E-钙粘附素的研究进展

E-钙粘附素(E-Cadherin,E-cad)是粘附分子中钙离子依赖的细胞粘附素家族(Ca2+-dependent celladhesion molecule family)中的一员,对维持正常上皮细胞形态和结构完整性起着重要作用。本文就E-cad的结构、功能、调控等方面作一综述。

前列腺癌E和N型钙粘附素的表达及意义

背景与目的:E-钙粘附素表达缺失与许多种癌密切相关,而最近在乳腺癌的研究中发现N-钙粘附素的反常表达在引起癌细胞的浸润及转移方面有着比E-钙粘附素缺失更为明显而直接的作用。本研究拟探讨前列腺癌中E和N-钙粘附素的表达与癌分级、分期及前列腺特异抗原(prostatespecificantigen,PSA)的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测56例前列腺癌标本E和N-钙粘附素的表达。结果:E-钙粘附素阳性表达24例(43%),阴性表达32例(57%);N-钙粘附素表达阴性18例(32%),阳性38例(68%),E-钙粘附素表达缺失或N-钙粘附素阳性表达与肿瘤恶性程度及分期呈正相关(P均<0.01);与血清总PSA(T-PSA)和游离PSA(F-PSA)无明显相关性,而与F-PSA/T-PSA比值呈正相关(P<0.01)。结论:E-钙粘附素和N-钙粘附素与前列腺癌的发生、发展明显相关,可以作为判断前列腺癌恶性程度及预后的指标。

双歧杆菌粘附素受体的初步观察

本文研究了Ｌｏｖｏ细胞上双歧杆菌粘附素的受体。结果表明，过碘酸钠成或蛋白酶处理Ｌｏｖｏ细胞后，双歧杆菌对Ｌｏｖｏ细胞的粘附力明显降低，呈剂量效应。Ｄ一甘露糖能抑制两者的粘附；葡萄糖，乳糖，山梨糖，蔗糖及Ｄ一果糖不能抑制粘附。提示双歧杆菌粘附素受体是一种糖蛋白，可能与甘露糖有关。

致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素papG基因克隆及序列分析

目的 克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法 根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3’端引物 ,PG1为两型papG上游 5’端共用引物 ,并在各引物 5’端加入限制性内切酶位点。以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增 ,将扩增产物克隆入质粒载体 ,筛选阳性重组质粒作序列分析。结果 UPEC132株以Ⅰ型 papG引物扩增时为阴性结果 ,以Ⅱ型 papG引物扩增时可获得约 110 0bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒 pGC39和pGC10 3,对其序列分析显示 papG132编码337个氨基酸 ,与 papGJ96的同源性仅为 4 5 % ,而与 papGIA2的同源性为 98.6 %。与papGIA2比较 ,papG132核苷酸序列 +3位缺失 1个三联体密码 ,并在特异性受体结合域 +49位、+16 0位和PapD蛋白亚单位作用区 +2 72位、+314位存在错义突变 ,此外还存在 7处同义突变。结论UPEC132株的P菌毛不同于相同血清型的UPECJ96株 ,前者为F13型papA与Ⅱ型papG组合 ,后者为F13型 papA与Ⅰ型papG组合。Ⅱ型PapG粘附力较强 ,具有重要的临床意义。

幽门螺杆菌临床株粘附素HpaA基因的克隆表达及在诊断中的价值

目的 构建表达幽门螺杆菌临床株粘附素 (HpaA)的重组质粒 ,在大肠杆菌中表达获得重组蛋白 ,探讨重组蛋白作为Hp抗原在感染诊断中的价值。 方法 用PCR方法从幽门螺杆菌临床株DNA中扩增HpaA基因片段。克隆及序列分析后在大肠杆菌中进行高效表达 ,表达产物经纯化和Westernblot鉴定后 ,作为Hp抗原 ,ELISA法对 10 0例临床标本进行相应抗体检测 ,并与细菌培养、组织学染色和快速尿素酶试验比较来评价其应用的可行性。结果 经酶切、测序分析插入的基因片段全长 783bp ,与基因文库中的粘附素基因同源性达 98 87%。表达蛋白经SDS -PAGE分析 ,相对分子量 (Mr)约为 300 0 0 ,可溶性表达占全菌的 4 1 6 7%以上 ,经亲和层析后可获得纯度为 90 %以上的重组蛋白。Westernblot证实了其免疫反应性。通过对临床病例的检测结果显示细菌培养、组织学染色、快速尿素酶试验和HpaA抗体检测的敏感性、特异性和准确性分别为 10 0 0 %和 80 9% ;10 0 0 % ;和 90 5 % ;90 5 %和 85 8% ;93 3%和 85 9% ,相差不多。结论 HpaA能在大肠杆菌中高效表达 ,具有较强的免疫反应性 ,作为检测试剂敏感性和特异性均较好 ,有望成为Hp新的非侵入性的检测方法。

E-钙粘附素失活及其基因突变与肿瘤细胞粘附和转移的关系

Ｅ┐钙粘附素失活及其基因突变与肿瘤细胞粘附和转移的关系许洪卫王元和高瀚作者单位：第二军医大学长征医院普通外科（上海２００００３）肿瘤浸润、转移等恶性表型是瘤细胞与细胞外基质相互作用的结果，其关键步骤是瘤细胞脱离原发灶并再附着转移部位［１］。钙粘附素（...

