杂色曲霉素对人胚胃粘膜细胞p53基因致突变研究

为探讨杂色曲霉素（ＳＴ）的致癌作用，运用细胞培养、流式细胞术（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）和银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ等方法研究了不同浓度的ＳＴ（１ｍｇ／Ｌ和３ｍｇ／Ｌ）诱发体外培养的人胚胃粘膜细胞恶性转化情况以及此过程中抑癌基因ｐ５３在蛋白及基因水平上的变化。结果表明，ＳＴ处理４周后处理细胞增殖旺盛，并出现恶性转化灶；ＳＴ处理２４周后处理细胞可在软琼脂上形成细胞集落（ＳＴ１ｍｇ／Ｌ和３ｍｇ／Ｌ组每皿细胞集落数平均分别为１５和１７个）；ＦＣＭ检测结果表明，ＳＴ处理的细胞细胞增殖指数增高，ＤＮＡ含量增高，出现ＤＮＡ异倍体，突变型抑癌基因ｐ５３蛋白表达明显增强。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析结果显示，ＳＴ处理２２周后，处理细胞ｐ５３第８外显子出现异常泳动带型。

慢性胃炎脾胃湿热证患者胃粘膜细胞凋亡及相关蛋白的研究

目的 :探讨脾胃湿热证患者胃粘膜细胞凋亡及其基因调控。方法 :慢性浅表性胃炎脾胃湿热证患者 76例 ,分别与同病脾胃气虚证患者 4 1例和健康人 10名对照。在辨证基础上 ,检测胃粘膜细胞凋亡指数 (AI)、凋亡基因相关蛋白 p5 3、Bcl 2、Fas等指标。 结果 :(1)脾胃湿热组和脾胃气虚组胃粘膜AI增加 ;(2 )脾胃湿热组和脾胃气虚组 p5 3、Bcl 2表达显著高于健康人组 ,脾胃湿热组Fas表达显著高于健康人组。结论 :胃粘膜从正常→实证→虚证的变化过程中 ,细胞凋亡逐步增多。p5 3、Bcl 2、Fas表达参与细胞凋亡的调控与证候形成的复杂性有关。

溃疡性结肠炎肠粘膜细胞中糖皮质激素受体α和β的表达

目的 研究溃疡性结肠炎患者肠粘膜细胞中糖皮质激素受体 α、β(GRα、GRβ)表达与糖皮质激素治疗反应以及炎症程度之间的关系。方法 采用免疫组织化学法检测肠粘膜细胞中 GRα、GRβ表达强度。比较激素抵抗、激素敏感及正常对照 3组间以及炎症程度各组间 GRα、GRβ表达差异。结果 肠粘膜组织切片中 GRα、GRβ的表达强度在抵抗与敏感组之间有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,在激素敏感组与正常对照组间无显著差异 ,且与炎症程度无关。结论 糖皮质激素受体 GRα、GRβ在决定患者对激素治疗的反应中起着重要的作用 ,其中 GRβ可能对 GRα起优势负性抑制作用 ,检测患者肠粘膜细胞中 GRα、GRβ的表达可预测患者对激素治疗的反应 。

应用Ⅲ型胶原作底物培养胎兔胃粘膜细胞

应用Ⅲ型胶原作底物培养胎兔胃粘膜细胞王韦，戴方平，张素贞，牟贤龙，赵慧娟有关应用胃粘膜细胞培养，研究各种胃粘膜细胞的功能，提供细胞水平的体外模型的工作，国内尚未报道。我们选用胎兔胃粘膜在Ⅲ型胶原膜上作细胞培养获得成功，现报告如下。１材料和方法１．１材...

