铺展时,体积随时间减小;而且黏附稳定时的细胞体积随着基底硬度、可黏附面积和黏附能密度的增大能减少40%以上。研究结果暗示着基底的力学和物理性质有可能是通过调控细胞体积而间接地调控细胞的生理功能,也意味着细胞体积调控在细胞趋硬和趋触过程中的重要意义。