弱精不育与正常精子蛋白质的双向电泳研究

目的:检测人类正常精子与弱精不育精子的差异表达蛋白质。方法:用2-DE-IPG-DALT技术对36例弱精不育与10例正常精子总蛋白进行分离,银染后,切取2个在患者中不表达的差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:成功建立了弱精不育与正常精子总蛋白的双向电泳图谱,经图像分析显示,弱精不育精子中高丰度表达而正常样本中缺失或表达下调的27个蛋白点,正常精子中存在而在弱精不育精子中缺失或低表达的37个点。并对C35和C37这2个差异蛋白质进行了质谱鉴定。结论:差异蛋白与弱精不育相关。

一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达

目的通过对已被ＧｅｎＢａｎｋ接受、编码与不育有关的人精子蛋白质的ｃＤＮＡ片段（ＢＳＤ－２．４）的组织特异性及表达阶段的研究，进一步了解其特性。方法采用Ｄｏｔｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和组织原位杂交技术。结果该ｃＤＮＡ只在人和大鼠睾丸组织中表达；在人睾丸曲细精管的精原细胞、精母细胞和精子细胞中均有转录。结论ＢＳＤ－２．４ｃＤＮＡ编码蛋白具有睾丸组织特异性，并在精子发生的各个阶段均有不同程度的表达。

抽烟损伤精子蛋白质

据英国（BBC新闻》（BBCNEWS）2016—07—24报道，刊登于BJU International的一项研究发现，与无吸烟习惯者相比，吸烟男性的精子DNA受到更大程度的损伤。这份研究有20名吸烟者与20名非吸烟者共同参与。研究人员评估了参与者精子中422种蛋白质的表现，发现吸烟者的精子中有1种蛋白质消失、27种蛋白质数量不足，以及6种蛋白质数量超过标准。这些蛋白质的分析结果表明吸烟可能加重男性生殖道的炎性反应。

绵羊精子冻融前后差异蛋白质组学研究

【目的】检测和分析绵羊精子冻融前后的差异蛋白质。【方法】用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色,用PDQuest8.0软件检测分析差异蛋白质斑点并经液相色谱串联离子阱质谱鉴定。【结果】鲜冻精凝胶图谱分析后得到14个差异蛋白斑点,在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的5种蛋白质:推定的热休克蛋白70.1、转录因子AP-2α蛋白、烯醇酶、烯醇酶1和血清白蛋白前体。在解冻精子中,推定的热休克蛋白70.1、烯醇酶和烯醇酶1含量减少,转录因子AP-2α蛋白含量增加,血清白蛋白前体来源于精浆。【结论】绵羊精子经冷冻、解冻后,蛋白质存在差异,对差异蛋白质的研究有利于探索绵羊精子在冷冻过程中的生理状态,为进一步研究绵羊精子蛋白质组学及揭示精子冻伤机理提供依据。

两种剂量重离子辐照绵羊精子差异蛋白质组学研究

为检测和分析0.5和3.0Gy 2种剂量重离子辐照绵羊精子差异表达的蛋白质,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用硝酸银染色,PDQuest8.0检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定,结果显示:2种剂量凝胶图谱分析后得到8个共同差异蛋白斑点,鉴定为3种表达上调的蛋白质(谷氧还蛋白1、转录因子AP-2α蛋白和烯醇酶)。研究表明:绵羊精子经不同剂量重离子辐照后蛋白质的表达存在差异,对差异表达蛋白质的研究有利于探索绵羊精子在重离子辐照过程中的生理状态,可为进一步研究重离子辐照绵羊精子蛋白质组学奠定基础。

弱精症精子中与获能有关的蛋白质酪氨酸磷酸化和膜流动性发生损害

精子蛋白质酪氨酸磷酸化与精子获能、运动、结合透明带及受精能力有关。以前的研究表明用梯度分离可分出人精子膜成分的不同亚群，这些成分使蛋白质酪氨酸残基发生磷酸化以及精子获得高活动力。在这项研究中，作者证实了弱精症精子和精液正常却不育的男性患者精子中与获能有关的蛋白质磷酸化及膜流动性发生改变。精液标本检测达到正常水平时，加或不加cAMP类似物和磷酸酶抑制剂孵育后均可获能。基本的精液分析和计算机辅助动态参数分析、

精索静脉曲张不育患者精子蛋白组双向电泳技术的建立与优化

目的:建立与优化精索静脉曲张不育患者精子蛋白质组双向凝胶电泳技术。方法:采取Percoll密度梯度离心法提取精索静脉曲张不育患者精子,比较不同精子蛋白样品制备方法、不同胶条、不同上样量和不同水化方式对双向凝胶电泳结果的影响。结果:使用clean-up kit法对样品进行预处理,选取pH 5～8的固相化pH梯度胶条,采用250μg的上样量和主动水化方式能获得背景干净、分辨率高的双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱。结论:成功建立了精索静脉曲张不育患者精子蛋白双向凝胶电泳平台,所获2-DE图谱的分辨率高、重复性好,为进一步探讨精索静脉曲张导致不育的分子机制奠定了技术基础。

精子蛋白表达下调在成人弱精症中的意义分析

目的:探讨精子蛋白表达下调在成人弱精症中的意义。方法:用iTRAQ标记以及二维高效液相色谱/串联质谱联用的方法研究成年男性正常精子以及轻、中、重度弱精症患者的精子蛋白表达情况。结果:以正常组作为参照,本研究共发现1 073个蛋白质,其中呈递减下调表达的蛋白质73个,分别是参与精子能量代谢过程蛋白质、参与精子运动和细胞循环途径蛋白质、参与精子细胞免疫反应和凋亡途径蛋白质和其他蛋白质,其中部分蛋白与精子活力明显相关。结论:部分精子蛋白质表达下调可能是导致成人弱精症的重要原因之一。