大鼠慢性镉染毒后精子生成量和精子运动能力研究

目的:了解慢性镉中毒对精子生成量和精子运动能力的影响。方法:SD雄性大鼠60只,分成对照组、镉中剂量组、镉高剂量组,每组20只。采用精子头计数法研究镉染毒对精子生成量的影响;计算机辅助精子分析系统（CASA）观察附睾精子运动速度参数（VCL、VSL和VAP）和运动方式参数（BCF、ALH、LIN和STR）的变化。结果:染毒第3周时,高剂量组精子头计数和每日精子生成量均显著低于对照组（P<0.01）;中剂量组大鼠VCL显著降低,高剂量组BCF和STR也显著下降。染毒第6周时,两个染毒组精子头计数和每日精子生成量均明显低于对照组（P<0.01）;而高剂量组大鼠VSL和LIN显著降低（P<0.05）。第3、第6周其它运动指标变化均不明显。结论:慢性镉染毒对大鼠睾丸精子生产量和附睾尾精子运动能力直接造成毒性作用。

辛硫磷对大鼠精子生成量和精子运动能力的影响

为探讨有机磷杀虫剂辛硫磷的雄性生殖毒性,运用动物实验研究了不同剂量辛硫磷经口染毒大鼠60天对精子生成量和精子运动能力的影响。采用计算机辅助精子分析仪(CASA)分析精子运动轨迹。结果显示:辛硫磷24.5和73.5m g/kgBW 染毒组,大鼠睾丸精子生成量低于对照组(P< 0.05和P< 0.01)。与对照组相比,精子的运动活力参数(曲线运动速度、直线运动速度、鞭打频率)和运动方式参数(直线性和前向性)均降低(P< 0.05和P< 0.01),且具有剂量依赖关系。提示辛硫磷大剂量(24.5和73.5m g/kgBW)对雄性大鼠有生殖毒性。

氰戊菊酯体外对大鼠精子运动能力的影响

目的:观察氰戊菊酯(Fen)对大鼠精子运动能力的直接作用。方法:收集7只健康成年雄性SD大鼠附睾尾精子,用Fen进行体外染毒,剂量分别为1、4、16、64μmol/L,以Fen溶剂(二甲亚砜)作为对照组。在染毒1、2、4 h后用计算机辅助精子分析(CASA)系统对精子运动速度[曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、鞭打频率(BCF)]和运动方式[前向性(STR)、直线性(LIN)]进行检测,观察Fen对离体大鼠精子运动能力的影响。结果:Fen染毒1、2 h后,可见64μmol/L组的VSL、BCF、LIN和STR与对照组相比差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。染毒4 h后,除上述指标外,VCL在16、64μmol/L组与对照组相比也呈现出明显的下降(P<0.01)。时间-效应关系分析显示,Fen(16、64μmol/L)染毒4 h组与染毒1 h组相比,VCL和STR显著下降(P<0.01或P<0.05)。结论:Fen可作用于大鼠附睾尾精子,并对大鼠精子运动有直接毒性效应。

附睾及附属性腺对精子运动能力的影响

目的研究睾丸后附睾及附属性腺对精子运动能力的影响。方法630例精液样本采用计算机辅助精子分析(CASA)精子运动参数,把这些数值与精浆果糖、中性a-糖苷酶、前列腺特异性抗原及锌联系起来,并进行相关性分析。精浆果糖含量、中性a-糖苷酶、精浆锌采用分光光度比色法测定。PSA采用试剂盒进行检测。结果精液果糖含量异常组精子活力显著高于正常组(P<0.001),中性a-糖苷酶活性、精浆锌含量异常组精子活力均显著低于正常组(P<0.01,P<0.05)。精浆果糖含量与精子活力有明显的负相关性(r=-0.185,P<0.05),而精浆中性a-糖苷酶活性与精子活力有明显的正相关性(r=0.220,P<0.01)。结论附睾与附属性腺对精子运动能力有影响,其产生的生化标志物可能调节精子运动。