E－钙粘附素失活及其基因突变对恶性肿瘤侵袭倾向的影响

Ｅ－钙粘附素失活及其基因突变对恶性肿瘤侵袭倾向的影响许洪卫，王元和，高瀚肿瘤浸润、转移等恶性表型是瘤细胞与细胞外基质相互作用的结果，其关键步骤是瘤细胞脱离原发灶并再附着转移部位［１］。钙粘附素（ｃａｄｌｅｒｉｎ，Ｃｄ）超家族细胞粘附受体主要介导正常和...

表皮葡萄球菌ica操纵子与细胞间多糖粘附素及生物膜表型的相关性

目的探讨表皮葡萄球菌ica操纵子与细菌间多糖粘附素(polysaccharide intercellul aradhesin,PIA)及生物膜表型之间的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测icaA基因,刚果红琼脂平皿检测PIA,微量板半定量法检测细菌生物膜表型;统计学分析icaA基因与PIA及生物膜表型之间的相关性。结果49株临床分离菌株中,32.7%(16/49)能形成生物膜,67.3%(33/49)无生物膜形成。icaA基因阳性菌株中80%(8/10)有生物膜形成,ica操纵子与生物膜表型密切相关(P<0.01);PIA阳性菌株中63.6%(14/22)有生物膜形成,PIA与生物膜表型密切相关(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌ica操纵子的存在与生物膜表型密切相关,PIA的合成是生物膜形成的关键环节。

表达幽门螺杆菌粘附素BabA重组蛋白菌株的构建及其粘附活性评价

目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)粘附素BabA重组蛋白的候选菌株并测定其粘附活性。方法用PCR方法从Hp染色体DNA上扩增粘附素babA2基因,将其定向插入表达载体pET-22b(+)中,并在BL21(DE3)大肠杆菌中表达,利用光镜计数法测定其粘附活性。结果DNA序列分析表明,所克隆的粘附素babA2基因序列与GeneBank公布的一致。在37 ℃诱导表达3 h后,粘附素BabA重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.8%,体外实验证实BabA参与了粘附过程。结论本研究获得了表达有生物活性的Hp粘附素BabA的克隆,为深入研究其相关功能奠定了良好基础。

P菌毛粘附素在致肾盂肾炎大肠埃希菌对小鼠尿道上行感染中的作用

目的 比较2株具有不同P菌毛粘附素(PapG)的同血清型UPEC和1株无菌毛大肠埃希菌对小鼠泌尿道上行感染性的差异,探讨粘附素在UPEC尿道感染中的作用。方法 通过17PEC尿道内接种形成BALB/c小鼠尿道上行感染;观察尿液、肾脏剖面的菌落计数和肾组织的病理改变。结果 具有P菌毛的UPEC菌株感染之小鼠,在其尿液和肾剖面培养出大量原感染菌,肾组织呈现中、重度急性肾盂肾炎的病理改变;不同P菌毛粘附素的UPEC感染的菌落计数、肾脏病理改变严重度无显著性差异;无菌毛大肠埃希菌感染之小鼠,其尿液和肾剖面只有少量原感染茵生长,肾组织为轻至中度急性炎症改变。结论具有不同粘附素之P菌毛在介导UPEC致小鼠上行性急性肾盂肾炎中均发挥重要作用;无菌毛大肠埃希菌亦可导致小鼠肾脏炎性改变。

吸烟小鼠呼吸道上皮细胞上皮钙粘附素表达的研究

通过免疫荧光法检测不同吸烟时间小鼠呼吸道上皮细胞上皮钙粘附素（Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ，Ｅｃｄ）表达的动态变化，并采用显微荧光光度术进行定量分析。结果表明，首次吸烟１ｈ后呼吸道上皮细胞Ｅｃｄ表达与正常对照组比较明显下调（Ｐ＜００１），４６Ｗ后降到最低水平。以后逐渐上调，吸烟８Ｗ后Ｅｃｄ表达恢复正常，气管上皮细胞表达高于正常（Ｐ＜００１）。提示。

