精子染色质结构分析法(SCSA)的临床应用研究

目的通过两种检测DNA碎片的方法结果的比较,评价精子SCSA法的临床应用价值。方法收集生殖中心门诊94例男性患者精液标本,分别采用精子DNA碎片染色质结构分析法(SCSA)和改良精子染色质扩散法(SCD)两种方法检测DNA碎片指数。按精子DFI指数分为3组(≤15%DFI、>15~≤30%DFI和>30%DFI),分别比较两种方法的检测结果差异。结果SCSA法与SCD法的检测结果具有明显的正相关性(r=0.758,P<0.001)。在≤15%DFI和>30%DFI两组中,其结果无显著差异,而在>15~≤30%DFI组中,SCSA法检测的结果(20.23±3.90)明显高于SCD法检测的结果(16.96±7.82),差异具有统计学意义(P<0.01)结论 SCSA法和SCD法具有较好的一致性,与SCD法相比,SCSA法稳定、快速、灵敏度高,重复性好,更适用于临床门诊检测。

雷达作业人员精子染色质结构分析

目的 :评价雷达辐射对作业人员精子DNA的损伤。 方法 :对高暴露组 (n =88)、低暴露组 (n =14 3)、对照组 (n =39)进行精液常规分析和精子染色质结构分析 (SCSA)。 结果 :高暴露组较低暴露组、对照组精子活力和存活率下降 ,畸形精子率增加 ;高暴露组主群以外细胞数值 (COMPα)较低暴露组、对照组升高 ,且其具有中生育力潜能。变量的多因素分析表明 ,日工作时间为畸形精子率的危险因素 ,禁欲时间为SCSA参数SDαt、COMPα的危险因素。 结论 :雷达辐射对男性生殖系统有不良影响 ,采取防护措施很重要。

精子染色质结构分析预测夫精宫腔内人工授精结局的临床研究

目的:分析精子DNA损伤与宫腔内人工授精(intrauterine insemination,IUI)妊娠率的关系。方法:482例行IUI治疗的患者,常规精液分析,并采用精子染色质结构分析法(SCSA)计算DNA碎片指数(DNA frag-mentation index,DFI),观察DFI与IUI妊娠率的关系。结果:482例患者中DFI>25%的患者为95例,5例临床妊娠,妊娠率为5.26%;DFI≤25%的患者为387例,59例临床妊娠,妊娠率为15.25%。DFI>25%的患者,其生化妊娠率和临床妊娠率只有DFI≤25%的患者的0.37(95%CI:0.14～0.96)和0.38(95%CI:0.16～0.97)倍。54例患者前后2个周期DFI值分别为(15.05±7.98)%与(17.25±12.18)%,差异无统计学意义(P>0.05)。精子DFI与精子浓度、精子活力、前向运动精子总数呈显著负相关(P<0.01)。结论:SCSA检测的DFI参数是较稳定的指标,DFI和精子浓度、精子活力具有一定相关性。DFI>25%的患者IUI妊娠率明显低于DFI≤25%的患者。SCSA检测的DFI参数是一种较为理想的预测IUI临床妊娠率的指标。

精子染色质结构分析和染色质扩散试验检测精子DNA碎片的比较研究

目的：探讨精子染色质结构分析（SCSA）和染色质扩散试验（SCD）对精子DNA碎片检测方法的比较及相关性分析。方法：本研究对134例男性不育症患者分别用SCSA和SCD方法进行精子DNA碎片检测，分析两种方法检测结果的相关性。将DNA碎片指数（DFI）分成3个等级组别（≤15％DFI、〉15～≤30％DFI和〉30％DFI），分别比较两种方法检测的结果差异。结果：SCSA方法与SCD方法对精子DNA碎片的分析结果具有明显的线性正相关性（r=0．915，P〈0．0001）。在〉15～≤30％DFI和〉30％DFI两组中．其两种方法分析结果无显著差异。而在≤15％DFI组中，采用SCD方法检测的DFI结果（13．50±4．82）明显高于SCSA方法检测结果（9．79±2．60）（P〈0．001）。结论：SCSA和SCD两种方法检测DNA碎片结果有较好的相关性。在D兀≤15％时。SCD检测结果明显高于SCSA检测结果。

