睾丸生精小管干细胞移植受体模型建立与移植技术改进

目的:探讨建立稳定的、适合干细胞睾丸生精小管移植的受体小鼠模型和移植技术改进。方法:将雄性ICR小鼠60只随机分为A、B、C、D4组,每组15只。A、B、C组注射白消安的剂量分别为15、30、40mg/kg体重,D组注射50%二甲亚砜作为对照。注射后常规饲养,观察小鼠死亡情况。于注射后4、8、12周称量各组小鼠的睾丸重量,制作睾丸石蜡切片,观察生精小管的中空率和生精上皮结构变化。自主设计干细胞移植装置,改进干细胞移植技术。该装置通过三通连接装置将口含端、注射器端及穿刺端连接在一起,口含端负责试探性的注射,注射器端负责抽吸细胞悬液和注射。结果:注射后只有C组出现1只小鼠死亡。4周时A、B、C组睾丸重量的变化,与作为对照的D组相比有显著性差异(P<0.05);8周时A组与D组无差异(P>0.05),而B、C组与D组差异仍有显著性(P<0.05);12周时各组与D组均无显著性差异(P>0.05)。4、8周时A组的生精小管中空率<50%,B、C组中空率都在50%以上,而D组无明显改变;12周时A、B、C组无显著性差异(P>0.05),恢复近正常状态。自主设计的三通式注射装置注射成功率高,可达90%以上;细胞浪费少,注射双侧睾丸所需细胞悬液量<50μl;所需时间短,注射一侧睾丸<10min。结论:雄性ICR小鼠腹腔内单次注射30mg/kg体重白消安,无小鼠死亡,且4周后生精小管的中空率高(均>50%),适合作为干细胞移植的模型。改进后的移植装置和方法,提高了移植的效率和成功率。为探讨干细胞向雄性配子发育研究提供了简单易学、适于推广的新技术。