安徽、江苏、广西部分地区水牛牛病毒性腹泻/粘膜病血清学监测

用微量细胞中和试验 ,对安徽、江苏和广西的 12个县部分水牛群血清样品 (n =343)牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)中和抗体进行检测。结果从 10个县的血清中检出了BVD/MD抗体 ,其中安徽水牛血清 (n =15 0 )BVD/MD抗体平均阳性检出率为 2 4.2 % (范围 10 %～ 46 .7% ) ,江苏 (n =143)BVD/MD平均阳性检出率为 8.4% (0 %～ 11.1% ) ,广西 (n =5 0 )BVD/MD平均阳性检出率为 10 .0 % (0 %～ 15 .4% )。本调查说明我国水牛群中BVD/MD流行在扩大。

牦牛病毒性腹泻/粘膜病的防制研究

20世纪 80年代以来 ,我国牦牛群中陆续发现牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD) ,血清阳性率在 30 %～ 4 2 .4 %之间 ,病死率在 30 %左右 ,本研究先后从四川、西藏等地牦牛中分离出病毒 ,并对其进行各种生物学特征鉴定后 ,表明该病毒与标准毒属同一种 ,所不同的是四川牦牛病毒株属非致细胞病变型 ,即属NCP型。但回归本动物能复制出典型病例。目前尚无国产牛粘膜病疫苗用于生产。本研究依据猪瘟病毒与牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒具有交叉免疫性的原理 ,用猪瘟弱毒苗对牦牛病毒性腹泻 /粘膜病进行预防 ,试验证明用猪瘟弱毒苗可以预防牛病毒性腹泻 /粘膜病 ,且安全可靠 ,具有实用价值。

四川省部分牛病毒性腹泻／粘膜病血清中和抗体检测

应用细胞中和试验对四川黄牛、水牛、奶牛、牦牛共243份血清进行病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)的中和抗体检测,结果显示,水牛阳性率较高,达50.0%(21/42),其次为牦牛,达37.5%(15/40),奶牛达26.6%(38/143),黄牛最低,为22.2%(4/18)。表明该病有蔓延和扩大的趋势,值得高度重视。

奶牛和猪血清中牛病毒性腹泻-粘膜病抗体的检测

牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是一种病毒性传染病,习惯上简称为牛病毒性腹泻(BVD).以腹泻、消瘦和消化道(口腔、食道和胃肠道)粘膜的充出血、水肿和糜烂为主要特征.

猪瘟弱毒苗预防牛病毒性腹泻/粘膜病的短期安全性与微量中和试验

作者用猪瘟弱毒苗预防牛病毒性腹泻/粘膜病的短期安全性和中和抗体效价进行了测定.动物短期安全性试验结果表明:用大剂量(每头10～25个免疫剂量单位)猪瘟弱毒苗注射犊牛、成年奶牛、怀孕母牛和牦牛后,对体温、食欲、生产性能及妊娠牛的胎儿均无不良影响.微量中和试验结果表明:成年奶牛每头注射6个免疫剂量单位的猪瘟弱毒苗15d后,有50%产生保护性中和抗体;每头注射10个免疫剂量单位的猪瘟弱毒苗15d后,有83.3%产生保护性中和抗体;小牛每头注射3个免疫剂量单位的猪瘟弱毒苗15d后,有50%产生保护性中和抗体;抗体产生的滴度与免疫剂量成正比.上述结果表明用猪瘟弱毒苗预防牛病毒性腹泻/粘膜病是安全有效的,具有实用价值.

牛病毒性腹泻-粘膜病病毒地方株的分离及RT-PCR鉴定

自疑似牛病毒性腹泻-粘膜病的流产奶牛粪便及血液中分离得到一株不产生细胞病变的病毒,经双抗体夹心ELISA检测及RT-PCR扩增进一步证实该病毒为牛病毒性腹泻-粘膜病病毒。

河北省奶牛牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定

从河北省某规模化奶牛场牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)疑似病例中采集病料,将处理好的病料接种MDBK细胞,盲传9代,得到了不产生细胞病变的病毒。琼脂扩散试验表明本病毒能与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)OregonC24标准阳性血清反应,出现沉淀线;细胞培养物用BVD/MD荧光抗体染色检测,可见到荧光着染的特异性细胞,荧光颗粒出现于胞浆中。双抗体夹心ELISA检测病毒抗原结果BVDVOregonC24VP/N为3.141,分离毒P/N为3.012,P/N>2,与BVDVOregonC24V结果一致;电镜观察到圆形、直径为40～60nm,有囊膜,囊膜表面有突起的病毒粒子,与BVDV颗粒基本一致。经RT-CR检测,扩增出了唯一的315bp的目的条带,进一步证实为牛病毒性腹泻/粘膜病病毒。

牦牛病毒性腹泻-粘膜病的防制

2004年和2005年,四川省甘孜州色达县境内先后发生2起牛病毒性腹泻-粘膜病疫情,造成了一定损失,经采取综合防制措施,在短期内控制了疫情,摸索总结出了一些成功的经验,为今后有效防制该病奠定了一定基础。

抗鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒特异性单克隆抗体的制备与鉴定

为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株2A3和4B12。通过间接ELISA检测,MAb效价为:上清液及腹水分别为1∶512、1∶640和1∶12800、1∶16000;MAb的亚类鉴定结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体亚类均为IgGl亚类;经ELISA测定,2A3和4B12与BVDVC24V株、HCV、BDV、PRV均不发生交叉反应,但与BVDVCCSYD株发生交叉反应;IFA试验结果显示,4B12和2A3与接种BVDVN71株病毒液的细胞反应产生较强的特异荧光;抗原识别位点分析结果表明,2A3和4B12两株MAb所识别的抗原位点相同。这两株MAb的获得为鹿BVDV的检测方法的建立奠定良好的基础。

