不孕不育症患者精子双链DNA的检测

目的探讨不孕不育症与精子双链DNA的关系。方法采用吖啶橙染色法,染成绿色的是双链DNA。结果对照组120人,其中双链DNA>66%,120例,占100.0%(120/120)。检测组:不孕组840例,其中双链DNA>66%,830例,占98.81%(830/840);双链DNA50±10%;4例,占0.48%(4/840);双链DNA40±10%,3例,占0.36%(3/840);双链DNA30±10%,2例,占0.24%(2/840));双链DNA20±10%,1例,占0.11%(1/840);流产组560例,其中双链DNA>66%,557例,占99.46%(557/560);双链DNA40±10%,1例,占0.18%(1/560);双链DNA30±10%,1例,占0.18%(1/560);双链DNA20±10%,1例,占0.18%(1/560)。对照组(双链DNA)与检测组相比,呈显著性差异(P<0.01)。结论精子双链DNA与不孕(育)症两者相比,呈显著负相关(P<0.01),精子双链DNA降低是引起不孕(育)原因之一。

精子双链DNA断裂在男性生殖健康检测中的意义

为了解精子DNA损伤在男性生殖健康中的意义，对421名男性的精子用计算机辅助分析系统常规检测后做单细胞凝胶电泳试验(SCGE)，根据精子细胞核DNA损伤程度分为5级。结果表明，精子密度的不同，彗星样细胞发生率有明显的改变，当密度＜20×10^6／m1时，彗星样细胞发生率特别是Ⅱ级、Ⅲ级显著升高；在不动的d级精子中，Ⅰ级彗星样细胞发生率占5．39％，Ⅱ、Ⅲ级彗星样细胞发生率显著升高，与a级精子相比差异有显著意义(P＜0．05)。结论：SCGE试验检测精子DNA链断裂可评价格子的质量和损伤，是男性生殖健康评估的又一较为可靠的检测手段。

精子双链DNA与习惯性流产相关性研究

目的:探讨精子双链DNA(dsDNA)与习惯性流产(RA)的相关性。方法:109例其妻子发生不明原因的自然流产≥3次的男性(研究组),平均年龄28.7±0.1岁;60例为妻子正常生育的健康男性志愿者(对照组),平均年龄26.7±0.2岁。采用吖啶橙染色法在倒置荧光显微镜下计算精子双链DNA百分率。结果:研究组中双链DNA≥66%有87例(79.82%);55±10%有6例(5.50%);45±10%有12例(11.00%);35±10%有2例(1.83%);<25%有2例(1.83%);对照组:60例,均为双链DNA≥66%者;经χ2检验研究组精子双链DNA百分率较对照组明显降低,具统计学差异(P<0.01);经Pearson相关系数分析精子双链DNA百分率与习惯性流产发生次数呈明显负相关性(r=-0.510,P<0.01)。结论:精子双链DNA降低可能与配偶习惯性流产的发生具有相关性。

精子DNA单双链损伤与精子浓度的关系研究

目的:研究男性不育患者精子浓度与精子DNA单双链损伤的关系,探讨少精症的发生机制。方法:研究对象为120例男性不育患者,年龄25~40岁之间,根据世界卫生标准进行精液常规检测分析精子的浓度、活力等,利用双尾彗星试验分析精子DNA单双链损伤指数。结果:120例男性不育患者根据精子浓度分为三个研究组,即组1(精子浓度<10×10~6m L^(-1))、组2(精子浓度<20×10~6m L^(-1))和组3(精子浓度>20×10~6m L^(-1)),每组40例。三组之间年龄、精子活力及精子畸形率没有统计学差异;组1精子DNA损伤指数(DFI)为(59.48±15.21)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(25.86±11.86)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(43.31±13.72)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(31.93±10.21)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(53.85±10.27)%;组2精子DNA损伤指数(DFI)为(34.02±1.77)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(26.71±3.45)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(78.59±9.78)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(8.37±3.04)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(21.40±9.79)%;组3精子DNA损伤指数(DFI)为(20.77±2.43)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(20.44±2.39)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(98.44±2.87)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(1.32±0.61)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(1.55±2.87)%。三组间SSB-DFI无显著差异(P>0.05),SSB-DFI/DFI在组1、组2和组3间随精子浓度升高而逐渐升高(P<0.05),DSB-DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P<0.05),DSB-DFI/DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P<0.05)。精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与其他精液常规参数均无相关关系(P>0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度呈负相关(P<0.05)。结论:精子DSB-DFI和DSB-DFI/DFI水平越高,精子浓度就越低,精子DNA双链损伤可能是精子浓度低的真正原因。

不育患者精子DNA链损伤类型的研究及临床意义

目的:观察精子DNA单、双链损伤(SSB、DSB)在男性不育中的特征,探讨DSB与男性不育的关系,为男性不育的诊疗提供新的观察指标与思路。方法:选择男性不育患者60例以及同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性30例作为对照组,分析两组精子DNA损伤及精液主要参数的差异。精子浓度及活力采用计算机辅助精子分析系统,精子存活率分析采用低渗膨胀试验,精子形态采用Diff-Quik染色法,精子DNA损伤采用双尾彗星实验。结果:双尾彗星实验检测精子DNA完整性共有9种彗星模型。不育患者精子DNA损伤指数(DFI)为(33.8±13.1)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(19.2±11.4)%、SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(56.8±32.4)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(23.9±13.4)%、DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(70.8±19.5)%;与对照组比较[分别为(16.3±7.9)%、(14.9±7.6)%、(91.4±27.8)%、(6.1±2.7)%、(37.4±11.3)%)],SSB-DFI无显著性差异(P>0.05),DSB-DFI、DFI和DSB-DFI/DFI显著高于对照组(P均<0.01),SSB-DFI/DFI显著降低于对照组(P<0.01)。绘制ROC曲线,DSB-DFI/DFI、DSB-DFI及DFI诊断男性不育最佳截断值分别为39.5%、15.85%和18.65%,ROCAUC、敏感度和特异性分别为(0.969,98.3%,90.0%)、(0.912,86.7%,80.0%)、(0.861,90.0%,70.0%)。不育组精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与精液常规参数均无相关关系(P均>0.05),DFI与前向运动精子百分率、精子存活率及正常形态精子百分率呈负相关(P<0.05或P<0.01),与精子浓度无相关关系(P>0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率及正常形态精子百分率均呈负相关(P<0.05或P<0.01)。结论:影响男性不育的DAN损伤因素可能是DSB,而与SSB相关性不大,精子DNA链的损伤类型对男性生殖能力的评估有较大的参考价值。