大鼠慢性镉染毒后精子生成量和精子运动能力研究

目的:了解慢性镉中毒对精子生成量和精子运动能力的影响。方法:SD雄性大鼠60只,分成对照组、镉中剂量组、镉高剂量组,每组20只。采用精子头计数法研究镉染毒对精子生成量的影响;计算机辅助精子分析系统（CASA）观察附睾精子运动速度参数（VCL、VSL和VAP）和运动方式参数（BCF、ALH、LIN和STR）的变化。结果:染毒第3周时,高剂量组精子头计数和每日精子生成量均显著低于对照组（P<0.01）;中剂量组大鼠VCL显著降低,高剂量组BCF和STR也显著下降。染毒第6周时,两个染毒组精子头计数和每日精子生成量均明显低于对照组（P<0.01）;而高剂量组大鼠VSL和LIN显著降低（P<0.05）。第3、第6周其它运动指标变化均不明显。结论:慢性镉染毒对大鼠睾丸精子生产量和附睾尾精子运动能力直接造成毒性作用。

辛硫磷对大鼠精子生成量和精子运动能力的影响

为探讨有机磷杀虫剂辛硫磷的雄性生殖毒性,运用动物实验研究了不同剂量辛硫磷经口染毒大鼠60天对精子生成量和精子运动能力的影响。采用计算机辅助精子分析仪(CASA)分析精子运动轨迹。结果显示:辛硫磷24.5和73.5m g/kgBW 染毒组,大鼠睾丸精子生成量低于对照组(P< 0.05和P< 0.01)。与对照组相比,精子的运动活力参数(曲线运动速度、直线运动速度、鞭打频率)和运动方式参数(直线性和前向性)均降低(P< 0.05和P< 0.01),且具有剂量依赖关系。提示辛硫磷大剂量(24.5和73.5m g/kgBW)对雄性大鼠有生殖毒性。

氰戊菊酯体外对大鼠精子运动能力的影响

目的:观察氰戊菊酯(Fen)对大鼠精子运动能力的直接作用。方法:收集7只健康成年雄性SD大鼠附睾尾精子,用Fen进行体外染毒,剂量分别为1、4、16、64μmol/L,以Fen溶剂(二甲亚砜)作为对照组。在染毒1、2、4 h后用计算机辅助精子分析(CASA)系统对精子运动速度[曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、鞭打频率(BCF)]和运动方式[前向性(STR)、直线性(LIN)]进行检测,观察Fen对离体大鼠精子运动能力的影响。结果:Fen染毒1、2 h后,可见64μmol/L组的VSL、BCF、LIN和STR与对照组相比差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。染毒4 h后,除上述指标外,VCL在16、64μmol/L组与对照组相比也呈现出明显的下降(P<0.01)。时间-效应关系分析显示,Fen(16、64μmol/L)染毒4 h组与染毒1 h组相比,VCL和STR显著下降(P<0.01或P<0.05)。结论:Fen可作用于大鼠附睾尾精子,并对大鼠精子运动有直接毒性效应。

附睾及附属性腺对精子运动能力的影响

目的研究睾丸后附睾及附属性腺对精子运动能力的影响。方法630例精液样本采用计算机辅助精子分析(CASA)精子运动参数,把这些数值与精浆果糖、中性a-糖苷酶、前列腺特异性抗原及锌联系起来,并进行相关性分析。精浆果糖含量、中性a-糖苷酶、精浆锌采用分光光度比色法测定。PSA采用试剂盒进行检测。结果精液果糖含量异常组精子活力显著高于正常组(P<0.001),中性a-糖苷酶活性、精浆锌含量异常组精子活力均显著低于正常组(P<0.01,P<0.05)。精浆果糖含量与精子活力有明显的负相关性(r=-0.185,P<0.05),而精浆中性a-糖苷酶活性与精子活力有明显的正相关性(r=0.220,P<0.01)。结论附睾与附属性腺对精子运动能力有影响,其产生的生化标志物可能调节精子运动。

汽车尾气对人精子运动能力影响探讨

采用［日］岛津ＡＡ－６７０型原子吸收分光光度计，四唑氮蓝（Ｎｉｔｒｏ－ＢＴ）染色法，及图象分析仪（ＭＩＡＳ－３００）分析了交通警察和男性师生两人群精液的精子运动能力参数和血铅水平。结果显示：与对照组比较，交警组精子活动能力降低（Ｐ＜０．０５），精子琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性明显抑制（Ｐ＜０．００１）。而且ＳＤＨ活性与血铅水平呈负相关。认为交警精子活动能力下降可能和铅干扰精子线粒体能量代谢有关。