鳗源嗜水气单胞菌主要粘附素基因克隆表达及产物粘附功能分析

目的对致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)ZN1的主要粘附素基因(major adhesin gene,Mah)进行克隆表达及产物粘附功能分析。方法在GenBank上对PCR产物进行序列分析和同源性序列比对。将Mah重组到pET-32a表达质粒并转化E.coliDE3(BL21),采用ELISA和Western-blot对表达产物进行分析。结果 DNA序列分析表明PCR产物包含一个1 074bp的完整阅读框架,编码357个氨基酸,N-端22个氨基酸残基构成疏水信号肽。与已知的嗜水气单胞菌主要粘附素基因同源率为70%。ELISA和Western-blot分析表明表达产物能被鼠抗ZN1主要外膜蛋白血清特异性识别。同时,表达产物及其免疫血清能够竞争性抑制和阻断ZN1菌对EPC细胞的粘附作用。结论 Mah是嗜水气单胞菌的主要粘附因子;基因表达的融合蛋白Mah-TrxA具有天然粘附素的粘附活性。

CDX_2和E-钙粘附素在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨同源异型框转录因子-2(CDX2)和E-钙粘附素(E-cadherin)在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系和临床意义。方法选取83例胃癌黏膜组织作为试验组,另选正常黏膜组织40例为对照组,采用免疫组织化学方法检测CDX2和E-cadherin的表达情况及与胃癌组织分化、浸润和转移的关系。结果根据Laurén分型,肠型胃癌、弥漫型胃癌中CDX2阳性表达率分别为56.86%和34.38%(P<0.05)。肠型胃癌、弥漫型胃癌中E-cadherin阳性表达率分别为66.67%和28.13%(P<0.01)。在组织分化方面,CDX2和E-cadherin在高中分化程度组阳性表达率与低分化程度阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.01)。浸润深度方面,CDX2和E-cadherin在黏膜及下层的阳性表达率与肌层浆膜层的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.01)。CDX2和E-cadherin在有无淋巴结转移方面,组间比较有统计学意义(P<0.05)。相关分析表明,CDX2和E-cadherin在胃癌中的表达无明显相关性(P>0.05)。结论CDX2和E-cadherin的异常表达在胃癌,特别是肠型胃癌的发生中起着重要作用。CDX2和E-cadherin可能是预测胃癌患者临床预后的有用标志物。

E-钙粘附素在胃癌表达的临床意义(英文)

目的：探讨Ｅ－钙粘附素（Ｅ－ＣＤ）表达与胃癌发生发展及预后的关系。方法：采用ＳＰ免疫组化染色技术，检测２０例正常胃粘膜上皮，４３例异型增生和１０１例胃癌组织Ｅ－ＣＤ的表达情况。结果：正常胃粘膜和异型增生组织Ｅ－ＣＤ呈强阳性表达，８８．１％（８９／１０１）胃癌Ｅ－ＣＤ表达减弱，Ｅ－ＣＤ表达与胃癌分化差、浸润型生长显著相关（Ｐ＜０．０５），Ｅ－ＣＤ表达正常的胃癌病人术后３、５年生存率显著高于减弱者（Ｐ均＜０．０５）。结论：Ｅ－ＣＤ减弱表达与胃癌细胞分化差、浸润型生长及预后较差密切相关。

白黎芦醇对肝纤维化大鼠肝组织E-钙粘附素表达的干预作用

目的研究E-钙粘附素在不同肝纤维化阶段的表达情况以及在抗肝纤维化中药单体白黎芦醇干预下表达的变化。方法制备大鼠肝纤维化模型,分别给予小(40mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)和大剂量(200mg·kg-1)白黎芦醇处理,取肝组织检测E-钙粘附素、转化生长因子β(TGF-β)、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)1mRNA水平;采用放射免疫法检测血清HA和pcⅢ水平。结果正常组大鼠肝组织E-钙粘附素呈低水平(0.515±0.02)表达,而随着肝纤维化的进展,其水平增加,其中在12周时,肝组织E-钙粘附素mRNA水平(0.878±0.03)明显高于中剂量(0.755±0.24)和大剂量白黎芦醇处理组(0.763±0.21,P<0.01);在大鼠肝纤维化进展过程中,肝组织TIMP-1和TGF-βmRNA水平不断增加。结论E-钙粘附素在不同阶段肝纤维化大鼠肝组织均有表达,且随着纤维化程度的加重而表达增强。白黎芦醇可以明显改善大鼠肝纤维化程度,并减少E-钙粘附素mRNA水平。

