复合低温保护剂对粪菌液中活细菌的保护效果

冻存的供体粪菌液样品已在多项粪菌移植临床试验中使用,而添加低温保护剂有助于提高样品菌群的存活率和储存稳定性。为获得效果更好的保护剂配方,本文采用微生物培养结合16S rRNA测序技术,从活菌数、菌群多样性和组成等方面探究10%甘油(G)、5%海藻糖(T)以及10%甘油+5%海藻糖(GT)等3种保护剂组合对粪菌液样品细菌活力的保护能力。结果表明,经过-80℃冻存2个月,添加保护剂后细菌的存活率(11.27%~87.25%)均高于不加保护剂的(5.20%),且GT组的活细菌数最高;其次,添加保护剂后菌群多样性与冻存前无显著差异,且GT组中检测到的扩增序列变体(amplicon sequence variants,ASVs)数目与冻存前最接近;而冻存前后的菌群结构虽有显著差异,但GT组的菌群组成结构与冻存前相似,优势菌属Bifidobacterium、Escherichia/Shigella、Klebsiella的丰度与新鲜组无显著差异,同时GT组还提高了Streptococcus以及短链脂肪酸产生菌Bacteroides、Blautia和Faecalibacterium等的相对丰度,保护的细菌类型相比单一保护剂更广。综上,由甘油和海藻糖组成的复合保护剂能更好地保持粪菌液中细菌的活性,具有应用潜力。

小鼠肠道Faecalibacterium prausnitzii菌与2型糖尿病的相关性研究

目的以2型糖尿病模型db/db小鼠为研究对象,探讨二甲双胍及粪菌移植技术对其肠微生物Faecalibacterium prausnitzii(F.prausnitzii)菌的影响。方法将db/m作为正常对照组,db/db小鼠分为db/db模型组、db/db+二甲双胍(db/db+Met)组和db/db+哈萨克族正常糖耐量人粪菌液组(db/db+kngt)组。采用16Sr DNA-PCR技术检测各组小鼠粪样中F.prausnitzii菌水平,分析F.prausnitzii菌水平与2型糖尿病相关表型的相关性。结果(1)与db/m正常对照组相比,db/db模型组粪样中F.prausnitzi菌水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);二甲双胍干预后可明显升高小鼠粪样中F.prausnitzi菌的水平,差异具有统计学意义(P<0.05);db/db+kngt组中F.prausnitzi水平有所升高,差异无统计学意义。(2)小鼠粪样中F.prausnitzii菌水平与小鼠FBG、TC、TG呈明显负相关(r=-0.812,r=-0.761,r=-0.707)。结论肠道F.prausnitzii菌水平与2型糖尿病的发生与改善密切相关。

肥胖犬粪便菌群移植对犬体况指数、血脂指标及肠道菌群的影响

为了研究粪便菌群对犬肥胖的影响机制,试验将20只犬均分为4组,分别为对照组(HCG组)、高压灭菌粪菌液组(HCS组)、粪菌液组(OCS组)和粪菌液+丁酸梭菌组(OCS+CBS组),所有动物采用广谱抗生素处理以构建肠道无菌模型,测定体况指标和血脂水平,并进行肠道菌群16S rDNA测序。结果表明:与HCG组、HCS组和OCS+CBG组比较,OCS组终末体重和BCS评分以及血中TG、CHO和LDL-C水平显著升高(P<0.05);OCS组肠道菌群α多样性降低;厚壁菌门、变形菌门相对丰度增加,拟杆菌门相对丰度减少;在属水平上,罗斯氏菌属、瘤胃球菌属和韦荣球菌属等丰度增加,乳杆菌属、双歧杆菌属和阿克曼氏菌属等丰度减少;OCS组肠道菌群编码的基因参与碳水化合物代谢、脂类代谢、能量代谢等多种代谢过程增强(P<0.05);Lee’s指数、LDL-C、TG、CHO与瘤胃球菌属、优杆菌属、韦荣球菌属和长奈瑟氏菌属等呈正相关,与阿克曼氏菌属、乳杆菌属和双歧杆菌属呈负相关。说明移植肥胖犬粪菌液可以改变犬肠道菌群结构与功能,提高血中脂肪水平,促进肥胖的发生发展,而丁酸梭菌可扭转这一现象。

采用粪菌治疗仔猪腹泻的研究

为研究粪菌对仔猪腹泻的治疗效果,试验分5个阶段(1~6日龄、7~10日龄、11~20日龄、21~28日龄、29~45日龄)进行,每个阶段将72头腹泻仔猪分为3组,每组24头,1组采用恩诺沙星注射液按照说明书进行连续3 d的治疗,2,3组采用灌喂不同剂量的粪菌液治疗,上午、下午各灌喂1次,连续灌喂3 d,统计各组仔猪3 d内的治愈率,对未治愈的仔猪不再灌喂;继续观察至第5天,统计5 d内的治愈率。结果表明:按照腹泻仔猪不同生长阶段灌喂不同剂量的粪菌液,即1~6日龄腹泻仔猪灌喂10 mL,7~10日龄腹泻仔猪灌喂20 mL,11~20日龄腹泻仔猪灌喂30 mL,21日龄以上的腹泻仔猪灌喂50 mL,3 d内治愈率达91%以上,5 d内治愈率达95%以上。说明采用粪菌能够有效治疗仔猪腹泻。