产纤溶酶菌株粪肠球菌EF608液体发酵工艺优化研究

以本实验室筛选到产纤溶酶的粪肠球菌EF608为发酵菌株,通过研究得到该菌株产纤溶酶的最佳工艺条件为:葡萄糖2%,蛋白胨0.75%,牛肉膏0.75%,酵母提取物0.5%,K2HPO4·3H2O1%,NaCl0.2%,MgSO4·7H2O0.02%,初始pH7.5,接种量为6%,装液量为15%,37℃培养10h,发酵液纤溶酶活性达到1833IU/mL。

氯己定对粪肠球菌耐药性和致病性的影响及其机制

目的:探讨长期使用氯己定对粪肠球菌(E.faecalis)耐药性的影响,并阐明其作用机制。方法:将E.faecalis标准菌株反复暴露于氯己定中传代10代,记录每一次传代时的最低抑菌浓度(MIC)值。收集第10代且MIC值增加的细菌,即为E.faecalis氯己定耐药菌株(E.faecalis-Cs)。绘制2种菌株生长曲线,透射电子显微镜观察2种菌株形态表现,结晶紫染色法检测2种菌株细菌生物膜形成量,微生物黏着碳氢化合物(MATH)法检测2种菌株细菌疏水率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2种菌株细菌生物膜中S-核糖基高半胱氨酸裂解酶(LuxS)mRNA表达水平。结果:随着传代次数(第0~10代)的增加,E.faecalis的MIC值逐渐升高。E.faecalis和E.faecalis-Cs的生长曲线无明显差异。透射电镜,E.faecalis和E.faecalis-Cs均呈椭圆形或双球型,细胞壁结构完整,边缘光滑,细胞质分布均匀,2种细菌形态大小和细胞壁厚度及完整性方面无明显差异。结晶紫染色法,与E.faecalis比较,E.faecalis-Cs生物膜形成量明显增加(P<0.05)。MATH法,与E.faecalis比较,E.faecalis-Cs的细菌疏水率明显升高(P<0.05)。RT-qPCR法,与E.faecalis比较,E.faecalis-Cs细菌生物膜中LuxS mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:E.faecalis在反复暴露于氯己定后会产生耐药性,耐药菌株致病能力增强。群体感应(QS)系统LuxS基因高表达和更强的细菌生物膜形成能力可能是E.faecalis对氯己定产生耐药性的潜在机制。

粪肠球菌EF608饲喂小鼠的安全性研究

目的研究本实验室发现的新型菌株——粪肠球菌EF608(Enterococcus faecalis EF608)的安全性,为进一步开发提供实验依据。方法经腹腔注射和口腔灌胃两种途径给小鼠粪肠球菌EF608菌株,试验其安全性。结果灌胃组与腹腔注射组,小鼠均健康存活,体重均有增加;小鼠脏器无明显变化,脏器系数与各自对照组比较均无显著差异(P>0.05)。结论粪肠球菌EF608菌株对小鼠安全无毒。

7株具益生性能粪肠球菌的性能评价

研究通过对7株粪肠球菌的生长特性、产乳酸能力、耐受人工胃肠液能力、耐胆盐性能及抑制病原菌能力测定,进而综合评价其益生效果,并获得1株益生效果较好的粪肠球菌HEW-A223:它生长周期短、延滞期短且产酸能力强;人工胃肠液耐受性较好,耐胆盐性强;并且能够抑制致病型大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌的生长等优良特性,为实际生产时选用菌种提供可靠依据。

282株肠球菌的分布及耐药性分析

目的了解临床感染肠球菌的分布及耐药特点。方法用VITEK60微生物鉴定和药敏分析系统对从临床标本中分离的282株肠球菌进行鉴定和药敏试验,用头孢硝噻吩检测菌株的β内酰胺酶。结果282株肠球菌中,屎肠球菌占422%,粪肠球菌占390%,其他肠球菌占188%;分离率较高的标本依次为尿液、痰液、粪便和胆汁,分别占387%、170%、156%和128%;肠球菌对抗菌药物的耐药性存在明显的种间差异,屎肠球菌和酪黄肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌和鸟肠球菌;共检出β内酰胺酶阳性株2株,占07%,万古霉素中介和耐药菌株各占35%和39%,且905%的菌株分离自胆汁和大便标本。结论肠球菌可引起临床各类感染,多重耐药肠球菌分离率及万古霉素敏感性降低菌株不断出现,应引起临床重视。

340株肠球菌耐药性分析及基因分型

目的调查340株肠球菌的耐药性及其基因分型,了解医院感染的流行菌株。方法从痰、尿、血液中分离出不重复粪肠球菌340株,根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,并进行统计分析;采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术构建指纹图谱进行基因分型。结果粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素、氨苄青霉素、万古霉素、高浓度庆大霉素的耐药率分别为18%、90%;14%、87.5%;1.3%、2.5%;51%、57.5%。300株粪肠球菌和40株屎肠球菌分别分为64个基因型和9个基因型,具有相同指纹图谱的菌株有5个组11株菌。结论肠球菌对多种抗菌药物具有较强耐药性;RAPD技术可用于肠球菌医院感染的分型研究,监测有无流行株在医院内暴发流行。

