大黄对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞线粒体单价泄漏的影响

目的 :研究大黄对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞线粒体单价泄漏的影响。方法 :采用大鼠背部烫伤模型 ,监测其细胞色素氧化酶的活力 ,同时测定血浆、肝脏、小肠粘膜及其线粒体内过氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)水平。结果 :烫伤后大鼠小肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素氧化酶的活力随时间而降低 ,大黄能显著提高细胞色素氧化酶的活力。烫伤后血浆、肝脏、小肠粘膜及其线粒体内SOD大量消耗 ,MDA明显增加 ,而大黄能显著降低组织内SOD的消耗和MDA产生。结论 :大黄能提高烫伤大鼠小肠粘膜上皮细胞线粒体内SOD和细胞色素氧化酶的活力 。

幽门螺杆菌诱导胃粘膜上皮细胞凋亡和增殖与p53基因表达

目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染后胃粘膜上皮细胞凋亡和增殖的变化,以及突变型p53基因表达变化与胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡变化的关系。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术及免疫组织化学染色对Hp阳性患者Hp根除前后及Hp阴性者胃粘膜上皮细胞凋亡和增殖情况进行原位观察和比较,并对突变型p53基因的表达状况进行检测。结果 Hp阳性患者胃粘膜上皮细胞凋亡指数及PCNA指数(12.7％,14.1％)均显著高于Hp阴性患者(3.0％,8.3％,t=7.241,6.368,P<0.01),Hp根除后胃粘膜上皮细胞PCNA指数和凋亡指数(14.2％,12.7％)均显著下降(9.1％,3.6％,t=5.642,7.410,P<0.01),而Hp未根除者上述指标则无显著性变化。Hp阳性组p53阳性率(39.1％)显著高于Hp阴性组(15.4％,x^2=4.414,P<0.05).Hp阳性组p53阳性者PCNA指数(18.7％)显著高于p53阴性者(11.5％,t=4.185,P<0.01),而p53阳性者细胞凋亡指数(8.4％)显著低于p53阴性者(12.6％,t=3.120,P<0.01)。结论 Hp感染可引起胃粘膜上皮细胞凋亡及增殖的变化,使胃粘膜的不稳定性增加,从而增加患胃癌的危险性,突变型p53基因异常表达可能参与了此过程的调控。

人口腔粘膜上皮细胞的培养及生物学特性的研究

目的：探讨口腔粘膜上皮细胞的培养扩增方法及生物学特性。方法：取手术中切除的多余粘膜，分别用胰酶和Ｄｉｓｐａｓｅ分离后经胰酶消化，接种无血清培养基。将二者细胞数量、活力及融合时间加以比较，同时对细胞各代增值特点、生长曲线、克隆形成率及血清对细胞分化的影响进行观察。结果：Ｄｉｓｐａｓｅ分离法的细胞总数，活细胞数均高于胰酶分离法。粘膜上皮细胞能够在无血清培养基稳定增殖传代，血清对上皮细胞有诱导分化作用。结论：Ｄｉｓｐａｓｅ分离的无血清培养技术可短期内获得大量具增殖能力的粘膜上皮细胞。

参附对再灌注期间肠粘膜上皮细胞凋亡的抑制作用及机制探讨

目的 探讨大鼠缺血 再灌注期间粘膜上皮细胞凋亡及参附注射液对其影响的可能机制。方法 采用大鼠肠缺血 再灌注模型 ,2 4只大鼠随机分为对照组 (C组 )、缺血 再灌注组 (I R组 )和参附治疗组 (SF组 )。在规定时间检测回肠粘膜上皮细胞Caspase 3、Bcl 2蛋白的表达、凋亡细胞数目及回肠粘膜组织肿瘤坏死因子 (TNF α)水平 ,同时观察病理形态学改变。结果 (1)I R组凋亡细胞显著增多 ,SF组凋亡细胞数较I R组显著减少而多于C组 (P <0 0 5 )。 (2 )Caspase 3在I R组的表达显著高于SF组和C组 (P <0 0 1) ,SF组与C组差异无显著性。Caspase 3表达与凋亡细胞数目呈正相关 (r =0 914 9,P <0 0 1) ;Bcl 2的表达与Caspase 3的表达呈直线负相关 (r =- 0 9384 ,P <0 0 1)。 (3)TNF α表达 :TNF α的表达在I R组显著高于C组和SF组 (均P <0 0 1) ,SF组与C组差异无显著性。TNF α表达与凋亡细胞数目呈正相关 (r =0 9133,P <0 0 1)。 (4)SF组小肠粘膜病理损伤程度明显小于I R组 (P <0 0 1)。结论 参附注射液通过抑制TNF α、Caspase 3表达同时上调Bcl 2而抑制缺血 再灌注期间肠粘膜上皮细胞的凋亡 ,从而减轻肠粘膜缺血 再灌注损伤。

