精子线粒体早老素相关菱形样蛋白及精子DNA碎片指数与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性分析

目的观察行体外受精-胚胎移植的不孕夫妇中男性患者精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index, DFI)和精子线粒体早老素相关菱形样蛋白(presenilin associated rhomboid like protein, PARL)水平变化,探讨其与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法行体外受精-胚胎移植的不孕夫妇中男性患者140例,根据临床妊娠情况分为妊娠成功组57例和妊娠失败组83例。2组行体外受精-胚胎移植前,采用精子染色质扩散法检测精子DFI,采用ELISA法检测精子线粒体PARL水平,比较2组年龄、精子密度、精子活力、精子DFI、精子线粒体PARL水平及优质胚胎率等临床资料。以精子DFI、精子线粒体PARL水平的平均值25%、5.86μg/L为临界值,将140例患者分为高DFI组62例(DFI≥25%)和低DFI组78例(DFI<25%),高PARL组71例(PARL≥5.86μg/L)和低PARL组69例(PARL<5.86μg/L);比较高、低DFI、PARL组精子密度、精子活力、精子畸形率、优质胚胎率、种植率、卵裂率、受精率、临床妊娠率;采用Pearson或Spearman相关性分析精子线粒体PARL水平、精子DFI分别与精子密度、精子活力、优质胚胎率、临床妊娠率、精子畸形率的相关性;采用多因素logistic回归分析体外受精-胚胎移植妊娠失败的影响因素。结果妊娠成功组优质胚胎率(47.30%)、精子密度[(27.42±4.13)×10^(6)/mL]、精子活力[(51.84±13.02)%]、精子线粒体PARL水平[(13.54±2.01)μg/L]均高于妊娠失败组[31.82%、(22.09±3.26)×10^(6)/mL、(32.28±8.12)%、(4.51±1.07)μg/L](P<0.05),精子畸形率[(16.80±4.82)%]、精子DFI[(10.98±3.06)%]均低于妊娠失败组[(26.83±6.94)%、(30.46±6.18)%](P<0.05)。高DFI组优质胚胎率(30.00%)、临床妊娠率(30.65%)、精子密度[(20.14±4.36)×10^(6)/mL]、精子活力[(24.45±8.73)%]均低于低DFI组[46.89%、48.72%、(27.54±4.12)×10^(6)/mL、(52.81±13.04)%](P<0.05),精子畸形率[(30.12±7.93)%]高于低DFI组[(16.87±5.94)%](P<0.05);高PARL组优质胚胎率(47.96%)、临床妊娠率(53.52%)、精子密度[(27.25±4.12)×10^(6)/mL]、精子活力[(50.66±12.95)%]均高于低PARL组[28.68%、27.54%、(21.04±4.23)×10^(6)/mL、(24.76±8.87)%](P<0.05),精子畸形率[(16.72±5.63)%]低于低PARL组[(30.75±7.81)%](P<0.05);精子线粒体PARL与精子密度(r=0.507,P=0.007)、精子活力(r=0.514,P=0.009)、优质胚胎率(r=0.470,P<0.001)、临床妊娠率(r=0.564,P=0.002)均呈正相关,与精子畸形率呈负相关(r=-0.489,P=0.007);精子DFI与精子密度(r=-0.496,P=0.008)、精子活力(r=-0.503,P=0.006)、优质胚胎率(r=-0.520,P=0.006)、临床妊娠率(r=-0.483,P=0.031)呈均负相关,与精子畸形率呈正相关(r=0.512,P=0.004)。精子线粒体PARL(OR=0.842,95%CI:0.759~0.934,P=0.001)、精子DFI(OR=2.426,95%CI:1.334~4.411,P=0.004)是体外受精-胚胎移植后妊娠失败的影响因素。结论体外受精-胚胎移植妊娠失败的不孕夫妇中男性患者精子DFI升高、精子线粒体PARL水平降低,二者是体外受精-胚胎移植妊娠失败的影响因素。

敲低ROCK2基因通过促进线粒体融合并抑制其分裂改善AD小鼠认知功能及减轻神经细胞凋亡

目的 探讨敲低Rho相关螺旋卷曲激酶2(ROCK2)基因对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠认知功能的影响及其机制。方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为AD模型组(AD组)、 ROCK2基因敲低组(shROCK2组)、 ROCK2基因敲低对照组(shNC组),同龄野生型C57BL/6小鼠作为野生型对照(WT组)。Morris水迷宫和Y迷宫实验测试小鼠认知功能,尼氏染色检测神经元形态,免疫荧光组织化学染色检测磷酸化动力蛋白相关蛋白1(p-Drp1)和线粒体融合蛋白1(Mfn1)的表达,Western blot法检测海马组织ROCK2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关蛋白X(BAX)、 p-Drp1、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、视神经萎缩因子1(OPA1)、 Mfn1和Mfn2的蛋白表达。结果 与AD组小鼠相比,shROCK2组小鼠ROCK2表达明显减少;其认知功能明显改善,海马CA3和DG区神经元数量增加,尼氏体染色深;c-caspase-3和BAX表达降低,同时Bcl2表达升高;线粒体分裂相关蛋白p-Drp1和Fis1的表达减少,而线粒体融合相关蛋白OPA1、 Mfn1和Mfn2的表达增加。结论 敲低ROCK2可以显著改善APP/PS1小鼠的认知功能,并抑制神经细胞凋亡,其机制可能与促进线粒体融合并抑制其分裂有关。

铝暴露工人精子线粒体PARL与精子质量的相关性及PARL下调的分子机制

目的探讨铝暴露工人精子线粒体早老素相关菱形(PARL)蛋白与精子质量的相关性及PARL下调的分子机制。方法选取广西某大型铝企业的162名男性铝作业工人为试验组,162名企业服务员工为对照组。检测两组精子线粒体PARL蛋白水平、PARL基因C44055G多态性,所处环境铝、血清铝、尿液铝水平及精液常规,分析两组上述指标的差异。结果两组所在环境铝、血清铝及尿液铝的水平,线粒体PARL蛋白水平,精子活力、精子存活率及畸形率差异有统计学意义(P<0.05),且试验组血清铝及尿液铝水平与作业工龄呈正相关。精子线粒体PARL蛋白水平与精子活力、精子存活率及畸形率呈相关性(r=0.713、0.628、0.953,P<0.05);两组间PARL基因C44055G不同基因型分布频率无差异(χ^2=3.729,P=0.155),但PARL基因C44055G不同基因型间的铝暴露工人精子线粒体PARL蛋白水平有显著差异(F=5.157,P<0.01)。结论铝暴露工人精子受损与精子线粒体PARL蛋白水平下调有关。

南药益智仁对糖尿病肾病氧化应激iNOS及PARLmRNA表达的影响

目的:探讨益智仁对STZ造模的糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠治疗后的血清诱生型一氧化氮合酶(iNOS)及早老素相关菱形样蛋白(PARL) mRNA表达的影响,以期确定益智仁的抗氧化应激作用。方法:大鼠高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射造模4周。大鼠随机分为6组,每组10只,分别为空白组,益智仁低、中、高剂量组(低、中、高剂量分别为100、300、900 mg·kg^(-1)),缬沙坦组(缬沙坦胶囊25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),模型组。给药4周后用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测血清iNOS,荧光定量PCR法测PARLmRNA。结果:益智仁不同浓度药物均能下调血清iNOS及增加PARLmRNA的表达(P <0. 05)。结论:益智仁能通过干预iNOS及PARLmRNA的表达治疗氧化应激引起的DN。