冠心病患者细胞粘附分子的水平变化和临床意义

目的 :探讨冠心病患者外周血白细胞粘附分子 β2 整合素 (β2 -intergrin ,CD18)和血清可溶性细胞间粘附分子 - 1(solubleintercellularadhesionmolecule - 1,sICAM - 1,CD5 4 )、血管细胞粘附分子 - 1(solublevascularcelladhesionmolecule - 1,sVCAM - 1,CD10 6 )变化及其意义。方法 :采用流式细胞仪技术检测 4 5例冠心病患者外周血白细胞CD18以及血清sICAM - 1和sVCAM - 1的表达。结果 :冠心病患者外周血白细胞CD18以及血清sICAM- 1和sVCAM - 1表达显著增加。结论 :冠心病患者外周血白细胞CD18以及血清sICAM - 1和sVCAM - 1的水平对冠心病的早期诊断具有一定的临床意义。

慢性肝病患者血清可溶性细胞间粘附分子-1和透明质酸水平及其意义

目的：探讨血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）和透明质酸（ＨＡ）与肝纤维化及肝损害的关系。方法：用ＥＬＩＳＡ法检测正常人、慢性肝炎肝硬化患者血清ｓＩＣＡＭ－１。用ＲＩＡ法测定正常人、慢性肝炎肝硬化患者血清ＨＡ。结果：慢性肝病患者各组血清ｓＩＣＡＭ－１均显著高于正常人，各组间存在显著差异；血清ＨＡ水平在慢性肝炎中度组、重度组、肝硬化组明显高于正常人。在不同临床类型的慢性肝病患者中ＨＡ血清水平也存在显著差异，病情越重，血清ｓＩＣＡＭ－１和ＨＡ水平越高。两者与血清草酰乙酸转氨酶（ＡＳＴ）、总胆红素、球蛋白呈显著正相关，与血清白蛋白呈显著负相关。结论：慢性肝病患者血清ｓＩＣＡＭ－１和血清ＨＡ可作为判断肝纤维化及肝损伤程度的指标。

丹参对肝癌转移复发防治作用的研究

目的：观察丹参对ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株（７７２１细胞）侵袭粘附能力和对裸鼠人肝癌切除术后转移复发的影响。方法：以流式细胞仪测量丹参对７７２１细胞表面细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）的表达的影响。以细胞侵袭实验观察丹参对ＳＭＭＣ７７２１细胞侵袭运动能力及对已与纤维连接蛋白（ＦＮ）粘附的７７２１细胞脱落的影响。以ＭＴＴ法测量丹参对７７２１细胞与ＦＮ粘附的影响。以细胞粘附实验观察丹参对７７２１－７７２１细胞，７７２１－内皮细胞，７７２１－淋巴细胞之间粘附的影响。以ＬＣＩＤ２０裸鼠人肝癌转移模型为材料，观察丹参对早期和晚期肝癌切除术后转移复发的影响。结果：丹参处理的７７２１细胞ＩＣＡＭ１表达明显低于对照组，丹参可抑制７７２１细胞的侵袭能力，促进已粘附细胞的脱落，可抑制７７２１与７７２１细胞、淋巴细胞、内皮细胞的粘附，并对早期和晚期裸鼠人肝癌切除术后的肝内和远处转移复发有防治作用。结论：丹参可抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞的侵袭粘附能力，防治裸鼠人肝癌切除术后的转移复发。

恒河猴胚胎浅表型植入机理的探讨

为揭示恒河猴胚胎浅表型植入的分子机理 ,实验采用免疫组化和原位杂交的方法研究了粘附侵润相关分子在妊娠恒河猴母胎界面的表达模式 ,发现层粘连蛋白 (LN)、Ⅳ型胶原 (ColⅣ )和基质金属蛋白酶 2(MMP 2 )在滋养层细胞柱的远端开始表达 ;整合素α1β1从柱的近端到远端表达逐渐升高 ,但在滋养层细胞鞘中上述分子的表达均降低 ;大量侵润母体血管的滋养层细胞高水平表达上述分子。此外 ,植入早期上皮斑和蜕膜基质细胞高表达MMPs组织抑制因子 2 (TIMP 2 )。结果提示 ,滋养层细胞鞘中α1β1、LN、MMP 2表达水平的降低及上皮斑、蜕膜和滋养层细胞中TIMP 2的高表达可能是导致浅表型植入形成的分子基础.

己酮可可碱在大鼠肠缺血再灌注损伤中的保护作用及机制

目的:探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)在大鼠肠缺血再灌注损伤中的保护作用及机制。方法:Wistar大鼠48只随机分成6组,每组8只。(1)假手术组(S); (2)缺血组(I); (3 )缺血再灌注2h组(IR2h); (4)缺血再灌注4h组(IR4h);(5)缺血再灌注2h+PTX组(P2 ); (6)缺血再灌注4h+PTX组(P4 ),测定各组动物血清肿瘤坏死因子α(TNF α)水平、肠组织细胞粘附分子(ICAM 1 )表达、肠组织过氧化物酶(MPO)活性及观察病理形态。结果:IR2h及IR4h组大鼠血清TNF α水平、肠组织ICAM 1表达及肠MPO活性均明显高于S组(P<0. 01)。给予PTX后, 血清TNF α水平有所下降,P4 组与IR4h组比较差异有非常显著意义(P<0. 01);肠组织MPO活性明显降低,IR2h组与P2 组比较或IR4h组与P4 组比较差异均有非常显著意义(P<0. 01);肠组织ICAM 1积分光密度值比较,P2,P4 组明显低于IR2h及IR4h组(P<0. 01)。结论:已酮可可碱可降低血TNF α水平及肠组织ICAM 1表达,减轻中性粒细胞在肠内聚集、活化,从而防治肠缺血再灌注损伤。