精子染色质结构分析及在生育力评价中的应用

精子染色质结构分析(SCSA)利用吖啶橙的异染性与专用软件计算机界面的流式细胞仪相结合,快速识别带有不正常染色质结构的精子。SCSA参数在预测体外受精(IVF)卵胞浆内精子注射(ICSI)等辅助生殖技术的成败,比较密度梯度离心法、上游法、玻璃毛过滤及冷冻保存对精子DNA完整性的影响以及癌症患者治疗前、后生殖功能的评价方面发挥重要作用。

精索静脉曲张患者精子染色质结构分析及活力测定

目的探讨精索静脉曲张对精子染色质结构及运动能力的影响。方法对精索静脉曲组(n=74)和对照组(n=89)进行精子染色质结构分析(SCSA)和精液常规分析。结果与对照组相比精子密度、a+b级精子率和精子存活率显著下降,运动速度(vcl、vsl、vap)明显减慢且摆动性(mad)显著增加,精子染色质结构分析compαt值明显增高。结论精索静脉曲张引起精子DNA损伤和精子运动能力的改变,是导致男性不育的主要原因之一。

精子染色质结构分析与精液常规分析中各参数间的相关性研究

目的：研究精子染色质结构分析(SCSA)与精液常规分析参数的相关性，探讨评估精液质量的可靠方法；方法：将流式细胞术染色质结构分析结果(COMPat)与精液常规分析结果进行多参数的相关性分析；结果：检测了511份标本。与变性精子百分数(COMPat)呈低、中度正或负相关的参数有：d级精子率、平均移动角度、a级精子率、曲线速度、直线速度、平均路径速度、本次射精间隔时间、黏度、精子存活率、精子畸形率、精子密度和活力。与精子密度和活力的相关性主要来自于不活动精子(d级)；结论：流式细胞分析仪能简单、快速、准确地评估损伤和变性精子的百分数，其结果(COMPat)与精液参数部分相关。并不是完全独立于常规精液检查的指标。当精子密度和活力正常或顶体完整率差时其参数与CONPat无关，具有独立性，此时应用SCSA评估生育力具有重要意义。

精子碎片实验室检测与临床应用专家共识——基于流式细胞精子染色质结构分析

在过去的几十年里,精子DNA碎片(SDF)检测是一项经受住时间考验的精子功能研究技术,在全世界的男科实验室中日益普及。各种体外和体内研究都支持精子DNA完整性在受精、早期胚胎发育、植入和妊娠中的重要性[1-2]。对于接受辅助生殖技术的患者,SDF已经成为一种新的风险分层生物标志物[3]。1980年,第1次SDF分析,引入了SCSA[4]。与其它SDF分析方法相比,精子染色质结构分析(SCSA)试验的非常显著的优点是DNA链断裂的标记物吖啶橙(AO)分子(MW 265).

精液处理后精子染色质结构比例的改变对辅助生殖技术相关指标影响

精子染色体DNA的完整性和成熟度为辅助生殖技术成功的前提条件。临床研究中最常用的测定法是染色质结构分析（SCSA）。即在酸性条件下,采用吖啶橙染色,流式细胞仪测定精子的稳定性。用DNA碎片化指数（DFI）和高DNA着色性指数（HDS）分别反映精子染色体DNA的完整性和成熟度。

精索静脉曲张对精子染色质结构及运动能力的影响

目的:探讨精索静脉曲张对精子染色质结构及运动能力的影响。方法:对精索静脉曲张组(无慢性疾病及生殖系统病史者,n=74)和对照组(n=89)进行精子染色质结构分析(SCSA)和精液常规分析(精液量、粘稠度、pH值、精子顶体完整率、精子存活率、畸形率、精子密度、活动率及各运动参数)。结果:精索静脉曲张组精子密度、a+b级精子百分率和精子存活率[分别为(41.4±38.7)×106/ml,(31.7±16.9)%,(62.8±22.2)%]显著低于对照组[分别为(80.9±63.1)×106/ml,(46.8±20.5)%,(77.2±17.5)%],P均<0.05;精子运动参数VCL、VSL、VAP精索静脉曲张组分别为(37.4±12.5)、(23.4±7.8)、(26.5±8.2)μm/s,对照组分别为(42.4±10.7)、(27.3±7.3)、(30.7±7.8)μm/s,精索静脉曲张组与对照组相比显著降低(P均<0.05),而MAD显著增加(P<0.01),SCSACOMPαt值精索静脉曲张组(为23.2±16.2)明显高于对照组(为14.1±11.8)(P<0.05)。结论:精索静脉曲张引起精子DNA损伤和精子运动能力的改变,可能是导致男性不育的主要原因之一。