环境因子对牙鲆精子运动能力的影响

于1997年5-6月,在山东荣成市石岛养殖场采用挤压法收集牙鲆亲鱼的精子,利用显微镜观察精子的活力,研究外界环境因子的变化对牙鲆精子运动能力的影响。结果表明,将蔗糖、NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2等溶解于去离子水中,制成不同浓度即具有不同渗透压的溶液,不同渗透压的溶液对精子运动的诱导结果不同。EDTANa2溶液不能诱导精子运动。在人工海水中加入一定量的EDTANa2后,可使原先运动的精子静止;在该溶液中加入新的Ca2+后,将不再诱导原来受到EDTANa2抑制的精子。如用MgSO4代替溶液中的CaCl2,可诱导精子运动;而当用MgCl2代替溶液中的CaCl2,以及用CaCl2或NaCl代替MgSO4时,溶液即失去诱导精子运动的能力。在pH＝4.0-9、5的海水中,牙解精子均可正常运动。

用计算机辅助精子分析系统测定TCDD对大鼠精子运动能力的影响

利用计算机辅助的精子分析系统（ＣＡＳＡ）研究了２，３，７，８—四氯二苯－Ｐ－二口恶口英（ＴＣＤＤ）对大鼠精子运动能力的影响。给２１天龄幼鼠腹腔注射ＴＣＤＤ０．１、１．０和５．０μｇ／ｋｇ，对照组注射等量体积的溶媒。在性成熟后（９０天），用扩散法收集附睾尾精子，测定其运行速度（ＶＣＬ、ＶＳＬ、ＶＡＰ）、运动方式（ＳＴＲ、ＬＩＮ、ＢＣＦ、ＡＬＨ、ＭＡＤ等）及活动精子的比率（Ｍｏｔ％）。结果表明，ＴＣＤＤ１．０μｇ／ｋｇ组，精子的运动速度明显低于对照组（ＶＣＬＰ＜０．０５；ＶＡＰ、ＶＳＬ、ＢＣＦＰ＜０．０１），０．５μｇ／ｋｇ时精子的运动速度、及前向性和直线性运动性能均明显降低（Ｐ＜０．０１），活动精子的比率也明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。本研究结果为ＴＣＤＤ的男性生殖毒理学研究。

三氧化二砷对大鼠精子生成及精子运动能力的影响

目的 :探讨药理浓度的三氧化二砷 (As2 O3 )对大鼠精子生成和精子运动能力的影响。方法 :As2 O3 大鼠腹腔注射 ,二周后对大鼠进行睾丸精子头计数 ,并计算每日精子生成量。应用计算机辅助精子分析系统对附睾精子活动能力进行检测。结果 :每日 2mg/kg、4mg/kg组精子头数和每日精子生成量较对照组有所减少 ,8mg/kg则明显减少 ;对附睾精子扩散液进行检测发现三种剂量As2 O3 对VCL、VSL及VAP均有明显影响 ,但对精子运动的其他指标ALH、BCF、LIN、WOB及STR的影响均无统计学差异。结论 :As2 O3 可引起精子生成量的减少和精子运动能力的降低而产生男 (雄 )性生殖毒性。

节律基因Clock干扰对小鼠精子受精能力的影响

目的通过干扰小鼠睾丸圆形精子期节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠精子受精能力的影响。方法小鼠睾丸注射Clock干扰质粒,Western Blotting检测注射后睾丸组织Clock表达的变化,体内实验观察注射干扰质粒前后引起雌鼠胎仔数变化,体外实验观察精子数量、精子活力、体外受精率以及对顶体发育的影响。结果Clock干扰质粒使小鼠睾丸CLOCK蛋白的表达明显下调。体内实验结果显示注射Clock干扰质粒影响了雄性鼠致雌鼠的胎仔数,体外实验结果显示,虽然注射Clock干扰质粒后精子计数、精子活力无明显变化,但体外受精能力明显下降。顶体酶活性明显下降。结论节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系。节律基因Clock可能通过调节顶体酶活性来影响雄性小鼠精子的受精能力。

黄精赞育胶囊优选方对弱精子症大鼠精子运动能力的影响

目的 :研究黄精赞育胶囊优选方对弱精子症大鼠精子运动能力的影响。方法 :采用雷公藤多甙制备大鼠弱精子症模型 ,通过计算机辅助精子分析系统 (CASA)观察黄精赞育胶囊优选方对精子运动速度和运动方式的影响。结果 :优选方中剂量组可显著提高精子密度、活力、活率及运动速度 (VCL、VSL、VAP)。其疗效与黄精赞育组相似 ,且优于大剂量、小剂量和五子衍宗丸组 ,而优选方三种剂量对精子运动方式 (LIN、STR、WOB、ALH、BCF、MAD)均无显著改善。结论 :黄精赞育胶囊优选方具有提高精子密度、活力、活率及运动速度的作用。