巯基物质在氧自由基损伤离体胃粘膜细胞中的作用

本文用离体胃粘膜细胞研究了细胞内流基物质在活性氧诱发细胞损伤中的作用。实验采用pronase-EDTA法分离大鼠胃粘膜细胞并进行短期孵育,以黄嘌呤氧化酶(XO)-黄嘌呤(X)系统产生氧自由基损伤细胞。实验结果表明,用XO-X损伤胃粘膜细胞时,细胞存活率显著降低,乳酸脱氨酶(LDH)漏出量增多,同时细胞内非蛋白质巯基(NPSH)和蛋白质巯基(PSH)含量均不同程度地下降;N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)在耗竭细胞内NPSH和PSH的同时,引起细胞死亡和LDH漏出增加,这一作用与NEM的作用时间和浓度是显著依从关系;在细胞孵育液中预先加入含-SH的化合物还原型谷胱甘肽(GSH)或半胱胺,可剂量依赖性地减轻XO-X引起的细胞损伤。上述结果提示,胃粘膜细胞内的巯基物质在自身防御机制中具有重要作用,氧自由基损伤胃粘膜细胞的机制之一可能与破坏细胞内巯基的稳态有夫。

白介素在哮喘与慢性支气管炎气道粘膜细胞的表达

目的 探讨哮喘与慢性支气管炎 (慢支 )气道炎症性质的异同。方法 应用免疫组化技术 ,检测两组患者大气道粘膜嗜酸粒细胞阳离子蛋白特异性抗体 (EG1)、肿瘤坏死因子 (TNFα)、IL - 5、IL - 8的阳性细胞。结果 EG1、IL - 5阳性细胞数表达在哮喘组明显增高 ,IL - 8阳性细胞数表达在慢支组明显增高。结论 嗜酸性粒细胞活化及 IL - 5表达水平增高是哮喘性炎症的特点 ,而 IL - 8表达水平增高是慢支气道炎症的特点。

生长抑素对氧自由基引起的离体胃粘膜细胞损伤的保护作用及其机制

采用pronase—EDTA法分离大鼠胃粘膜细胞,将黄嘌呤氧化酶(xanthineoxidase,XO)—黄嘌呤(xanthine,X)氧自由基生成系统加入培养液诱发细胞的损伤。观察到预先加入生长抑素可以剂量依赖性地减轻XO—X引起的细胞死亡和乳酸脱氢酶的漏出;同时抑制XO—X引起的细胞脂质过氧化水平的升高,并翻转细胞膜流动性及溶血性卵磷脂与卵磷脂比值的变化。上述结果提示,生长抑素对氧自由基引起的胃粘膜细胞损伤可能具有直接的保护作用,其机制似与防止质膜的脂质过氧化并从而保护细胞膜免受损伤有关。

HGF对大鼠移植小肠粘膜细胞增殖及凋亡的作用研究

目的：了解肝细胞生长因子(HGF)对大鼠移植小肠粘膜细胞增殖及凋亡状态的影响。方法：Wistar(RT1k )大鼠行异位全小肠移植后第2天开始给予肠外营养至第10天，对照组(n=10)行常规TPN支持，HGF组(n=10)行常规TPN支持并加HGF，采用流式细胞技术及原位末端标记技术观察各组实验前后移植肠粘膜细胞增殖指数的变化。结果：两组移植前基准增殖指数及凋亡指数无显著差异(P>0.05)，实验后对照组移植肠粘膜细胞增殖指数较移植前明显下降，HGF组增殖指数较移植前明显升高，对照组凋亡指数较移植前明显升高，HGF组凋亡指数增加不明显。结论：HGF能明显促进大鼠移植小肠粘膜细胞增殖，并减轻其凋亡，构成了其对移植肠形态及功能维护作用的物质基础。

抗牛小肠粘膜细胞牛轮状病毒受体单克隆抗体的研究

应用新生牛小肠粘膜细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合，建立１株杂交瘤细胞系５Ｇ１０—Ｂ１１，经连续传代和冻存一年仍能稳定地分泌抗体，ＭＣＡｂ亚类为ＩｇＧ１，杂交瘤细胞培养上清液、以免疫血清和腹水的抗体效价分别为１：４０、１：２，５６０和１：５，１２０。经阻断和免疫斑点试验证实为抗斗轮状病毒受体的ＭｃＡｂ。