精子染色质完整性对IVF/ICSI临床结局的预测价值

目的:通过分析精子染色质完整性与体外受精胚胎移植(IVF-ET)、卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)结局之间的关系,探讨精子染色质完整性检测在辅助生殖技术(ART)中的预测价值。方法:采用精子染色质结构分析试验(SCSA)方法检测187个ART周期中精子的染色质完整性,以精子DNA损伤指数(DFI)为参数,分为高DFI组(DFI≥30%)和低DFI组(DFI<30%),两组中根据采用不同的体外受精方式分为IVF亚组和ICSI亚组。分别比较高DFI组、低DFI组中IVF亚组和ICSI亚组间受精率、卵裂率、D2天胚胎质量、D3天胚胎质量、临床妊娠率差异性。结果:在高DFI组中,行ICSI治疗的夫妇临床妊娠率显著高于行IVF治疗的夫妇,具有统计学意义;在行IVF治疗的夫妇中,比较高DFI组与低DFI组的各临床结局,未见统计学差异;在行ICSI夫妇中,比较高DFI组与低DFI组的各临床结局,未见统计学差异。结论:精子染色质完整性影响辅助生育技术的结局,在选择辅助生殖技术方案时,可作为常规精液检查的一个补充。

SCSA法检测精子DNA碎片指数与辅助生育结局关系的meta分析

目的:探究精子染色质结构分析法(SCSA)检测精子DNA碎片指数(DFI)与体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)妊娠结局的关系。方法:计算机检索Pubmed、Cochrane library、EMBASE、Springer Link、CNKI、万方和维普等数据库,收集使用SCSA法检测DFI(DFI阈值27%或30%)与IVF、ICSI妊娠结局关系的文献,由两位检索人员根据纳入、排除标准独立筛选文献,提取数据后采用Stata 12.0软件进行meta分析。妊娠结局包括生化妊娠(BP)、临床妊娠(CP)、流产(PL)。相对危险度(RR)和95%可信区间(95%CI)用于评估DFI与妊娠结局的关系。结果:meta分析中纳入9篇有效文献(共2008个周期)。meta分析结果显示,DFI升高显著增加ICSI组生化妊娠率(RR=1.24,95%CI 1.00~1.52)、流产率(RR=2.21,95%CI 1.29~3.78),而与临床妊娠率无显著相关;DFI升高与IVF组的生化妊娠率、临床妊娠率、流产率均无显著相关。结论:SCSA法检测DFI对ICSI的妊娠结局有预测价值,而对IVF的妊娠结局无预测作用,仍需要纳入更多的大样本优质研究以进一步验证。

精液体外处理对精子染色质完整性的影响

精子染色质完整性损伤可以增加不育和遗传缺陷风险，精子染色质完整性损伤的因素及其保护机制已成为辅助生殖领域研究的热点之一。精液体外处理技术是辅助生殖技术（ART）常规操作，研究表明，经体外优选处理后，精子浓度、活力、形态等可很大程度改善，