乐胃煎对51例胃癌前病变患者胃粘膜上皮细胞动力学的影响

为了从细胞动力学角度探讨经验方乐胃煎治疗胃癌前病变(GPL)的作用机制,应用自动图像分析技术测定GPL患者治疗前后胃粘膜上皮细胞DNA含量及倍体分布的变化。结果,GPL患者胃粘膜上皮有比较高的增殖活性,经乐胃煎治疗后胃粘膜上皮细胞DNA含量明显下降(P<0.01),多倍体比率显著降低(P<0.01),乐胃煎对GPL患者胃粘膜上皮细胞DNA含量的改善明显优于胃复春对照组(P<0.01)。表明乐胃煎能有效抑制GPL患者胃粘膜上皮细胞的增殖活性,从而阻断GPL的进一步发展。

CagA基因阳性Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞系DNA损伤作用

目的 研究 ＣａｇＡ阳性幽门螺杆菌（Ｈｐ）培养滤液对人胃粘膜上皮细胞（ＧＥＳ－１）ＤＮＡ的损伤作用。方法 制备 Ｈｐ培养滤液，ＰＣＲ鉴定ＣａｇＡ基因。采用单细胞微凝胶电泳观察Ｈｐ（ＣａｇＡ＋）培养滤液对ＧＥＳ－Ｉ细胞ＤＮＡ的损伤作用。结果 Ｈｐ（ＣａｇＡ＋）培养滤液可使ＧＥＳ－Ｉ细胞形成彗星现象。结论 ＨＰ（ＣａｇＡ＋）培养滤液可以导致ＧＥＳ－Ｉ细胞的ＤＮＡ损伤。ＤＮＡ损伤可能是ＣａｇＡ诱导 ＧＥＳ－Ｉ细胞恶性转化的机制之－。

丹参对兔重症急性胰腺炎肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链功能的影响

目的 研究丹参对兔重症急性胰腺炎 (SAP)肠粘膜上皮细胞线粒体呼吸链功能及氧自由基的影响。方法 36只日本大耳兔 ,建立兔SAP模型 ,随机分为丹参组和生理盐水组 ,分别于术后 2、 6、12h分离小肠粘膜上皮细胞内线粒体 ,检测肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素aa3、细胞色素C、能荷和SOD水平。结果 ①术后 2h内 ,两组肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素aa3水平无显著差异 (P >0 0 5 ) ,术后 6h、 12h生理盐水组肠粘膜上皮细胞线粒体内细胞色素aa3水平均低于丹参组 (P <0 0 5 ) ;②术后2、 6、 12h生理盐水组肠粘膜上皮细胞内细胞素C水平、能荷和SOD活力较丹参组下降 (P <0 0 5 )。结论 丹参能显著提高细胞色素aa3、细胞色素C、能荷和SOD水平 。

补锌对缺锌大鼠烫伤后肠粘膜上皮细胞增殖的影响

目的探讨补锌对缺锌大鼠烫伤后肠粘膜上皮细胞增殖的影响。方法1个月龄大鼠饲予低锌饲料(含锌量:1.6μg/g)1周造成缺锌模型,20%深Ⅱ度烫伤后改饲3种不同含锌饲料(含锌量分别为:1.6、24.7、286.9μg/g)1周,同时设1组大鼠烫伤前后均饲予正常含锌饲料(含锌量:24.7μg/g)作为对照组。烫伤后第8天处死大鼠,留取标本。在动物处死前6h腹腔注射长春新碱(1mg/kg),计数肠腺细胞增殖率(CCRP)与标记指数(LI)用以反映肠粘膜增殖情况。结果各补锌组空肠CCPR、LI均高于缺锌组,回肠也存在类似的趋势。结论改善锌营养状态有利于烧伤后肠粘膜损伤的修复。

