小鼠MAdCAM-1分子cDNA的获得及测序

MAdCAM-1分子(mucosal addressin cell adhension molecule-1)也称粘膜血管定居因子(mucosal vascular addressin),是一种选择性表达于肠道粘膜淋巴组织血管内皮细胞上的粘附分子,它属于免疫球蛋白超家族,是一个跨膜蛋白,胞外区由3个免疫球蛋白样结构域及一个粘蛋白(mucin)样区域组成,N端2个免疫球蛋白样结构域可以同淋巴细胞的归巢受体α4β7整合素结合,第三个粘蛋白样结构域可以和选择素L(selectin)结合。MAdCAM-1分子的这种结合特性可引导淋巴细胞向粘膜部位的定向归巢。

小鼠MAdCAM-1分子剪切体的克隆及表达

目的 获得小鼠粘膜血管定居因子 (MAdCAM 1)分子剪切体cDNA ,并在原核细胞中进行有效表达。方法 从BALB/c小鼠的肠系膜淋巴结中提取总RNA ,利用RT PCR方法获得小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ,构建原核表达载体并进行表达 ,纯化融合蛋白制备多抗。结果 核酸序列分析表明获得了正确的小鼠MAdCAM 1分子剪切体cDNA ;小鼠MAdCAM 1剪切体以融合蛋白的形式得到表达 ,主要以包涵体形式存在 ;免疫印迹分析表明 ,小鼠MAdCAM 1剪切体蛋白可被小鼠MAd CAM 1分子的标准单抗及自制多抗识别。结论 小鼠MAdCAM 1剪切体cDNA、表达蛋白及多抗的获得 ,为进一步研究该分子的生物学活性做好准备。