73名重庆市大学生精子DNA甲基化水平与精液质量的相关分析

目的探讨人精子DNA甲基化水平与精液常规参数和精子染色质结构完整性的关系。方法纳入2014年重庆市大学生男性生殖健康(male reproductive health in Chongqing college students,MARHCS)队列的73名志愿者,分别采用计算机辅助精子分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)和精子染色质结构分析(sperm chromatin structure assay,SCSA)系统检测分析精液常规参数和精子染色质结构完整性指标。通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测精子DNA 5mC含量,反映精子DNA甲基化水平。同时采用调查问卷收集志愿者的年龄、BMI、禁欲时间及生活方式等数据。多元线性回归模型分析精子DNA 5mC含量与精液参数和精子染色质结构完整性的相关性,同时比较高水平和低水平精子DNA 5mC组(按照5mC%中位数二分类)志愿者各级精子百分率的差异。结果志愿者各项精液常规参数(中位数):精液体积为4.18 mL,精子密度为55.60×106/mL,精子总数为246.93×106,精子活力为57.00%;染色质结构完整性:精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)和高DNA着色性(high DNA stainability,HDS)指标的中位数分别是10.99%和3.39%;精子DNA 5mC水平的中位数为2.63%。校正混杂因素后,多元线性回归结果显示精子DNA 5mC与精子密度(β=-0.22,95%CI:-0.36~-0.06,P=0.008)和精子总数(β=-0.20,95%CI:-0.33~-0.05,P=0.015)负相关,与精子DFI和HDS指标的相关性分析无统计学意义(P>0.05)。与低水平精子DNA 5mC组相比,高水平精子DNA 5mC组各级精子百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论精子DNA甲基化水平升高可能是精子密度和精子总数下降的标志,而与精子染色质结构完整性指标无关。

SCSA和SCD检测精子DNA完整性结果比较及与精子质量参数的相关性分析

目的:近年来精子DNA碎片预测男性生育受到广泛关注,其检测方法较多,但方法学的比较研究很少,本文旨在比较精子DNA完整性常用检测方法之间的差异,并分析DNA碎片与精子质量的相关性。方法:选择108例精液样本,采用精子染色质结构分析试验(SCSA)和精子染色体扩散实验(SCD)对样本分别进行精子DNA碎片检测分析,对两种方法的结果进行比较,并与精液常规、精子形态以及患者年龄进行相关性分析。结果:两种方法检测的精子DNA碎片化指数(DFI)存在显著的一致性(P<0.01),DFI与精子活动率、前向运动精子百分率以及正常形态精子百分率呈显著负相关(P<0.01),与畸形精子指数呈显著正相关(P_(SCSA)<0.01,P_(SCD)<0.05),SCSA得出的DFI与年龄呈显著正相关(P<0.01),而SCD法的DFI并未发现类似的现象。结论:两种方法检测的结果对精子质量均有较好的预测价值,精子DFI作为一个检测指标,对男性生育力预测有一定的临床价值。但不同方法之间的检测结果差异较大,检测方法的标准化有待进一步研究。

密度梯度离心联合上游法对精子DNA损伤的影响

目的探讨不同精液优化处理方法对精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)和高DNA着色性(high DNA stainability,HDS)的影响。方法收集30例来本生殖中心就诊男性患者的新鲜精液样本,采用上游法、密度梯度离心法和密度梯度离心联合上游法3种方法优化精液,通过精子染色质结构分析检测新鲜精液及3种优化方法处理后的精子DFI和HDS水平。结果新鲜精液的精子DFI水平为(15.35±1.33)%,HDS水平为(2.69±0.27)%,前向运动精子百分比为(34.87±2.27)%,处理后3组的精子DFI和HDS水平均显著降低(P<0.05),前向运动精子百分比均显著提高(P<0.05)。密度梯度离心联合上游组的精子DFI水平最低,前向运动精子百分比最高,且与上游组和密度梯度离心组间差异具有统计学意义(P<0.05)。上游组和密度梯度离心组的精子DFI水平和前向运动精子百分比差异无统计学意义(P>0.05)。密度梯度离心联合上游组和上游组的HDS水平显著低于密度梯度离心组(P<0.05),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论密度梯度离心联合上游处理可极大程度降低精液中精子DFI和HDS水平,获得活力更好的精子,是一种更为理想的精液优选方法。

精子染色质结构分析的临床意义

目的探讨女方不明原因流产和不明原因不孕与其配偶精子染色质性状之间的关系;方法通过精子染色质结构分析(SCSA)对22例不明原因流产和36例不明原因不孕妇女配偶精子,以及20例正常对照者精子进行DNA完整性检测,并比较它们之间的差异;结果对照组与不明原因流产组以及不孕组之间精子DNA完整性存在差异,且差异具有统计学意义(P<0．05),而不明原因流产组与不孕组之间精子DNA完整性比较无明显差异(P>0．05);结论精子染色质结构分析有可能作为不明原因流产和不孕的辅助诊断方法在临床应用。

