精子浓度在精子凋亡率及生精细胞脱落状态中的作用分析

目的探讨不同精子浓度精液的精子凋亡率及各级生精细胞的脱落状态。方法收集2022年8~12月来北京美中宜和北三环妇儿医院生殖男科就诊的861例不育症患者为研究对象。根据不同精子浓度分为两组:精子浓度≥15×10^(6)个/ml的为正常精子浓度组(n=775),精子浓度<15×10^(6)个/ml的为低精子浓度组(n=86)。采用计算机辅助精子分析(CASA)系统,比较两组精液的精子活动率;采用Diff-Quik染色法,比较两组患者正常形态精子百分率、精子凋亡率及各级生精细胞的脱落数量。结果与正常精子浓度组比较,低精子浓度组的精子活动率、正常形态精子率均显著降低,而精子凋亡率显著升高(P均<0.05);正常精子浓度组精液中生精细胞检出率显著低于低精子浓度组(52.90%vs.88.37%)(P<0.05),在计数200个精子范围内,正常精子浓度组共检出995个生精细胞,平均每例精液标本检出1.28个生精细胞;低精子浓度组共检出440个生精细胞,平均每例精液标本检出5.12个生精细胞,其检出数量为正常精子浓度组的4倍;两组间各级生精细胞的占比情况无显著性差异(P>0.05)。结论Diff-Quik染色可作为精子凋亡率和生精细胞分析的有效方法;低精子浓度患者行精液生精细胞和精子凋亡率检查,对进一步了解睾丸生精障碍程度及精子异常染色质状态有着重要价值,临床应给予重视,并积极开展。

不同年龄对精子凋亡率及DNA完整性影响的研究

目的:探讨不同年龄阶段精子凋亡率、精子DNA完整性及精液基本参数与年龄是否存在相关性。方法:随机选取在我科因女方因素行体外受精-胚胎移植男性精液标本104例,按男方年龄分为3组,年龄<35岁组43例、35～39岁组31例、≥40岁组30例,按WHO手册第4版手工分析精液常规参数,流式细胞术(FCM)结合FITC-Annexin V/PI荧光染色检测精子凋亡率,吖啶橙荧光染色检测精子DNA完整性。结果:①3组精液量[(2.87±0.89)ml vs(2.98±1.09)ml vs(2.65±0.95)ml]、精子浓度[(60.40±25.43)×106/ml vs(69.74±28.33)×106/ml vs(55.97±27.22)×106/ml]无显著性差异(P>0.05),≥40岁组前向运动精子百分率[(39.00±8.35)%]减少,与<35岁组[(48.72±9.89)%]和35～39岁组[(45.65±10.55)%]相比,差异有显著性(P<0.01);≥40岁组正常形态精子百分率[(11.11±8.26)%]与<35岁组[(16.43±8.75)%]相比,差异有显著性(P<0.01)。②精子凋亡在不同年龄组人群均有一定发生率,≥40岁组精子凋亡率为[(11.82±5.77)%],高于<35岁组[(7.04±3.50)%]和35～39岁组[(9.42±4.73)%],与<35岁组相比结果有统计学意义(P<0.01);≥40岁组DNA完整精子百分率降低[(75.52±10.60)%],与<35岁组[(86.55±5.60)%]和35～39岁组[(81.39±8.94)%]相比,差异有显著性(P<0.01);③男性年龄与精子凋亡百分率呈正相关(P<0.01),与前向运动精子、DNA完整精子百分率呈负相关(P<0.01)。结论:男性年龄增加可能导致前向运动精子百分率减少,正常形态精子百分率降低,精子凋亡百分率增加,DNA完整精子百分率性降低,在生育过程中,男性年龄应引起关注。

吸烟对重庆主城区成年男性精子凋亡及精液质量的影响

目的:探讨吸烟对重庆市主城区健康成年男性精子凋亡和精液质量的影响。方法:235例健康成年男性根据吸烟习惯分为吸烟组和不吸烟组。不吸烟组89例,吸烟组146例。采用计算机辅助精液分析系统检测精液常规参数;流式细胞术结合Annexin V-FITC/PI荧光染色检测精子凋亡(AN-/PI-、AN+/PI-、AN+/PI+、AN-/PI+精子比率),并对吸烟组和不吸烟组的各项参数进行比较研究。结果:与不吸烟组比较,吸烟组的早期凋亡精子(AN+/PI-)率高于不吸烟组[(8.1±5.1)%vs(6.8±3.8)%,P=0.039],而晚期凋亡精子(AN+/PI+)率两组间差异无显著性[(5.6±5.2)%vs(5.5±5.1)%,P=0.87];两组间精液量、精子密度、精子活动率、活力和正常形态精子率等精液常规指标的差异均无显著性(P=0.30;0.82;0.37;0.81;0.84)。结论:吸烟者早期精子凋亡率较不吸烟者高,提示吸烟可能诱导精子出现早期的细胞损害。精子凋亡可作为较精液常规指标更为敏感的生物标志物反映吸烟对男性精子造成的损伤。