粪肠球菌抗噬菌体菌株的筛选

本实验通过次级感染，诱使粪肠球菌EF-31自发突变的方法筛选25株耐噬菌体的抗性菌株。通过对25株噬菌体耐性菌株的传代稳定性、噬菌体抗性、测定，最终获得3株具有稳定的噬菌体抗性及良好的发酵性能的噬菌体抗性菌株，分别是EF-31-17、EF-31—7、EF-31—14。这3株抗性菌株连续传代10次，仍能在感染噬菌体的培养基中正常生长；噬菌体抗性EOP值均〈1．0×10^-8：生长特性、产酸性能亦优于原始菌株。发酵生产受噬菌体污染时提供了后备替换菌种资源。

鉴定肠球菌的一种快速方法

目前实验室都沿用常规培养的方法鉴定肠球菌,需要18～48小时才能完成。我们依照Hussain法,建立了一种快速鉴定肠球菌的氯化钠-七叶苷水解试验,2～4小时可出现阳性结果。现报告如下。材料与方法一、试验溶液七叶苷2g,枸橼酸铁0.5g,氯化钠50g,K2HPO4 0.4g,KH2PO0.1g,蒸馏水1000ml,调pH至5.6±0.2。每一试管（12×75mm）分装0.5ml, 4℃保存备用。二、试验菌 1.标准菌株: 肠球菌（粪链球菌）1株(代号32221-

抗鸡白痢益生菌株的筛选

利用从健康蛋鸡和肉鸡肠道内分离的菌株以及本实验室保存菌 ,在体外分别与鸡白痢沙门菌强毒株作用 4 8h后 ,以涂片染色镜检法和菌落计数法筛选出对鸡白痢沙门菌有抑制作用的 5株细菌 ,即鸡粪肠球菌、鸡非致病性大肠埃希菌、环状芽胞杆菌、酵母菌和乳酸菌 ,抑制率分别为 97 8%、99%、99 9%、98 2 %和 78%。

不同复合乳酸菌组合菌株对全株玉米青贮品质的影响

本试验研究二次发酵菌、植物乳杆菌和粪肠球菌3个菌种组合体对青贮发酵的作用。采用单因素试验设计，共计3个处理，每个处理15个重复，各处理为：

小鼠胃肠道中乙醛降解菌的分离·鉴定及乙醛降解特性的测定

[目的]从小鼠胃肠道分离并鉴定乙醛降解菌,测定其乙醛降解率。[方法]以C57小鼠为实验动物,分别采集小鼠胃、小肠及结肠内容物,分离可培养的菌株,然后在培养基中加入乙醛,筛选乙醛耐受菌并测定其乙醛耐受能力,采用间苯二酚法测定乙醛降解能力,最后通过16S r RNA测序鉴定乙醛降解菌。[结果]从小鼠胃、小肠及结肠中分别筛选出一株能够降解乙醛的菌株,分别命名为TXZ-1、TXZ-2、TXZ-3。鉴定结果显示,这3株菌都属于粪肠球菌(Enterococcus faecalis),相似度达到99%,这些菌株的乙醛耐受能力和降解能力各不相同,其中TXZ-3的耐受和降解能力最强,耐受能力达到1.6 g/L。乙醛的最适降解条件为:接种量2.0%,乙醛浓度1.0 g/L,培养温度35℃,pH 7.0,摇床转速160 r/min,培养时间24 h,乙醛降解率达到(93.6±4.9)%。[结论]从小鼠胃肠道中筛选出高效快速降解乙醛的菌株TXZ-3,为研究乙醛污染的生物治理及人体中乙醛的清除提供了新思路。

屎肠球菌与粪肠球菌的分布及耐药性分析

目的了解临床分离的屎肠球菌与粪肠球菌的分布及耐药性,为临床治疗提供依据,以提高疗效。方法用WalkAway自动化微生物仪PC20检测板进行菌株鉴定和药敏试验,应用Whonet 5.6软件统计粪肠球菌、屎肠球菌的分布和耐药率。结果 101株屎肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、氯霉素、利福平、链霉素(高浓度)、庆大霉素(高浓度)、四环素、左氧氟沙星、红霉素、环丙沙星、氨苄西林和青霉素的耐药率分别为0、1.0%、28.7%、46.5%、66.3%、75.2%、79.2%、85.0%、92.1%、94.1%、96.0%、96.0%和97.2%;81株粪肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、氨苄西林、青霉素、呋喃妥因、左氧氟沙星、环丙沙星、利福平、氯霉素、链霉素(高)、庆大霉素(高)、四环素和红霉素的耐药率分别为1.2%、1.2%、12.3%、13.6%、14.8%、37.0%、40.7%、52.0%、53.1%、59.3%、60.5%、80.2%和87.7%;屎肠球菌(47.5%)和粪肠球菌(31.7%)主要来源于尿液,其次来源于分泌物和痰液。结论临床已出现耐万古霉素和利奈唑胺的肠球菌,屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药率显著高于粪肠球菌,主要引起泌尿系感染。

泌尿系统感染的病原菌分布及耐药性分析

泌尿系统感染是临床最常见的感染性疾病之一,同时也是医院感染中最常见的感染性疾病。随着抗生素的广泛应用,细菌对常用抗生素的耐药性也逐年升高[1,2]。为了解本地区泌尿系统感染的病原菌的分布及耐药情况,对2015年我院临床尿培养的结果进行统计分析,报道如下。1材料与方法1.1实验菌株2015年1月至12月我院尿培养分离的所有病原菌。

肠球菌厌氧菌株感染导致犊牛腹泻的诊治报告

2016年3月上旬,山西省晋中市某奶牛场新生犊牛先后发病,症状主要为持续腹泻、白色水便,诊断为屎肠球菌和粪肠球菌厌氧菌株感染引起的肠炎,经治疗取得了良好的效果,现报道如下。