肝素和钙离子载体诱导波尔山羊精子体外获能和体外受精

运用肝素、钙离子载体(IA)协同咖啡因诱导波尔山羊精子体外获能,利用去透明带金黄地鼠卵穿透试验检测了精子的获能效果。结果发现:精卵孵育4h和6h时的穿透率均高于2h时的穿透率;肝素和钙离子载体对精子获能有明显的促进作用,与未添加组相比差异极显著(P<0.01);20mg/L和50mg/L的肝素剂量组,去透明带金黄地鼠卵穿透率为64.7%、68.4%;钙离子载体的添加剂量在0.3μmol/L时,穿透率达到68.2%;咖啡因与肝素、钙离子载体具有明显的协同作用。将获能的精子与山羊卵母细胞进行体外受精孵育17h,也获得了60%以上的受精率。

精子体外获能影响因素探析

阐述了精子体外获能的提出。

猪精子体外获能前后离子成分变化

应用扫描电镜和镜射电镜能谱技术,为猪精子获能前后质膜表面和内部的离子成分进行了研究,结果表明,猪精子获能后质膜表面的Na^+和Al^(3+)升高,而Cl^-和Ca^(2+)降低;精子顶体内Na^+和Cl^-降低,Ca^(2+)、K^+和Fe^(2+)升高;中段线粒体内的Na^+、Ca^(2+)和Fe^(2+)升高,而K^+和Cl^-降低。文章分析了精子获能后顶体内Na^+、Cl^-、K^+、Ca^(2+)和Fe^(2+)变化的浓度比和摩尔比。

奶山羊精子体外获能异体受精试验

关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试管绵羊”23只,“试管山羊”只有1只。 为了克服山羊体外受精的难点,Rao等将山羊输卵管卵母细胞输入事先经子宫输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,培养24～36h,有37.0％完成了异体受精。将这些受精卵移植给9只受体羊后,有1只正常分娩,获得了首例异体受精山羊羔。我们将超排羊输卵管卵母细胞移入事先经阴道输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,获得了44.8％的异体受精率。但迄今尚未证实,山羊体外获能的精子与超排卵母细胞在假孕兔输卵管内能否完成受精过程和产出正常后代。本试验旨在研究山羊体外获能的精子与超排的输卵管卵异体受精及受精卵移植后产羔的可能性。

家兔精子体外获能与体外受精试验

本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1～2h);B.HIS(15min)+DM(11～12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2～4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。

不同方法诱导西门塔尔公牛精子体外获能的研究

实验对西门塔尔牛精子体外获能培养基及方法的选择进行研究 .结果表明 :以 m B-ww为培养基 ,添加咖啡因 2 mmol/L,亚牛磺酸 70 μmol/L经 5 0 μg/ml肝素和 1 g/L透明质酸酶处理牛精子 。

猕猴精子优选及体外获能的研究

选择活率高的精子并进行体外获能是开展猕猴体外受精研究的必要程序 ,是研究猕猴受精生物学的重要手段。本实验采用上浮法和Percoll梯度离心法对猕猴精液进行了优选 ,并对处理后的精子形态正常率、精子活率、密度及受精率作了比较 ,发现二者差异不显著 ;用dbcAMP和咖啡因使精子获能 ,发现只有两种获能剂同时存在才能使猕猴精子获能并使卵母细胞受精。结论为 :上浮法和Percoll法都是有效的精子优选法 ,对受精率的影响差异不显著 ;

诱导牛精子体外获能方法的研究

用去透明带的金黄地鼠卵异种精子体外穿透试验,检测冻精复苏,经各种处理后的精子穿卵率,结果表明,B0培养基,经咖啡因2mmol/L,肝素50μg/ml处理,并添加亚牛磺酸70μmol/L和透明质酸酶1g/L,是诱导牛精子体外获能的有效方法。

二甲基亚砜对蓝狐精子活率和体外获能的影响

DMSO是一种有机溶剂,影响精子体外获能的孕酮、肝素、钙离子载体多溶于此溶剂,因此确定蓝狐精子最适合的DMSO浓度及其作用时间是十分必要的。试验将分离、优化的蓝狐精子置于BO液中,在38.5℃、5%CO2培养箱中进行获能培养,然后分别在6个浓度(0%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2.0%)的DMSO中和4个时间(15分钟、30分钟、60分钟、120分钟)进行考马斯亮蓝染色和伊红-苯胺黑染色,检测并统计精子顶体反应率、精子活率,利用SPSS11.0统计分析软件分析试验数据。试验结果显示:蓝狐精子在DMSO浓度为0.2%和120分钟时体外获能效果最好。

延边黄牛精子顶体反应3种检测方法的比较

试验以延边黄牛冷冻精子为材料，用肝素诱导精子体外获能后分别用考马斯亮蓝水溶液、考马斯亮蓝高氯、台盼兰-姬姆萨3种不同方法进行染色，并同时做延边黄牛卵母细胞穿卵试验，以求证精子顶体反应与体外受精率的相关性。

牛

S823.36 20022114影响牛精子体外获能的因素/李芬(陕西省安康天宝有限公司 725000),马云,赵春平//黄牛杂志.-2001,27(5).-51～53本文针对牛胚胎体外生产的关键技术环节体外受精,从温度、卵母细胞、公牛个体、培养液组成、渗透压及 pH