粘质沙雷氏菌PS-1菌株对甜菜夜蛾幼虫中肠结构及消化酶活性的影响

粘质沙雷氏菌Serratia marcescens PS-1菌株是从罹病黄曲条跳甲幼虫体内分离获得的病原菌,它对甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫有显著的胃毒作用。为了明确PS-1菌株的杀虫机理,本文测定了甜菜夜蛾幼虫取食了含PS-1菌株的人工饲料后中肠蛋白酶和淀粉酶的活性,采用组织切片和透射电镜观察研究了甜菜夜蛾幼虫感染PS-1菌株后中肠肠壁细胞结构的变化。结果表明:甜菜夜蛾感染了PS-1菌株后,中肠蛋白酶和淀粉酶的比活力显著降低。对感染了PS-1菌株的甜菜夜蛾幼虫中肠的组织病理学研究发现,中肠整个围食膜被破坏消失;细胞明显伸长,变形;细胞间隙增大,细胞脱落。进一步的透射电镜观察发现中肠细胞的微绒毛脱落,内质网消失,细胞质空泡化。推测,粘质沙雷氏菌PS-1菌株对甜菜夜蛾幼虫的毒杀作用机制之一与消化酶活性抑制和中肠组织病变有关。

山羊肺源肠外致病型大肠杆菌和粘质沙雷氏菌混合感染的病原分离鉴定、毒力因子基因检测和耐药性分析

为了确定1例成年山羊突然急性死亡的原因,本试验采用病史调查、病理剖检、病原菌分离和鉴定明确细菌性病原,对分离菌进行致病性试验和药敏试验,并根据药敏试验结果对其余未发病山羊进行给药预防;对分离到的大肠杆菌进一步进行系统进化群分析和毒力因子基因检测。结果显示,死亡山羊剖检可见部分结肠肠段严重出血,心内膜有散在出血斑,瘤胃黏膜局部充血;从肺组织中分离获得大肠杆菌和粘质沙雷氏菌;致病性试验结果显示,大肠杆菌对小鼠的致死率为90%,粘质沙雷氏菌对小鼠无致病性;药敏试验结果显示,大肠杆菌对头孢曲松和丁胺卡那敏感,粘质沙雷氏菌对恩诺沙星、丁胺卡那、庆大霉素和磷霉素中度敏感;使用头孢噻呋钠和恩诺沙星注射液对其余未发病山羊进行预防性注射给药后,未再出现发病死亡。系统进化群分析显示,分离获得的大肠杆菌属于A群;毒力因子基因检测结果显示,该大肠杆菌携带2种毒力标记基因(afa和iutA),因此属于肠外致病型大肠杆菌,该菌还携带其他毒力因子基因(ompA、ompT、traT、iss、iroN、iucD、fimH和gafD);本试验结果可为山羊大肠杆菌和粘质沙雷氏菌混合感染的诊断和治疗提供参考。

扬子鳄源粘质沙雷氏菌XCYZE株的分离鉴定及其致病性分析

目的查明一例源于安徽省扬子鳄管理中心的幼鳄死因。方法从幼鳄脑部组织坏死灶采集病料,进行细菌分离与鉴定,并对其致病性进行分析。结果菌落在血琼脂平板上生长呈红色的革兰氏阴性菌;生理生化试验显示该菌在葡萄糖、甘露醇、乳糖、柠檬酸盐和硫化氢等中均呈阳性;PCR扩增其16S rDNA基因,其大小约1500 bp,经遗传进化树分析,与已报道的粘质沙雷氏菌GRD1株在同一分支;其致病性试验可导致实验鼠在36 h内全部死亡,出现严重肺出血、肝脏肿大、脾脏肿大、腹水现象等。结论从扬子鳄脑内分离的病原是粘质沙雷氏菌,具有较强的致病性,且对多种抗菌药具有一定的耐药性。本试验为野生动物或者人类感染粘质沙雷氏菌的诊断和治疗提供参考意见。