流式细胞术在精子染色质结构分析中的应用

目的 探讨流式细胞术在精子染色质结构分析 (SCSA)方法对实验结果的影响。方法利用吖啶橙的异染性和流式细胞术检测精子染色质DNA对原位酸诱导变性的敏感性。结果 存放精子的方法不同 ( 4℃保存、稀释冻存、原浆冻存 )对COMPαt、αt、SDαt值均影响较大 ,稀释后液氮保存法的人为损伤最低。冻存精液融化后立即检测以及测量流速 <3 0 0个精子 /s对结果无影响。该法的批内、批间变异系数分别为 7 2 8%和 8 92 %。 511名健康男性的COMPαt平均值及标准偏差为( 8 7± 11 0 ) %。由于分析资料呈右偏态分布 ,COMPαt的参考值范围是 <2 6 8%。COMPαt与精液常规分析中的d级精子率、平均移动角度、精子密度中度正相关 ,与a级精子率、精子存活率分别呈中度负相关。结论 流式细胞术对精子染色质结构分析能快速分析精子DNA损伤 ,为评估精子亚临床损伤。

精子DNA碎片指数和精子畸形率对ICSI临床结局的影响

目的：通过评估ICSI治疗前的精子畸形率（SMR）和精子DNA碎片指数（DFI），探讨精子DFI和SMR对卵胞浆内单精子注射（ICSI）助孕结局的影响。方法：共入组79对因少弱精子症实施第一周期ICSI治疗的不孕夫妇，在进入治疗周期前3～6个月，评价精子浓度、前向运动精子百分率、SMR及DFI。主要观察SMR和DFI与ICSI结局参数的关系。结果：79例少弱精子症患者DFI正常51例，异常28例，异常组的DFI值明显升高（14．18％VS41．47％）；巧合的是，SMR正常组同样为51例，异常组28例，异常组的SMR值亦明显升高（87．88％懈98．46％）。按DFI正常（DFI≤25％）与异常（DFI〉25％）分组，或按SMR正常（≤96％）与异常（〉96％）分组，组间的双方年龄、女方BMI、获卵数、移植胚胎数等基本情况差异无统计学意义。DFI正常和异常组间，SMR正常和异常组间的受精卵子数、可移植胚胎数、早期流产率无显著差异；异常组生化妊娠率（43．5％zw61．5％）和临床妊娠率（39．1％US56．4％）降低，但差异无统计学意义（P=0．19及0．10）。精子DFI与SMR呈显著正相关（r=0．231，P〈0．05）。结论：精子DFI增高（〉25％），与按严格标准检测的SMR增高（〉96％）男性行ICSI治疗，生化妊娠率和临床妊娠率降低，但与正常者比较未发现有统计学差异，可能与样本量小有关，有必要深入研究。

精子DNA碎片指数在男性生育力评估及其疗效监测中的应用

目的探讨精子DNA碎片指数(DFI)在评估男性生育力及监测抗氧化药物对高DFI男性不育患者疗效中的应用。方法根据生育力不同将2017年2月至2019年7月至湖南省妇幼保健院就诊的2122例男性分为3组:正常生育组(62例)、女方复发性流产的不育组(61例)及不育行体外受精(IVF)组(1999例);用精子染色质结构分析法(SCSA)检测精子DFI,比较3组间的差异性;对DFI>15%的患者进行抗氧化治疗,分析治疗前后DFI的变化。结果在正常生育组、复发性流产组及不育行IVF组间精子DFI差异有统计学意义(P<0.01);3组间两两比较显示,不育行IVF组男性精子DFI高于正常生育组(P<0.01)。460例高DFI患者中296例(68.8%)经抗氧化药物治疗后DFI下降,治疗前后差异有统计学意义(P<0.01)。结论男性生育力与DFI相关,通过抗氧化药物治疗可以降低男性精子DNA损伤水平。