不育男性生殖道沙眼衣原体、解脲支原体感染与精子凋亡关系

目的 :探讨不育男性生殖道沙眼衣原体 ( CT)、解脲支原体 ( UU)感染与精子凋亡的关系。方法 :采用流式细胞术 ( FCM)检测生殖道 UU、CT感染者和未感染者精子凋亡情况。结果 :CT、UU阳性和阴性组精子凋亡率 ( PAS)分别为 ( 1 4 .54± 3 .90 ) %、( 8.3 7± 6.3 0 ) %、( 1 5.2 6± 6.56) %、( 9.2 5± 4.0 3 ) % ,CT+UU双阳性精子凋亡率高达( 2 2 .2 1± 6.52 ) % ,各组与正常生育组比较 ,差异非常显著 ( P<0 .0 1 )。阳性组与相应阴性组比较差异显著 ( P<0 .0 5)。结论 :生殖道 UU、CT感染可明显增加精子凋亡 ,提示引起男性不育的诸多因素可能因精子细胞凋亡所致。

少精子症、弱精子症和畸形精子症患者精子凋亡率比较

目的:比较少精子症、弱精子症和畸形精子症患者精子凋亡率。方法:应用计算机辅助精液分析(CASA)对生育组(n=14)、不育组[(n=48),少精子症(精子密度<10×106·mL-1)11例、弱精子症(a+b级精子百分率<50%)25例、畸形精子症(形态正常精子百分率<14%)12例]进行精液参数检测,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果:不育组及不育组中的少精子症组精子凋亡率均明显高于生育组(P<0·05);弱、畸形精子症组精子凋亡率与生育组比较差异均无显著性(P>0·05)。密度异常组(精子密度<20×106·mL-1)精子凋亡率明显高于密度正常组(精子密度≥20×106·mL-1)(P<0·05);a+b级异常组(a+b<50%)精子凋亡率与正常组比较差异无显著性(P>0·05);精子形态异常组(形态正常精子<14%)凋亡率与正常组比较差异无显著性(P>0·05)。结论:不育组精子凋亡率高于生育组,尤其是少精子症患者精子凋亡率增加更明显。

不育症患者精子凋亡率与精浆活性氧水平检测及相关性分析

目的检测不育症患者精子凋亡率与精浆活性氧水平并分析其相关性。方法92例男性不育症患者,分为精索静脉曲张(VC)组(n=32)、白细胞精液症组(n=30)和其他原因组(n=30);另取24例成功进行体外授精精液样本作为对照组。采用计算机辅助精液分析系统行精液常规检测(精液pH值、精子密度和精子活力),Annexin V/PI染色法检测精子凋亡率,TBA法检测精浆活性氧水平。比较不育症各组与对照组各精液参数的差异,分析各组精子凋亡率与精浆活性氧水平的相关性。结果不育症各组精子活力显著低于对照组(P<0.01),VC组和白细胞精液症组精子凋亡率和精浆活性氧水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。白细胞精液症组精浆活性氧水平与精子凋亡率呈显著正相关(r=0.573,P<0.05)。结论精子凋亡率和精浆活性氧水平升高可能与VC患者和白细胞精液症患者不育相关,白细胞精液症患者活性氧水平升高可能是引起精子凋亡率升高的重要因素之一。

活性氧、白细胞和精子凋亡关系的探讨

目的探讨活性氧与精子凋亡的相关性及其影响。方法分析21例男性不育患者样本,活性氧含量采用分光光度比色法检测,瑞-姬染色检测精子凋亡率,采用Percoll法进行精子优选。结果本底水平活性氧含量、白细胞受激发后产生活性氧含量、白细胞和精子受激发后产生活性氧含量与精子凋亡率均有显著正相关性(P<0.05,P<0.01);Percoll优选后,加入H2O2组精子凋亡率显著高于对照组(P<0.001),且0.2mM过氧化氢组精子凋亡率均高于相应的0.02mM过氧化氢组(P<0.05)。结论精子凋亡率与ROS浓度有正相关关系,外加H2O2增高,精子凋亡率增高。