粘质沙雷氏菌菌株PS-1对甜菜夜蛾种群增长的抑制作用

甜菜夜蛾是我国严重为害蔬菜的害虫之一,本文测定了粘质沙雷氏菌菌株PS-1对甜菜夜蛾的致病力及其试验种群增长的抑制作用.用菌株PS-1菌悬液与人工饲料混配饲喂甜菜夜蛾2龄幼虫48 h,对其幼虫的存活有明显的抑制作用,对其蛹和成虫有明显的后致死作用.在2×10^1～2×10^8 cfu/g的浓度范围内,有明显的浓度效应.随着处理浓度的升高,甜菜夜蛾幼虫的死亡率明显提高,蛹的存活率明显降低,成虫产卵量明显减少,其试验种群的增长分别比对照降低了74.4％～100％.用浓度为1×10^3、1×10^5和1×10^7 cfu/mL的PS-1菌悬液分别配制成10％蜂蜜水饲喂甜菜夜蛾成虫2d,各浓度处理组成虫的寿命分别比对照缩短了5.70、5.91和7.16d,产卵量也明显减少.用浓度为1×10^9cfu/mL的PS-1菌悬液离心后,取上清液加入到人工饲料中饲喂甜菜夜蛾2龄幼虫48 h,幼虫8d累积死亡率达70.0％,显著高于对照.用组建生命表的方法评价了菌株PS-1对甜菜夜蛾的全面作用,该菌株对甜菜夜蛾试验种群增长的抑制作用,主要是其抑制了甜菜夜蛾幼虫和成虫的存活率以及成虫的生殖力.这些结果为甜菜夜蛾的生物防治和粘质沙雷氏菌PS-1的进一步开发利用提供了依据.

1株分离自蛹虫草小麦培养基的粘质沙雷氏菌的鉴定及初步研究

从蛹虫草小麦培养基中筛选出1株产红色素的菌株,划线分离、纯化后命名为CD1,对其进行了16S rDNA ITS序列分析。同时将其接种于正常的蛹虫草小麦培养基上,接种后在蛹虫草子实体生长早期、中期、后期分别进行子实体湿质量、干质量、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性等生理生化指标测定,结果表明该菌为粘质沙雷氏菌,接种小麦培养基后可以显著提高蛹虫草子实体产量。

共存离子对粘质沙雷氏菌吸附钇的影响

本研究以粘质沙雷氏菌为吸附剂,以水溶液中的钇离子对吸附对象,研究了钇溶液中存在铝、铁、锌和镁离子对粘质沙雷氏菌吸附钇的影响。结果表明,铝离子严重抑制粘质沙雷氏菌对钇的吸附,铁、锌和镁离子对吸附的抑制较弱,多种离子共存对粘质沙雷氏菌吸附钇的抑制程度依次为:锌+铁+铝>铝+铁>锌+铁>锌+铝。共存离子对粘质沙雷氏菌吸附钇都有抑制作用,这可能是由于它们和钇离子竞争吸附在粘质沙雷氏菌表面吸附,吸附的抑制程度不同应该是因为粘质沙雷氏菌吸附这些共存离子的活性基团不同。红外光谱分析结果证实了粘质沙雷氏菌的羧基、氨基和羟基是吸附铁、镁和锌离子的主要官能团,而羧基和羟基是吸附铝离子的主要官能团。

治疗用粘质沙雷氏菌菌苗(S311)治疗癌性胸腔积液的Ⅱ期临床研究

目的 评价S311治疗癌性胸腔积液的疗效及毒副作用。方法 经胸穿或闭式引流抽净胸水后 ,胸腔注入S3110 .32mg ,每周 1次 ,连续 3周 ,停药后观察 1个月评价疗效。结果 2 41例患者完成胸腔注入S311治疗 ,总有效率 92 .1%。主要的不良反应为发热和胸痛 ,发生率分别为 81.0 %和 5 2 .2 %。少数患者出现寒战、呼吸困难、恶心、呕吐 ,个别患者出现肝功能异常。结论 粘质沙雷氏菌菌苗 (S311)是一种治疗癌性胸腔积液的有效药物。

粘质沙雷氏菌S-JS1对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾致病力的温度效应

为明确粘质沙雷氏菌S-JS1对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾致病力的温度效应,采用饲毒法测定了该菌在不同使用温度和培养温度下的杀虫活性。结果表明,在22~31℃的使用温度范围内,粘质沙雷氏菌S-JS1对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾3龄幼虫的致病力呈正温度系数,但在31~34℃,对甜菜夜蛾的致病力下降,呈负温度系数。对于22~34℃的培养温度,28℃培养的粘质沙雷氏菌SJS1对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾致病力最高。因此,在一定的培养温度范围内,随着温度的升高,该菌对甜菜夜蛾和斜纹夜蛾致病力与温度先呈正相关,到达最佳致病力温度后再呈负相关。