幽门螺杆菌感染与慢性胃炎胃粘膜细胞凋亡的关系

目的 研究慢性胃炎 (CG)胃粘膜细胞凋亡状况及其与幽门螺杆菌 (Hp)感染、炎症程度、炎症活动度之间的关系。方法 6例正常对照 ,82例CG ,检测胃窦Hp感染、粘膜炎症程度及活动度。TUNEL法检测粘膜凋亡细胞。结果 正常、Hp(- )CG、Hp(+)CG凋亡指数 (AI)依次升高 ,组间差异均显著 ;Hp(+)CGAI依炎症轻、中、重度上升 ,轻、重度之间差异显著 ;Hp(+)CGAI随炎症活动度无、轻、中、重依次升高 ,差异均显著。Hp(- )CG ,AI随炎症程度依次升高 ,但差异无显著性 ;而炎症活动者AI显著高于非活动者。结论 CG胃粘膜上皮细胞凋亡增加 ,其中Hp是最重要的致凋亡因子 ;粘膜急性炎症细胞浸润是CG粘膜细胞凋亡的重要介导因素 ;粘膜慢性炎症细胞浸润在Hp致凋亡过程中也起一定作用。

高氟对大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的 研究高氟对大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法 雄性SD大鼠饮用含 15 0mg/LNaF的蒸馏水溶液 4周 ,用流式细胞术研究大鼠口腔粘膜细胞增殖周期和DNA相对含量 (DNARC) ,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果 高氟能引起大鼠口腔粘膜细胞增殖周期的改变 ,使G2 /M期细胞明显下降 ,DNARC也显著下降 ,DNA损伤率明显升高。另外 ,高氟也造成口腔粘膜组织的氧化应激 ,活性氧族、脂质过氧化产物显著增高 ,还原型谷胱甘肽明显下降。结论 高氟不仅改变了大鼠口腔粘膜细胞的增殖周期 ,还造成氧化应激 。

氟中毒对大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的影响

目的 研究氟中毒对大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的影响。方法 雄性SD大鼠饮用含150mg/L氟化钠(NaF)的蒸馏水溶液4周,用单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤。结果 氟中毒能明显诱导大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤,总损伤细胞百分率分别为50.20％和44.80％。结论 氟中毒能引起大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤。

幼儿腭粘膜细胞钙离子浓度和龋病关系的研究

目的①测定无龋组、龋病低危组和龋病高危组幼儿腭粘膜细胞内钙离子的荧光强度;②分析细胞内钙离子荧光强度和患龋状况的关系。对象:50名4～5岁幼儿按患龋状况分为三组,无龋组22例(dft=0且CSI=0)、龋病低危组12例(0<dft<5且0<CSI<10)、龋病高危组16例(CSI≥10且dft≥5)。方法刮取受试幼儿腭粘膜表层脱落细胞,以钙离子荧光指示剂Fluo-3染色,用激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内钙离子的荧光强度。结果①无龋组幼儿腭粘膜细胞钙离子荧光强度高于有龋组幼儿腭粘膜细胞内钙离子荧光强度,两组间差异有高度统计学意义(P<0.0001);②龋高危组幼儿腭粘膜细胞钙离子荧光强度均值明显低于龋低危组和无龋组,差异有高度统计学意义(P<0.0001);③不同性别间,钙离子荧光强度差异无统计学意义(P>0.05);④不同年龄间,钙离子荧光强度差异无统计学意义(P>0.05);⑤有龋组幼儿腭粘膜细胞内钙离子荧光强度与dft、dfs、CSI均无相关关系(rdft=-0.132,P>0.05;rdfs=-0.041,P>0.05;rCSI=-0.088,P>0.05)。结论4～5岁幼儿腭粘膜细胞内钙离子荧光强度与患龋状况之间有一定的关系。

五肽胃泌素及其类似物对大鼠胃粘膜细胞DNA合成的作用

利用细胞培养的方法,测定五肽胃泌素(Boc-β-Ala-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)、葡萄糖-1-脱氧果糖四肽(GIe-1-Deoxyflu-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)及Boc-三肽(Boc-Met-Asp-Phe·NH_2)等胃泌素类似物对~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入胃粘膜细胞DNA合成的影响。实验结果表明五肽胃泌素对胃粘膜细胞DNA合成有明显促进作用,而泌酸活性比五肽胃泌素还强的葡萄糖-1-脱氧果糖四肽却没有这种作用。进一步证明胃泌素的营养作用是独立于泌酸活性而存在的,二者有着不同的作用机理。