鱼露致胃粘膜上皮细胞DNA损伤作用

目的研究鱼露及亚硝化鱼露致胃粘膜上皮细胞DNA的损伤作用。方法应用改良的单细胞凝胶电泳技术,进行体外和体内试验,观察胃粘膜上皮细胞DNA损伤程度。结果体外试验测定尾长、尾矩和OLIVE尾矩发现亚硝化鱼露高剂量组〔(13.42±3.74),(1.12±0.67),(1.21±0.71)μm〕、中剂量组〔(12.68±4.44),(1.07±0.68),(1.12±0.69)μm〕及低剂量组〔(11.79±4.49),(0.98±0.72),(1.05±0.70)μm〕均高于阴性对照组〔(9.14±2.54),(0.62±0.60),(0.60+0.59)μm〕,两两比较差异均有统计学意义(χ2尾长=296.10;F尾距=27.62;χ2OLIVE尾矩=436.62;P<0.01)。体内试验中尾长、尾矩和OLIVE尾矩50%亚硝化鱼露组〔(14.51±4.54),(2.76±2.26),(3.03±2.32)μm〕、25%亚硝化鱼露组〔(13.49±4.42),(2.06±1.86),(2.25±1.98)μm〕均高于阴性对照组(11.82±3.80),(1.12±0.80),(1.35±1.19)μm〕,两两比较差异有统计学意义(χ2尾长=88.1l;χ2尾距=165.83;χ2OLIVE尾矩=198.11;P<0.01)。体外试验还发现,亚硝化鱼露浓度越高致DNA损伤作用越强,存在剂量一反应关系(r尾长=0.999,P<0.05;rOLIVE尾矩=0.997,P<0.05)。结论鱼露经亚硝化后对胃粘膜上皮细胞DNA有损伤作用。

单细胞凝胶电泳技术检测吸烟者口腔粘膜上皮细胞DNA的损伤

目的检测吸烟者口腔粘膜脱落上皮细胞DNA的损伤状况,探讨单细胞凝胶电泳技术在研究烟草化学物所造成DNA损伤的应用价值。方法采用单细胞凝胶电泳技术检测24例吸烟者和17例非吸烟者的口腔粘膜脱落上皮细胞DNA损伤,并按吸烟年限、日均吸烟量、不同年龄和性别进行分析,观察指标为彗星尾长和彗星率。结果吸烟组的彗星尾长为(2.35±0.08)μm,慧星率为15.38%,非吸烟组的彗星尾长为(0.92±0.06)μm,彗星率为4.21%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01),且随吸烟年限和吸烟量的增加,彗星尾长和彗星率有增加趋势。两组>50岁和男性对象,吸烟组DNA损伤高于非吸烟组。结论吸烟可导致口腔粘膜上皮细胞DNA损伤,并且存在一定的剂量—反应关系。单细胞凝胶电泳技术可灵敏地反映口腔粘膜上皮细胞因烟草化学物造成的DNA损伤,在分子流行病学研究中具有一定的实用价值。

顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞的影响

本试验旨在探讨顺9,反11-共轭亚油酸对离体培养猪肝细胞、结肠粘膜上皮细胞增殖、PGE2分泌和PPAR-γ基因表达的影响。试验分5个处理,对照组为DMEM/F12培养液,其他处理分别在对照组的基础上添加100μmol/L亚油酸、25、50、100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸;每个处理设6个重复(PPAR-γmRNA定量测定4个重复)。细胞用血清培养24h后处理,继续培养72h。检测上清PGE2分泌、细胞增殖和细胞PPAR-γmRNA拷贝数。结果表明培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对肝细胞增殖和PGE2分泌都有促进作用(P<0.05),但对PPAR-γ基因表达没有影响;培养液中添加顺9,反11-共轭亚油酸对结肠粘膜上皮细胞增殖影响不显著(P>0.05),对PGE2分泌有显著的促进作用(P<0.05),25μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组PPAR-γmRNA拷贝数显著高于对照组(P<0.05),100μmol/L顺9,反11-共轭亚油酸组极显著高于对照组(P<0.01)。可见,在离体培养条件下,顺9,反11-共轭亚油酸对猪肝细胞和结肠粘膜上皮细胞PGE2分泌都有促进作用,只对结肠粘膜上皮细胞PPAR-γ基因表达有促进作用,这显示顺9,反11-共轭亚油酸对PPAR-γ基因表达的调控可能具有细胞类型的特异性。

肠粘膜上皮细胞在天然免疫中的作用

粘膜免疫是机体防御系统的主要成分。致病性细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫的抵抗,随后产生获得性免疫,两者共同执行机体的防御功能,消灭入侵细菌。最近的研究表明上皮细胞对细菌感染有重要的免疫调节作用,在天然免疫与获得性免疫防御机制中起重要作用。本文重点介绍肠上皮细胞在天然免疫中的作用。