环境因子对牙鲆精子运动能力的影响

于1997年5-6月,在山东荣成市石岛养殖场采用挤压法收集牙鲆亲鱼的精子,利用显微镜观察精子的活力,研究外界环境因子的变化对牙鲆精子运动能力的影响。结果表明,将蔗糖、NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2等溶解于去离子水中,制成不同浓度即具有不同渗透压的溶液,不同渗透压的溶液对精子运动的诱导结果不同。EDTANa2溶液不能诱导精子运动。在人工海水中加入一定量的EDTANa2后,可使原先运动的精子静止;在该溶液中加入新的Ca2+后,将不再诱导原来受到EDTANa2抑制的精子。如用MgSO4代替溶液中的CaCl2,可诱导精子运动;而当用MgCl2代替溶液中的CaCl2,以及用CaCl2或NaCl代替MgSO4时,溶液即失去诱导精子运动的能力。在pH＝4.0-9、5的海水中,牙解精子均可正常运动。

汽车尾气对人精子运动能力影响探讨

采用［日］岛津ＡＡ－６７０型原子吸收分光光度计，四唑氮蓝（Ｎｉｔｒｏ－ＢＴ）染色法，及图象分析仪（ＭＩＡＳ－３００）分析了交通警察和男性师生两人群精液的精子运动能力参数和血铅水平。结果显示：与对照组比较，交警组精子活动能力降低（Ｐ＜０．０５），精子琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性明显抑制（Ｐ＜０．００１）。而且ＳＤＨ活性与血铅水平呈负相关。认为交警精子活动能力下降可能和铅干扰精子线粒体能量代谢有关。

用计算机辅助精子分析系统测定TCDD对大鼠精子运动能力的影响

利用计算机辅助的精子分析系统（ＣＡＳＡ）研究了２，３，７，８—四氯二苯－Ｐ－二口恶口英（ＴＣＤＤ）对大鼠精子运动能力的影响。给２１天龄幼鼠腹腔注射ＴＣＤＤ０．１、１．０和５．０μｇ／ｋｇ，对照组注射等量体积的溶媒。在性成熟后（９０天），用扩散法收集附睾尾精子，测定其运行速度（ＶＣＬ、ＶＳＬ、ＶＡＰ）、运动方式（ＳＴＲ、ＬＩＮ、ＢＣＦ、ＡＬＨ、ＭＡＤ等）及活动精子的比率（Ｍｏｔ％）。结果表明，ＴＣＤＤ１．０μｇ／ｋｇ组，精子的运动速度明显低于对照组（ＶＣＬＰ＜０．０５；ＶＡＰ、ＶＳＬ、ＢＣＦＰ＜０．０１），０．５μｇ／ｋｇ时精子的运动速度、及前向性和直线性运动性能均明显降低（Ｐ＜０．０１），活动精子的比率也明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。本研究结果为ＴＣＤＤ的男性生殖毒理学研究。

三氧化二砷对大鼠精子生成及精子运动能力的影响

目的 :探讨药理浓度的三氧化二砷 (As2 O3 )对大鼠精子生成和精子运动能力的影响。方法 :As2 O3 大鼠腹腔注射 ,二周后对大鼠进行睾丸精子头计数 ,并计算每日精子生成量。应用计算机辅助精子分析系统对附睾精子活动能力进行检测。结果 :每日 2mg/kg、4mg/kg组精子头数和每日精子生成量较对照组有所减少 ,8mg/kg则明显减少 ;对附睾精子扩散液进行检测发现三种剂量As2 O3 对VCL、VSL及VAP均有明显影响 ,但对精子运动的其他指标ALH、BCF、LIN、WOB及STR的影响均无统计学差异。结论 :As2 O3 可引起精子生成量的减少和精子运动能力的降低而产生男 (雄 )性生殖毒性。

黄精赞育胶囊优选方对弱精子症大鼠精子运动能力的影响

目的 :研究黄精赞育胶囊优选方对弱精子症大鼠精子运动能力的影响。方法 :采用雷公藤多甙制备大鼠弱精子症模型 ,通过计算机辅助精子分析系统 (CASA)观察黄精赞育胶囊优选方对精子运动速度和运动方式的影响。结果 :优选方中剂量组可显著提高精子密度、活力、活率及运动速度 (VCL、VSL、VAP)。其疗效与黄精赞育组相似 ,且优于大剂量、小剂量和五子衍宗丸组 ,而优选方三种剂量对精子运动方式 (LIN、STR、WOB、ALH、BCF、MAD)均无显著改善。结论 :黄精赞育胶囊优选方具有提高精子密度、活力、活率及运动速度的作用。