月经先期患者性周期不同时相中舌粘膜细胞化学变化的动态研究

本研究运用细胞化学技术,对10例正常月经妇女和10例月经先期患者舌粘膜上皮细胞的LDH、MDH、G-6-PDH三项指标,在月经周期不同时相中动态变化规律进行了对比研究。发现正常妇女舌苔脱落细胞三种酶的活性从月经期至排卵期逐渐升高,排卵期达最高峰后逐渐下降,于月经期达最低值;月经先期患者舌苔细胞LDH、G-6-PDH的活性月经期后逐渐下降,排卵期达高峰,排卵后稍下降,经前期又有回升趋势,而MDH在月经期活性最高,排卵期达最低值等特殊曲线变化。通过对比研究,从亚细胞分子水平证实了舌苔与机体这一整体密切相关、同步变化的规律,也为月经先期临床舌诊的微观化、客观化提供了依据。

胃粘膜细胞内叶酸水平的变化

目的 :探讨胃粘膜细胞内叶酸水平的变化。方法 :胃镜取活组织经病理证实为胃癌 3 0例、胃癌癌前状态 3 8例 (胃粘膜结肠型肠上皮化生 1 8例 ,中度非典型增生 2 0例 )、正常胃粘膜 3 0例 ,测定以上组织中叶酸水平。结果 :胃癌组织细胞内叶酸水平明显低于正常胃粘膜细胞和癌前状态细胞 ,而癌前状态细胞内叶酸水平又明显低于正常胃粘膜细胞 ,胃粘膜结肠型肠上皮化生和中度非典型增生细胞内叶酸水平无明显差异。结论 :胃粘膜细胞内叶酸水平从正常胃粘膜到胃癌癌前状态及胃癌呈依次性递减 ,各组之间差异有统计学意义 。

氧自由基对胃粘膜细胞膜的损伤作用

当黄嘌呤氧化酶—黄嘌呤(XO—X)产生的氧自由基引起离体孵育的胃粘膜细胞损伤时,细胞的丙二醛(MDA)含量随XO浓度的加大而增高,并与细胞的损伤程度呈平行关系。受损细胞的膜流动性下降及溶血性卵磷脂与卵磷脂的比值(LPC/PC)降低。提示,XO—X产生的氧自由基引起的胃粘膜细胞膜物化特性的改变是其导致细胞损伤的机理之一。

健胃汤对乙酸胃溃疡大鼠胃粘膜细胞动力学的影响

目的 :观察健胃汤对乙酸致胃溃疡大鼠胃粘膜细胞动力学的影响。方法 :制备乙酸致大鼠胃溃疡模型 ,分别予健胃汤及西咪替丁治疗 13d后 ,检测胃溃疡粘膜细胞凋亡指数 (AI)、增殖细胞核抗原标记指数 (LI) ,并分析细胞周期变化情况。结果 :模型组胃粘膜细胞AI及LI比正常对照组明显增多 ,细胞周期中各时相比率明显增加 ;健胃汤组与模型组比较 ,细胞凋亡减少而增殖增加 ,细胞周期中的G2 /M期 (有丝分裂期 )细胞比率增高。结论

唾液sIgA对二相性白念珠菌粘附口腔颊粘膜细胞的影响

目的研究唾液中sIgA对二相性白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞的影响 ,探讨口腔念珠菌感染中唾液sIgA发挥的粘膜免疫作用。 方法用兔抗人sIgA血清中和人唾液中sIgA ,12 5I—sIgA放射免疫分析法检测唾液中sIgA的浓度 ,比较含sIgA及不含sIgA的唾液对二相性白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞的影响。结果含sIgA的唾液抑制孢子相及菌丝相白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞的能力强于不含sIgA的唾液 ,且唾液中sIgA抑制孢子相白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞的能力强于抑制菌丝相白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞的能力。结论唾液sIgA可抑制二相性白念珠菌对人口腔颊粘膜细胞的粘附 ,且更易抑制孢子相白念珠菌粘附人口腔颊粘膜细胞。