细胞毒素相关蛋白表达阳性的幽门螺杆菌感染与胃粘膜上皮细胞异型增生的关系

目的 探讨幽门螺杆菌 (HP)与胃上皮细胞异型增生的关系。方法 对240例浅表性胃炎和胃粘膜上皮细胞异型增生患者进行HP检测和免疫印迹法测定细胞毒素相关蛋白 (CagA)。结果 浅表性胃炎HP阳性者54例(38.1% ) ,CagA阳性者12例 (8.5% ) ;轻、中、重度异型增生分别HP阳性者34例 (63.0% )、27例 (84.4% )、10例(83.3% ) ,CagA阳性者19例 (35.2% )、20例 (62.5% )、8例 (66.7% )。异型增生患者HP感染率及CagA阳性HP感染率均高于浅表性胃炎患者 (χ2=31.87、26.71,P<0.01)。结论

肠粘膜上皮细胞在粘膜免疫调节中的作用

肠粘膜上皮细胞是调节宿主粘膜表面自然免疫与获得性免疫的主要细胞。近年来的研究证实 ,IECS 可以发挥多种免疫调节功能 ,如抗原提呈功能 ,分泌细胞因子 ,表达粘附分子等 ,本文重点介绍其分泌的几种细胞因子包括IL 1Ra ,IL 7,IL 8,TGF β 。

穴注黄芪、当归注射液对大鼠胃癌前病变胃粘膜上皮细胞影响的定量分析

目的 :探讨穴注黄芪、当归注射液对大鼠慢性萎缩性胃炎 (CAG)胃粘膜上皮细胞超微结构的影响。方法 :采用N -甲基 -N -硝基亚硝基胍 (MNNG )诱发大鼠CAG。随机将70只大鼠分为正常组 ,模型1组 (40μg/mLMNNG造模 )及模型2组 (60μg/mLMNNG造模 ) ,不作任何治疗。穴注1组 (40μg/mLMNNG造模 +穴注 )与穴注2组 (60μg/mLMNNG造模 +穴注 ) ,造模10周开始以黄芪、当归注射液等份混合注入足三里穴。31周时 ,进行胃粘膜常规病理及胃粘膜上皮细胞主要细胞器的定量分析。结果 :1)随造模浓度的增加 ,胃粘膜损伤及胃粘膜萎缩程度等均相应加重 ;胃粘膜上皮细胞线粒体退变 ,粘原颗粒减少 ,细胞间隙增宽 (均P<0.05)。2)穴注法可明显改善胃粘膜上皮细胞功能 ,缩小上皮细胞间隙 ,保护胃粘膜屏障而逆转CAG (均P<0.05)。结论 :胃粘膜上皮细胞的损伤与胃壁屏障结构破坏 ,胃粘膜萎缩发生、进展至癌变密切相关 ;穴注法可通过改善上皮细胞的结构与功能 。

慢性胃炎胃粘膜上皮细胞中bax、fas、p16基因的表达

目的 :探讨 bax、fas和 p1 6在胃粘膜病变发生发展过程中的作用及意义。方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测慢性浅表性胃炎 ( CSG)和轻、中、重度慢性萎缩性胃炎 ( CAG)患者胃粘膜上皮细胞中 bax、fas(促凋亡基因 )和 p1 6(增殖负调控基因 )基因蛋白的表达情况。结果 :CSG和轻、中、重度 CAG胃粘膜中 bax的表达率分别为 41 .75 %、72 .41 %和 78.2 6% ,fas的表达率分别为39.81 %、65 .5 2 %和 78.2 6% ,p1 6的表达率分别为 9.71 %、2 4 .1 4%和 30 .43%。轻、中、重度 CAG与 CSG比较 ,bax、fas、p1 6的表达差异有显著性意义 P<0 .0 5～ 0 .0 1。轻、中、重度 CAG间比较 ,差异无显著性意义。结论 :bax、fas和 p1 6的高表达 ,使得细胞增殖 /凋亡的比例失衡 ,在胃粘膜病变的发生发展中可能有重要意义。

升降散对急性肺损伤大鼠肺细支气管粘膜上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:探讨升降散对急性肺损伤模型大鼠细气管粘膜上皮ICAM-1表达的影响。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、升降散大剂量组、中剂量组及小剂量组。给药6天后,舌下静脉注射LPS复制急性肺损伤模型,取肺组织切片,免疫组化检测。采集图像,分析细支气管粘膜上皮细胞胞质的平均灰度。结果:药物治疗组与模型组比较,能明显抑制肺细气管粘膜上皮细胞胞质ICAM-1的表达,有显著性差异。结论:升降散可通过抑制肺细气管粘膜上皮细胞胞质ICAM-1的表达,抑制炎症反应对肺组织造成的急性损伤,对急性肺损伤起到防治作用。