粘质沙雷氏菌S-JS1与5种杀虫剂对灰飞虱的联合作用及该菌对灰飞虱相关酶活性的影响

为明确粘质沙雷氏菌Serratia marcescens S-JS1与杀虫剂对灰飞虱的联合作用,以及SJS1对灰飞虱解毒酶和保护酶活性的影响,以灰飞虱3龄若虫为对象,采用喷雾法比较了SJS1与5种杀虫剂（螺虫乙酯、噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒和毒死蜱）单用,以及菌、药混用对灰飞虱的杀虫活性,测定了灰飞虱取食经S-JS1处理的水稻后,虫体内羧酸酯酶（CarE）、谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）、过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化。结果表明：粘质沙雷氏菌S-JS1分别与不同浓度杀虫剂混用,均可提高杀虫剂对灰飞虱的致死率。其中,109 cfu/m L的S-JS1与1.25 mg/L的噻虫嗪混用处理3 d,或与25 mg/L的螺虫乙酯混用处理5 d,灰飞虱的死亡率分别为65.58%和76.27%,均显著高于同浓度杀虫剂单用的处理（噻虫嗪单用时致死率为44.24%,螺虫乙酯为49.22%）,表现为增效作用（χ~2〉3.84,实测死亡率–预期死亡率〉0）;其他各混用处理均为相加作用（χ~2〈3.84）。灰飞虱取食经粘质沙雷氏菌处理的水稻苗后12和24 h,其Car E活性与对照组间无显著性差异,GSTs活性呈先降低后升高趋势,POD和SOD活性均低于对照组。研究表明,粘质沙雷氏菌S-JS1可能降低了灰飞虱对杀虫剂的抵抗力。本研究可为探索昆虫病原细菌与杀虫剂间的联合应用提供参考,为灰飞虱的有效防治提供新思路。

粘质沙雷氏菌NJZT-1产灵菌红素培养条件的优化

灵菌红素是一类具有多种生物活性的天然红色素的总称,主要由粘质沙雷氏菌产生,通常都有3个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构。灵菌红素具有抗肿瘤、免疫抑制、抗菌性、抗疟疾等多种生物学活性。通过单因素实验,分析了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂、初始p H、培养温度等因素对粘质沙雷氏菌生长量及灵菌红素合成的影响。结果表明:粘质沙雷氏菌最佳产灵菌红素的培养条件为温度28℃,p H 7.0,培养基中碳源为淀粉,氮源为乙酸铵,无机盐为Fe Cl3,表面活性剂为二甲亚砜(DMSO),在此条件下粘质沙雷氏菌产灵菌红素条件为最佳。

粘质沙雷氏菌的生防作用

粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性菌,能够在植物根际、植物体和昆虫体内定殖,对害虫、虫媒传染病病原物、植物病原物、杂草等具有一定的生物防治功效,由于粘质沙雷氏菌能在松墨天牛(Monochamus alternatus Hope)与松树体内富集,因而在松材线虫病防治方面具有很好的潜力。粘质沙雷氏菌还具有促进植物生长,净化环境等作用有待探讨。本文基于国内外研究进展,系统论述了粘质沙雷氏菌在生物防治方面的研究,为未来粘质沙雷氏菌微生物农药的进一步开发利用提供参考。

治疗用粘质沙雷氏菌菌苗（S311）治疗癌性胸腔积液的Ⅱ期临床研究

目的 评价Ｓ３１１治疗癌性胸腔积液的疗效及毒副作用。方法 经胸穿或闭式引流抽净胸水后，胸腔注入Ｓ３１１０．３２ｍｇ，每周１次，停药后观察１个月评价疗效。结果 ２４１例患者完成胸腔注入Ｓ３１１治疗，总有效率９２．１％，主要的不良反应为发热，胸痛，发生率分别为８１．０％和５２．２％。少数病人出现寒战，呼吸困难，恶心，呕吐，个别病人出现肝功能异常。

粘质沙雷氏菌致体外循环连续感染 11 例分析

本院儿胸外科在为３４例先心病和２例漏斗胸畸形患儿施行手术中，采用体外循环２８例连续发生粘质沙雷氏菌败血症１１例，感染率为３９．２８％，而非体外循环８例无１例感染。分析认为：（１）本组发生连续感染与体外循环过程有关，为直接血源性感染，且为同源性。（２）体外循环心内直视手术者易发生院内感染，尤其要警惕粘质沙雷氏菌感染。（３）本组感染原因为综合性的，其中环境因素不容忽视。

粘质沙雷氏菌脑膜脑炎尸检1例报告

临床资料 患者男性,23岁,因头痛、呕吐、左下肢无力20天,加重伴神志恍惚,左侧偏瘫5天入院。20天前,(?)后出现畏寒、发热、头痛、呕吐,自服“感冒药”后热退,其余症状无缓解。5天前,头痛加剧,饮水呛咳、神志恍惚、左侧偏瘫,以“散发性脑炎”收入院。 查体:T 36℃,P 180次/分,R 20次/分,BP18.7/10.7kPa,全身消瘦、颈项强直、神志恍惚;双肺呼吸音粗,心界不大,律齐,未闻杂音。神经系统检查:两侧瞳孔圆形等大,光反射存在,眼底视乳头边界清楚,动静脉比例3:2;左眼闭合差,左鼻唇沟变浅,口角向右歪斜,面部感觉及颅神经检查不配合;

粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1在大肠杆菌中的分泌表达及其条件优化

克隆粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因pla A,与载体p ET-22b(+)连接构建重组质粒p ET-22b(+)-pla A,并将重组质粒导入受体菌E.coli BL21(DE3)中表达,构建得到重组菌AP22,IPTG诱导表达目的蛋白后将培养基蛋白进行SDS-PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式大量存在于发酵液中,分子质量约35 ku,与预期蛋白大小一致。以磷脂酶A1酶活为指标,在单因素实验的基础之上,通过正交实验得到摇瓶培养最佳条件为:氨苄青霉素终浓度30μg/m L,IPTG加量0.25 mmol/L,温度为34℃,OD600值为0.3,诱导时间4 h。在此条件下重组胞外磷脂酶A1酶活可高达8.6 U/m L,比优化前提高了43.3%。

粘质沙雷氏菌G1利用玉米浆干粉和磷酸氢二铵生产2,3-丁二醇的研究

研究了几种工业氮源对粘质沙雷氏菌G1发酵生产2,3-丁二醇的影响,在确定玉米浆干粉为氮源的基础上,利用Plackett-Burman(PB)实验和响应面法(RSM)实验对玉米浆干粉和磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]的浓度进行了优化,确定优化培养基(g·L-1)为:蔗糖90,玉米浆干粉20.32,(NH4)2HPO47.21,NaAc 4,柠檬酸钠14,MgSO40.5,Fe-SO40.02,MnSO40.01。并以此优化培养基进行了摇瓶和分批补料发酵,结果表明,摇瓶发酵中,90g·L-1的蔗糖最终被转化成43.06g·L-1的2,3-丁二醇;分批补料发酵中,2,3-丁二醇浓度为128.28g·L-1,产率为2.67g·L-1·h-1,转化率为0.48g·g-1蔗糖。以玉米浆干粉和(NH4)2HPO4为氮源,2,3-丁二醇浓度较高,培养基的成本大幅降低,为工业化生产奠定了基础。

粘质沙雷氏菌全能核酸酶的研究进展

全能核酸酶又称非特异性核酸酶(Nonspecific nuclease,NU),可降解几乎所有形式的DNA和RNA (包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸),生成3~5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶来源广泛,在动物、植物、细菌、真菌和病毒均有发现,到目前为止,已鉴定出30多种不同来源的全能核酸酶,其中来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的全能核酸酶活力最强(下文无特殊说明,全能核酸酶均指来源于粘质沙雷氏菌全能核酸酶),能够在非常广泛的条件下保持很高的稳定性和消化活力。全能核酸酶在兽医方面的应用主要是去除兽用疫苗、蛋白、多糖类生物制药生产过程中的核酸残留,降解动物性饲料中的病原体的核酸残留,维护养殖场的生物安全。

粘质沙雷氏菌在环境修复与农业虫害生物防治的研究概述

随着环境污染的日益加剧,人们越来越期待一种绿色安全高效的生物修复与防治手段。粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)是的良好昆虫内生菌,在近年来是生物防治的研究热门物种,本文综述了粘质沙雷氏菌在重金属污染、化学杀虫剂污染生物修复与农业害虫生物防治上的重点物种与主要防治原理,同时针对粘质沙雷氏菌的未来发展提出了需要解决的问题与障碍,以期为未来微生物制剂的发展提供一些帮助。

粘质沙雷氏菌武汉株PLA_1基因的克隆和序列

通过鸟枪法构建了粘质沙雷氏菌SerratiamarcescensCW W 90 3菌株的基因组文库。使用LB 卵黄平板 ,从中筛选出 1条含磷酯酶基因的 3 0 10bp的EcoRⅠ片段。通过测序及亚克隆分析 ,发现 1个编码磷酯酶的基因phlA ,长度为 96 3bp ,编码 1个由 32 0个氨基酸组成 ,分子量为 33ku的磷酯酶PHL。PHL的氨基酸序列与多种细菌产生的磷酯酶A1的氨基酸序列有很高的同源性。在 phlA下游发现 1个 75 6bp的ORF phlB ,编码 1条 2 5 1个氨基酸组成的蛋白质 ,分子量为 2 7ku ,将其命名为PHLS ,此基因的功能有待于进一步研究。