小鼠VCAM-1表达载体的构建及稳定高表达间充质干细胞系C3H10T 1/2的建立

本研究旨在构建小鼠血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的逆转录病毒载体,通过转染建立稳定高表达VCAM-1的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),并初步探讨VCAM-1基因过表达对MSC免疫学特性的影响。以小鼠脾脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入PMSCVmigr-1逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒表达质粒PMSCVmigr-1-mVCAM-1,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术转染293细胞,收获含有病毒颗粒的上清;用病毒上清感染间充质干细胞系(C3H10T 1/2)并检测其表达。采用3H-TdR掺入法测定高表达VCAM-1的MSC在淋巴母细胞转化实验中对淋巴细胞增殖的抑制作用。结果表明:酶切和测序鉴定证实,正确构建了小鼠VCAM-1的重组逆转录病毒表达质粒。逆转录病毒上清感染MSC后流式细胞术检测到目的基因VCAM-1在MSC表面高表达。高表达VCAM-1的MSC对刀豆素A诱导的淋巴细胞增殖具有显著抑制作用,且呈剂量效应关系。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的重组逆转录病毒质粒并使其在MSC中稳定高表达。高表达VCAM-1的MSC对体外淋巴细胞增殖具有很强的抑制效果。本课题为进一步研究VCAM-1基因调控MSC干预免疫相关性疾病奠定了实验基础。

急性白血病骨髓基质细胞体外培养的生长特性及细胞外基质的检测

目的探讨人急性白血病骨髓造血微环境与正常的差异。方法采用Dexter型骨髓培养体系,动态观察白血病骨髓基质细胞体外生长特性,瑞氏染色计数CFU-F集落,流式细胞仪检测融合层骨髓基质细胞的VCAM-1表达及ELISA法检测培养上清中IL-6、TNF-a含量。结果急性白血病骨髓基质细胞贴壁时间、小丛形成时间、集落形成时间和融合层形成时间均明显推迟;CFU-F计数显著减少;白血病骨髓基质细胞表达VCAM-1低于正常对照组;白血病基质培养上清液中的TNF-a和IL-6含量明显高于正常对照组。结论急性白血病骨髓基质细胞的体外生长特性、粘附分子及细胞因子表达均存在异常。

脑梗死患者血清sICAM-1,TNF-α的变化及意义

目的 :探讨脑梗死患者血清中可溶性细胞间粘附分子 - 1(sICAM - 1)和肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)的水平变化及意义。方法 :应用ELISA法测定脑梗死患者急性期及恢复期血清sICAM - 1及TNF -α的水平 ,并与 2 4例正常对照组对比分析。结果 :脑梗死患者急性期血清sICAM - 1和TNF -α水平较正常对照组明显升高 (均为P <0 0 1) ,恢复期sICAM - 1及TNF -α水平较急性期明显降低 (均为P <0 0 1) ,但仍高于对照组 (均为P <0 0 5 )。结论 :TNF -α、sICAM- 1可能参与脑梗死的发病过程 ,血清sICAM - 1、TNF -α的检测有助于临床病情分析。

ICAM-1与自身免疫性内耳病

细胞间粘附分子－1（ICAM－1）是一种单链糖蛋白，免疫反应中，表达于各种免疫细胞、内皮细胞及表皮细胞。在诱导免疫活性细胞与血管内皮细胞粘附，并向炎症组织迁移过程中发挥重要作用。在内耳免疫反应早期，ICAM－1表达于内耳螺旋轴静脉及其回流小静脉、内淋巴囊及其囊周组织、螺旋韧带等，随之出现免疫细胞在内耳的聚积，并导致损害引起内耳病变。因此推测，阻断ICAM－1受体在内耳的表达，将防止炎性细胞的浸润所造成的内耳损害。

辛伐他汀抑制糖基化终产物诱导心肌微血管内皮细胞炎性反应及机制探讨

目的观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制荆辛伐他汀对糖基化终产物(AGEs)诱导心肌微血管内皮细胞(CMECs)表达单核细胞趋化因子1(MCP-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的抑制作用,探讨辛伐他汀在早期糖尿病心肌微血管炎性病变中的保护机制。方法将培养的CMECs用辛伐他汀预孵育6 h,加入400mg/L的外源性糖基化牛血清白蛋白共培养72 h,分为AGEs组和BSA对照组,分别采用ELISA法测定McP-1的表达;流式细胞仪测定ICAM-1的表达;RT-PCR法测定糖基化终产物特异性受体mRNA的表达;Western blot法检测内皮细胞表面特异性受体(RAGE)蛋白表达。结果与BSA对照组比较,AGEs组MCP-1、ICAM-1、RAGE mRNA及其蛋白表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。辛伐他汀预孵则显著抑制AGEs诱导的MCP-1、ICAM-1的表达,并在mRNA及蛋白水平下调RAGE蛋白的表达。结论辛伐他汀可能通过抑制AGEs-RAGE信号途径来发挥对糖尿病心肌微血管病变的保护作用。