吸烟对男性精液质量、精浆活性氧及精子凋亡率的影响

目的探索吸烟影响精液质量的机制。方法 120例男性不育患者根据吸烟习惯和烟龄分为3组:A日吸烟量<10支,且烟龄≤1年;B日吸烟量10-20支,且烟龄5-10年;C日吸烟量≥20支,且烟龄≥10年。选用35例已生育正常健康男性作为对照。对其精液常规参数精浆MDA含量及精子凋亡率进行检测。结果不育吸烟组精子活力显著低于不育非吸烟组,精子凋亡率及精浆MDA含量显著增高;ABC三组比较,C组精子活力显著低于B组和A组,而精子凋亡率及精浆MDA含量显著增高。结论吸烟可以通过增加精浆活性氧含量及精子凋亡率,严重影响精液质量。

归芪五子方对睾丸损伤模型大鼠精子凋亡以及SOD和MDA与NOS水平的影响

目的观察归芪五子方对汽油尾气所致睾丸损伤模型大鼠精子凋亡率、睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。方法以气管滴定法复制汽油尾气睾丸损伤模型,并给予归芪五子方治疗,检测大鼠精子凋亡率及睾丸组织SOD、NOS、MDA水平。结果归芪五子方大剂量组精子凋亡率显著低于模型组(P<0.05);与模型组比较,归芪五子方大剂量组大鼠睾丸组织SOD水平显著升高,NOS、MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论归芪五子方对汽油尾气所致睾丸损伤模型大鼠精子凋亡有一定抑制作用,机制可能为减少大鼠睾丸组织内自由基生成,提高其抗自由基能力。

精子凋亡与精子密度、活力、形态关系探讨

目的探讨精子凋亡与精子密度、活力、形态关系。方法分析69例男性不育患者精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精液参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果精子凋亡率与精子密度之间没有显著相关性(P>0.05),精子凋亡率与精子活力、正常形态精子百分率之间有显著负相关性(P<0.01,P<0.05);活力异常组精子凋亡率高于活力正常组,两组比较差异有显著性(P<0.05);严格标准下,形态异常组精子凋亡率高于形态正常组,两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论精子凋亡率与精子活力和正常形态精子有相关性,精子凋亡率增加可能是弱精子症和畸形精子症患者不育的原因之一。

解脲支原体感染与精子凋亡

目的：对精液解脲支原体（ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，ＵＵ）培养阳性及阴性的男性精子进行凋亡率检测。方法：采用瑞－姬染色和ＴｄＴ介导的脱氧核苷酸原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）。结果：ＵＵ感染组精子凋亡率明显大于ＵＵ阴性组（Ｐ＜０．０１）。结论：ＵＵ感染可造成男性精子凋亡率升高，影响精子活率。

精子多环芳烃类-DNA加合物与精液质量及精子凋亡的关系研究

目的:通过对男性不育患者的精子多环芳烃类-DNA(PAH-DNA)加合物进行分析,探讨精子PAHDNA加合物水平与精子凋亡率及精液常规参数的相关性。方法:收集433例男性不育患者精液,采用免疫荧光结合流式细胞术检测PAH-DNA加合物,末端转移酶介导的dUTP标记法(TUNEL)检测精子凋亡率。结果:多元线性回归结果显示:精子PAH-DNA加合物水平与精子浓度、精子总数及精子活动率呈负相关(回归系数β分别为-0.632、-0.830和-9.647);此外,精子PAH-DNA加合物水平与精子凋亡率呈正相关(回归系数β为0.130)。结论:精子PAH-DNA加合物水平与精液常规参数及精子凋亡相关,精子PAH-DNA加合物水平对评估男性生育力具有重要意义。

过敏康Ⅱ号胶囊对AsAb阳性大鼠附睾精子凋亡率的影响

[目的]研究过敏康Ⅱ号胶囊对AsAb阳性大鼠附睾精子凋亡的影响。[方法]以SD大鼠同种精子制备抗原,主动免疫法建立AsAb阳性大鼠模型,TUNEL法观察过敏康Ⅱ号胶囊给药对实验动物附睾精子凋亡率的影响。[结果]过敏康Ⅱ号胶囊可降低AsAb阳性大鼠附睾精子凋亡率。[结论]过敏康Ⅱ号胶囊对AsAb阳性大鼠具有治疗作用,其作用与过敏康Ⅱ号胶囊能降低AsAb阳性大鼠附睾精子凋亡率密切相关。