牛病毒性腹泻-粘膜病病毒地方株动物回归试验

【目的】自流产奶牛粪便及血液中分离得到的非细胞病变型牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV),为了解分离毒株的特性,进行回归动物试验;【方法】将此分离毒回归2月龄健康犊牛,接毒25天后扑杀剖检,观察临床症状及病理变化。自犊牛体内采取脾、骨髓、肠淋巴结及血液接种MDBK细胞进行培养,分离病毒,进行细胞传代,将此细胞毒进行RT-PCR检测;【结果】犊牛表现为典型的急性病毒性腹泻症状和病变。自病料分离病毒经MDBK细胞盲传至第9代,均未出现细胞病变。将此细胞毒进行RT-PCR检测,扩增出相应的665bp的片段;【结论】将分离株接种易感犊牛以复制出BVD-MD病症,并从试验牛体内分离得到BVDV,从而进一步确证分离到的毒株属BVDV。

重庆市部分地区牛病毒性腹泻/粘膜病血清流行病学调查

为了解牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)的流行情况,从重庆市辖区内11个区县(自治县)采集奶牛、黄牛、水牛血清共369头份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BVD/MD抗体。结果从9个区县(自治县)检测出阳性样品,阳性率介于8.33%～50.00%之间,总阳性率为22.49%;规模奶牛场、散养奶牛、散养黄牛、散养水牛的阳性率分别为42.16%、9.62%、21.31%、9.76%。提示该病在我市各种牛群中存在,污染较广,应引起重视。

猪白细胞干扰素在细胞培养物中干扰牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)病毒的试验

对猪白细胞干扰素在细胞培养物中干扰牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒的作用进行了试验。猪白细胞干扰素在 50 0 u/ml以上浓度可完全抑制牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒所产生的细胞病变 ,在 2 50 u/ml浓度可部分抑制病毒所产生的细胞病变 ,在 2 50 u/ml以下浓度不能抑制病毒所产生的细胞病变 ,但可使细胞产生细胞病变的时间延长 ,病变程度减轻。本试验证实干扰素在猪和牛之间存在交叉活性。

我国牛病毒性腹泻—粘膜病的流行及防制状况

自80年李佑民首次报道牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)在我国存在以来,许多学者对牛病毒性腹泻-粘膜病在我国的流行状况进行了调查,目前该病在我国易感动物中的感染日益严重。国外以检出并淘汰持续感染牛和疫苗接种预防本病,国内对本病尚无有效的防制措施。

狂犬病毒、伪狂犬病毒、马瘟病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒和传染性牛鼻气管炎病毒的保存期试验

进行了狂犬病毒 (巴黎株固定毒 )、伪狂犬病毒 (闽 A株 ,苏联株 )、马瘟病毒 (I,II,III,IV,V,VII型 )、牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒 (Oregon C2 4 V株 ,NADL株 )和传染性牛鼻气管炎病毒(NU/6 7株 )的保存期试验。试验结果证明 ,在 - 70℃以下温度保存 ,狂犬病毒巴黎株固定毒保存 1 0年以上 ,伪狂犬病毒闽 A株保存 1 1年以上 ,伪狂犬病毒苏联株保存保存 1 7年 ,马瘟病毒 I、II、III、IV、V和 VII型病毒保存 1 2年以上 ,牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒 NADL株和 Oregon C2 4 V株保存1 6年以上 ,传染性牛鼻气管炎病毒 NU/6 7株保存 1

柔性纳米脂质体对鼻粘膜纤毛毒性的评价

目的：评价不同表曲活性剂、普通脂质体和柔性脂质体对鼻粘膜纤毛运动的影响。方法：在体蟾蜍上腭模型法。结果：普通脂质体和柔性脂质体对纤毛运动均尤明显影响；不同表面活性剂对纤毛运动有一定的影响，其毒性大小顺序为：0.83％去氧胆酸钠>1％Brij35>0．86％胆酸钠>1％Tween80。结论：柔性脂质体显著降低了表面活性剂对鼻粘膜纤毛的毒性。

牛病毒性腹泻-粘膜病的流行状况及防控研究进展

牛病毒性腹泻病毒主要侵害牛,尤其是犊牛,引起以腹泻(急性感染症状)和黏膜病(慢性持续性感染症状)为临床特征的疾病,在全球广泛分布,给养牛业造成了巨大的经济损失。除此之外,还可以感染猪和羊等动物。近年来,随着规模化养殖的发展,牛病毒性腹泻-粘膜病对养殖业的危害日益显现,该病已经成为国内外研究的热点。主要对牛病毒性腹泻-粘膜病的病原特性、分类、诊断方法、国内外流行情况和防控现状等研究进展进行了综述。

牛病毒性腹泻-粘膜病病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT-PCR检测方法。通过对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的方法能检测到BVDV,而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性,具有高度的特异性。在所检测的20份样品中,BVDV阳性6份(30%)。对所构建的标准品进行检测,在102～108拷贝/μL的范围内可以得到良好的动力学曲线,能检测低至103～104拷贝/mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点,可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。

牛病毒性腹泻/粘膜病的的诊断技术

牛病毒性腹泻/粘膜病是兽医临床常见的一种疾病,流行范围广,传播速度快,给养殖业造成的损失大.笔者对此病的 诊断技术做了详细的阐述,以期为养殖户提供理论和技术参考.