嗜水气单胞菌J-1株粘附素及其受体分析

以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有甘露糖、胆固醇成分 ,有少量半乳糖成分 ,无葡萄糖成分。HEp 2细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,与其它非菌毛粘附素如S层及外膜蛋白相比 ,Ah 4型菌毛的粘附作用较为显著。抗 4型菌毛抗体抑制细菌的粘附力达 80 %以上。抗S层、外膜蛋白抗体也能使细菌的粘附力下降 ,表明Ah的粘附作用由菌毛粘附素与非菌毛粘附素共同参与。

上皮钙粘附素/连环素复合体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义

目的 :探讨上皮钙粘附素 /连环素 (E cd/cat)复合体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义。方法 :应用免疫组化SABC法检测 87例上皮性卵巢肿瘤中E cd、α 、β 、γ cat蛋白的表达情况。结果 :上皮性卵巢癌 (EOC)中E cd、α 、β 、γ cat的表达较卵巢交界性肿瘤及良性肿瘤明显减少 ;17例转移灶中各指标的表达较原发灶降低 ,但无统计学差异 ;E cd和各连环素的表达缺失或减少均与EOC的病理分级显著相关 ,但与临床分期无关 ;γ cat表达缺失或减少与腹水形成、腹腔广泛转移显著相关 ;联合检测复合体 ,部分或全部指标表达异常与临床分期、组织分化、有无腹水及腹腔广泛转移显著相关。结论 :E cd/cat复合体的表达异常与EOC的发生发展及转移密切相关 ,联合检测较单纯检测E cd更有助于评价EOC的生物学行为。

E-钙粘附素和基质金属蛋白酶的表达与胃癌侵袭、转移的关系

目的 探讨E -钙粘附素 (E -cadherin)和基质金属蛋白酶 - 2 (matrixmetalloporoteirnase - 2 ,MMP- 2 )在胃癌组织中的表达与胃癌浸润转移的相关性。方法 收集住院胃癌手术病例 83例 ,同时记录相关临床资料。 2 0例胃良性病变手术病例。采用S -P免疫组化染色 ,检测组织的E -cadherin和MMP - 2的表达情况 ,同时行HE染色对胃癌进行组织学分型。结果 正常胃黏膜E -cadherin呈强阳性表达 ,胃癌组织中E-cadherin表达率明显减低 ,阳性表达率为 16 .9% (14 / 83) ,E -cadherin表达减低与胃癌细胞分化差、浸润深度、弥漫性生长、淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ;而与TNM分期及肿瘤大小未见明显相关性。MMP - 2在正常胃黏膜中呈阴性表达 ,在胃癌组织中表达呈阳性 ,阳性率为 78.3% (6 5 / 83) ,MMP - 2表达强度与胃癌分化程度、淋巴结车瞄、浸润深度、弥漫性生长、TNM分期显著相关 (P <0 .0 5 ) ;而与肿瘤大小未见明显相关性。结论 E -cadherin的表达下调和MMP - 2表达上调将促进胃癌浸润和转移 ,二者在癌组织中表达的高低是胃癌细胞重要的恶性生物学特征 ,有助于对胃癌转移及病人预后的判断。

检测产肠毒素性大肠杆菌粘附素抗体间接ELISA的建立

为了评价仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41 四价亚单位疫苗的免疫效果,利用纯化粘附素为包被抗原,建立了检测产肠毒素性大肠杆菌粘附素抗体的间接ELISA。初步确定了各种反应条件: K88、K99、987P、F41粘附素抗原最适包被浓度依次为1∶400、1∶80、1∶40、1∶40,相应粘附素抗体最佳稀释度依次为1∶400、1∶200、1∶200、1∶200。经交叉试验、阻断试验和重复试验证实,本方法具有良好的特异性和重复性。

宫颈鳞癌组织中E-钙粘附素的表达

目的 :探讨宫颈鳞癌组织中E 钙粘附素 (E cad)的表达及其临床意义。方法 :应用SP免疫组化法观察1 2例正常宫颈上皮、4 6例宫颈鳞癌和 2 2例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)组织中E cad的表达。结果 :从正常宫颈→CIN→宫颈鳞癌组织 ,E cad阳性表达率分别为 1 0 0 % ,6 3.6 %和 2 8.2 % ,差异有统计学意义 (χ2 =4 1 .1 6 ,P <0 .0 1 )。宫颈鳞癌病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级E cad阳性表达率分别为 5 7.1 4 %、2 5 .0 0 %和 6 .2 5 % ,差异有统计学意义 (χ2 =1 0 .70 ,P <0 .0 5 ) ,无淋巴结转移者阳性率 30 .77% ,高于有淋巴结转移者的 1 8.1 8% (χ2 =1 3.33,P <0 .0 0 1 ) ,临床Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率之间差异无统计学意义 (χ2 =1 .74 8,P >0 .0 5 )。结论 :E cad在宫颈鳞癌的发生发展过程中发挥了重要作用 ,有望成为判断宫颈鳞癌恶性程度。