精子运动能力检测系统中图像分割方法的选取与算法实现

介绍了精子运动能力检测系统中精子图像分割方法选取中的问题及应对的方法。重点 介绍了最大类间方差阈值选取法的算法原理。

囊性纤维跨膜电导调节因子（CFTR）参与子宫HCO3^-分泌与精子受精能力

目的 为了研究CFTR是否参与子宫内膜上皮细胞HCO3^-分泌、转运及其与精子受精能力。方法 (1)小鼠子宫内膜上皮细胞培养结合细胞荧光测量仪测定胞内pH[pHi]来评价细胞顶膜HCO3^-排放机制；(2)ussing细胞培养并结合短路电流(ISC)测量usslrg小室内HCO3^-排放情况；(3)以精子与子宫内膜上皮细胞共培养系统检验子宫内膜分泌对精子获能、顶体反应和受精的作用；(4)比较正常人咦腺导管上皮细胞系CAPAN-1和囊性纤维化患者(CF)胰腺导管上皮细胞系CFPAN-1对精子受精能力的影响。结果 子宫内膜上皮细胞CFIR具有介导HCO3^-分泌及其转运作用。精子与CFTR反义寡核苷酸或用缺乏HCO3^-分泌的CF病人上皮细胞系共培养，引起精子获能及其与卵子受精能力明显下降。结论 损伤子宫HCO3^-分泌导致CF妇女生育力降低。

弱精症精子SOD2和PRDX6的表达变化及其与精子运动能力的相关性分析

目的探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患者精液标本(PR<32%,PR+NP<40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)84例,正常精液标本(PR≥32%,PR+NP≥40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)55例。通过精液计算机辅助分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)检测精液常规参数及精子运动参数;不同浓度H_(2)O_(2)处理正常精子后通过CASA检测精子活力和运动参数变化,伊红染色检测精子存活率变化,Western blot检测精子SOD2和PRDX6表达变化;运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot同时对弱精症组精子和正常组精子SOD2和PRDX6表达进行定量检测,进一步统计分析SOD2和PRDX6的表达变化及其与精液参数的相关性。结果CASA检测结果显示精子活力在0.10、0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后显著降低;精子运动参数中曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)、平均路径速率(VAP)和平均角位移(MAD)在0.05、0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后剂量依赖式降低,侧摆幅度(ALH)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)和前向性(STR)在0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低;伊红染色结果显示精子存活率在0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低,而Western blot检测结果显示精子SOD2和PRDX6表达呈H_(2)O_(2)(0.10、0.35和1.00 mmol/L)剂量依赖式增高。RT-qPCR检测结果显示弱精症组精子SOD2[(0.297±0.038)vs(0.895±0.140),P<0.01]与PRDX6[(0.743±0.107)vs(1.416±0.163),P<0.01]mRNA相对表达量低于正常组。Western blot结果显示弱精症组精子SOD2[(0.689±0.147)vs(1.466±0.212),P<0.01]与PRDX6[(0.726±0.084)vs(1.183±0.100),P<0.01]蛋白相对表达量低于正常组。相关性分析结果显示精子SOD2 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.267,P<0.01)和总活力(r=0.329,P<0.01)呈正相关;PRDX6 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.453,P<0.01)、总活力(r=0.476,P<0.01)、STR(r=0.270,P<0.01)、VCL(r=0.313,P<0.01)、VSL(r=0.349,P<0.01)、VAP(r=0.410,P<0.01)呈正相关。结论ROS可降低精子活力、运动能力和存活率并上调精子SOD2和PRDX6表达;弱精症患者精子SOD2和PRDX6表达下调且其表达与精子运动能力正相关。

溴隐亭对离体精子受精能力的影响

应用５种不同浓度溴隐亭溶液与离体精液混合孵育，观察其对体外精子受精功能的影响。结果表明，浓度为１０ｍｍｏｌ／Ｌ的溴隐亭溶液可明显抑制精子的存活率和其对宫颈粘液的穿透能力，与对照组相比差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）；而其它４种浓度的溴隐亭溶液对精子功能的影响差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。提示经阴道应用溴隐亭治疗高泌乳素血症引起的女性不育症时，小剂量用药对精子功能并无明显干扰。

PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响

旨在研究PNPLA5基因对雄性大鼠繁殖性能的影响。本研究以PNPLA5敲除型雄性大鼠(KO)为试验组,野生型大鼠(WT)为对照组,分别饲喂普通饲料,并采集大鼠附睾精子及睾丸组织。利用繁殖试验检测配种后雌鼠的妊娠率及平均产仔数,精子运动性能分析检测精子运动能力,Western blot检测精子中线粒体功能相关细胞色素C(cytochrome C,Cytc)与细胞色素C氧化酶亚基IV(cytochrome c oxidase subunit IV,COX IV)的表达水平,HE染色检测睾丸组织形态。结果表明:与野生型雄性大鼠相比,PNPLA5敲除型雄鼠与野生型雌鼠配种后,雌鼠的妊娠率极显著下降(P<0.01);精子的曲线运动速度显著降低(P<0.05)及渐进运动精子的百分率极显著降低(P<0.01);PNPLA5敲除型大鼠精子中细胞色素C表达量下调,细胞色素C氧化酶亚基IV表达量上调,但差异均不显著(P>0.05);PNPLA5基因缺失引起大鼠睾丸组织结构疏松,曲细精管中各阶段生精细胞排列紊乱,上皮细胞脱落至管腔。综上表明,本研究发现PNPLA5基因敲除能够引起雄性大鼠繁殖能力降低,为家畜繁殖研究提供重要的参考依据。

不育男性精索静脉曲张栓塞治疗前精子活动能力预测配偶日后怀孕可能性的研究

目的明确不育男性精索静脉栓塞后其配偶日后怀孕的预测因素。方法本研究经伦理委员会批准，获得病人书面知情同意。223例精索静脉曲张合并少精症、畸形精子症、精子活力不足的临床不育男性（年龄18～50岁）进行了血管内精索静脉末梢螺圈栓塞和硬化治疗。并依据需要进行抗炎处理。基础临床检查、精液样本和激素水平与以后随访资料相对照。治疗后与健康配偶怀孕率通过标准的调查问卷获得。所有可得到的临床和实验室资料采用非条件logistic回归分析预测治疗成功与否（随访期间父因怀孕）。

在IVF-ET中精子活动能力和形态异常对受精率与妊娠率的影响

精子活动指数(SMI)是精子质量指标之一,但尽管SMI良好时,体外受精-胚移植(IVF-ET)也有失败的情况,严格的形态学标准(KSC)也是检测精子受精能力的指标。本文以SMI和KSC预测IVF-ET的受精率。

刺五加水提物对人精子体外运动活力的影响

目的研究刺五加水提物对正常男性精子体外运动活力的影响,探讨其可能的作用机制。方法将20例正常男性的精子通过上游优化法处理后,一组精子加入10 mg.mL-1的刺五加水提物,另一组加入等量的Ham’s F10培养液作对照。应用计算机辅助的精子分析系统,分别测定孵育0.5,1,2,3,4,5 h后人精子各运动参数。结果随着时间的延长,加入Ham’s F10培养液的精子活动能力有不同程度的下降;加入10 mg.mL-1的刺五加水提物后,不同时段精子的运动能力均较对照组明显提高,精子存活率、前向运动精子百分率、曲线运动速度、直线运动速度和平均路径速度与对照组比较,均明显改善(均P<0.05)。结论刺五加水提物能明显提高正常男性精子的体外存活率和运动能力。

紧密连接蛋白11在非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:分析紧密连接蛋白11(CLAUDIN-11)在非梗阻性无精子症(NOA)患者不同生精障碍类型的睾丸组织中的表达情况,探讨其临床意义。方法:62例NOA患者按不同病理类型分为精子发生能力低下(HS)组和唯支持细胞综合征(SCO)组,其中HS组30例,SCO组32例。免疫组化法检测CLAUDIN-11在睾丸组织中的表达,实时荧光定量PCR检测CLAUDIN-11 mRNA的表达变化,化学发光法检测生殖激素在两组间的差异。结果:免疫组化结果显示,CLAUDIN-11在HS组的表达主要分布于靠近生精小管管壁的支持细胞胞质,在SCO组的表达定位混乱。实时荧光定量PCR结果显示,CLAUDIN-11 mRNA在SCO组表达高于HS组,分别为0.013±0.002、0.008±0.001(t=10.616,P<0.01)。血清LH和FSH在HS组和SCO组患者中差异显著[(3.62±1.34)IU/L vs(4.96±3.10)IU/L,(5.36±2.80)IU/L vs(10.65±9.18)IU/L,P均<0.05]。结论:CLAUDIN-11在睾丸支持细胞上的表达上调,可能在NOA患者睾丸生精功能障碍的发生和发展中起重要作用。