精子凋亡形态分类与分子机制探讨

目的介绍精子凋亡的形态分类特征，进行分子生物学机制分析，探讨男性不育症的病因。方法以精液标本进行TUNEL法和瑞-姬染色法，在油镜下观察凋亡精子拍摄图像，确认凋亡精予和介绍两法染色凋亡精子特征。结果TUNEL法和瑞-姬染色法图像48幅，分别进行形态描述。并进行分子生物学机制探讨。提供凋亡精子的参考范围。结论睾九细胞凋亡可发生在支持细胞、生精上皮中的生精细胞，也可以发生在精子的幼稚期和成熟期。为此，在精液中进行精子形态学分类，应检测凋亡精子的比率，对男性不育症鉴别和判断有临床意义。

性控分离精子凋亡程度对牛体外受精的影响

采用Annexin-V、JC-1和TUNEL对A、B、C、D 4头种公牛性控X冻精进行了凋亡分析,并对凋亡分析结果与性控精液体外受精卵裂率和囊胚率的关系进行了相关分析。结果表明:(1)公牛A的活精子(AN-·PI-)百分率(89.30%±3.04%)高于其他公牛((74.39%±3.24%)^(81.17%±4.25%)),差异显著(P<0.05),而其DNA片段化精子百分率(12.24%±1.25%)低于其他公牛((19.09%±1.27%)^(27.56%±3.17%)),差异显著(P<0.05);(2)公牛A的X冻精体外受精(IVF)卵裂率、囊胚率((76.82%±3.00%)^(20.45%±1.44%))均高于其他3头公牛((22.00%±6.85%)^(31.88%±6.69%)),(3.33%±2.67%)^(4.00%±3.26%)),差异显著(P<0.05);(3)活精子百分率与其IVF卵裂率和囊胚率呈正相关,而DNA片段化百分率与之呈负相关。综上表明:Annexin-V分析能够准确地预测牛X性控冻精的体外受精效率,这对于促进牛性控体外胚胎的生产效率有着重要意义。

聚精助育抗免汤对精浆AsAb阳性患者精子凋亡率的影响

目的:研究聚精助育抗免汤对精浆AsAb阳性患者精子凋亡率的影响。方法:选择26例患者,予聚精助育抗免汤治疗,3个月为1个疗程,每月复查精液常规参数、精浆AsAb转阴率及精子凋亡率。结果:治愈11例(45.8%),显效7例(29.2%),有效5例(20.8%),无效1例(4.1%),总有效率为95.8%;精浆AsAb转阴率75%;治疗前后精子密度、精子活率、A级精子百分比、A+B级精子百分比比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前精子平均凋亡率为(16.49±5.70)%,治疗后为(11.23±5.64)%,治疗前后比较,差异有统计学意义(P=0.001<0.05)。结论:聚精助育抗免汤治疗免疫性不育症疗效显著,可降低精子凋亡率。

睾丸转染miR-383对KM小鼠精子凋亡的影响

目的探讨睾丸转染miRNA-383对健康可育雄性KM小鼠精子凋亡与繁殖力的影响。方法睾丸局部转染mimic miRNA-383和inhibitor miRNA-383分别获得高表达和抑制表达miRNA-383的个体,随机分为miRNA-383过表达组、miRNA-383抑制组、转染对照组、空白对照组四组。通过对转染效果、精子凋亡率、产子数和睾丸病理切片的检测来观察miRNA-383对小鼠精子凋亡和繁殖力的影响。同时对转染过程中雄鼠生活状态、体重、脏器指数、部分器官病理组织和血液生化指标进行监测,了解该操作对雄鼠机体的影响。结果成功获得在睾丸中高表达和抑制表达miRNA-383小鼠。miRNA-383过表达组精子凋亡率显著低于转染对照组(P<0.05),产子数有高于转染对照组的趋势,睾丸和肾上腺观察到一定异常,第8d和9d校正后平均体重比转染对照组显著下降(P<0.05);miRNA-383抑制表达组精子凋亡率显著高于转染对照(P<0.05),产子数对于转染对照组有下降趋势,睾丸、肺脏和肾脏观察到一定异常。结论健康可育雄性小鼠睾丸内miRNA-383表达量增加能显著降低精子凋亡率,反之则增加。miRNA-383可能对雄鼠繁殖力起重要的正调控作用,通过睾丸转染有望对雄鼠繁殖力进行人为干预。