精子运动能力检测系统中图像分割方法的选取与算法实现

介绍了精子运动能力检测系统中精子图像分割方法选取中的问题及应对的方法。重点 介绍了最大类间方差阈值选取法的算法原理。

弱精症精子SOD2和PRDX6的表达变化及其与精子运动能力的相关性分析

目的探究活性氧(reactive oxygen species,ROS)对精子的损伤作用,分析抗氧化蛋白超氧化物歧化酶2(SOD2)和过氧化物酶6(PRDX6)在弱精症患者精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法选取2020年1-11月我中心收集的弱精症患者精液标本(PR<32%,PR+NP<40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)84例,正常精液标本(PR≥32%,PR+NP≥40%,精子密度≥15×10^(6)/mL)55例。通过精液计算机辅助分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)检测精液常规参数及精子运动参数;不同浓度H_(2)O_(2)处理正常精子后通过CASA检测精子活力和运动参数变化,伊红染色检测精子存活率变化,Western blot检测精子SOD2和PRDX6表达变化;运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot同时对弱精症组精子和正常组精子SOD2和PRDX6表达进行定量检测,进一步统计分析SOD2和PRDX6的表达变化及其与精液参数的相关性。结果CASA检测结果显示精子活力在0.10、0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后显著降低;精子运动参数中曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)、平均路径速率(VAP)和平均角位移(MAD)在0.05、0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后剂量依赖式降低,侧摆幅度(ALH)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)和前向性(STR)在0.10、0.35 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低;伊红染色结果显示精子存活率在0.35、1.00 mmol/L H_(2)O_(2)处理后降低,而Western blot检测结果显示精子SOD2和PRDX6表达呈H_(2)O_(2)(0.10、0.35和1.00 mmol/L)剂量依赖式增高。RT-qPCR检测结果显示弱精症组精子SOD2[(0.297±0.038)vs(0.895±0.140),P<0.01]与PRDX6[(0.743±0.107)vs(1.416±0.163),P<0.01]mRNA相对表达量低于正常组。Western blot结果显示弱精症组精子SOD2[(0.689±0.147)vs(1.466±0.212),P<0.01]与PRDX6[(0.726±0.084)vs(1.183±0.100),P<0.01]蛋白相对表达量低于正常组。相关性分析结果显示精子SOD2 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.267,P<0.01)和总活力(r=0.329,P<0.01)呈正相关;PRDX6 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率(r=0.453,P<0.01)、总活力(r=0.476,P<0.01)、STR(r=0.270,P<0.01)、VCL(r=0.313,P<0.01)、VSL(r=0.349,P<0.01)、VAP(r=0.410,P<0.01)呈正相关。结论ROS可降低精子活力、运动能力和存活率并上调精子SOD2和PRDX6表达;弱精症患者精子SOD2和PRDX6表达下调且其表达与精子运动能力正相关。

PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响

旨在研究PNPLA5基因对雄性大鼠繁殖性能的影响。本研究以PNPLA5敲除型雄性大鼠(KO)为试验组,野生型大鼠(WT)为对照组,分别饲喂普通饲料,并采集大鼠附睾精子及睾丸组织。利用繁殖试验检测配种后雌鼠的妊娠率及平均产仔数,精子运动性能分析检测精子运动能力,Western blot检测精子中线粒体功能相关细胞色素C(cytochrome C,Cytc)与细胞色素C氧化酶亚基IV(cytochrome c oxidase subunit IV,COX IV)的表达水平,HE染色检测睾丸组织形态。结果表明:与野生型雄性大鼠相比,PNPLA5敲除型雄鼠与野生型雌鼠配种后,雌鼠的妊娠率极显著下降(P<0.01);精子的曲线运动速度显著降低(P<0.05)及渐进运动精子的百分率极显著降低(P<0.01);PNPLA5敲除型大鼠精子中细胞色素C表达量下调,细胞色素C氧化酶亚基IV表达量上调,但差异均不显著(P>0.05);PNPLA5基因缺失引起大鼠睾丸组织结构疏松,曲细精管中各阶段生精细胞排列紊乱,上皮细胞脱落至管腔。综上表明,本研究发现PNPLA5基因敲除能够引起雄性大鼠繁殖能力降低,为家畜繁殖研究提供重要的参考依据。

槟榔碱对人体外精子运动能力的影响

目的:研究槟榔碱(Ar)对人体外精子运动能力的影响。方法:优选50例正常男性精液与3组不同浓度(10、50、100μg·mL-1)Ar溶液共同孵育,以精子优选液为对照组,在共同孵育0.5、1、2h后用计算机辅助精子分析(CASA)系统对精子活率(Mot)、(a+b)级前向运动精子百分率([a+b)PM]、曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)进行检测。结果:精液与10μg·mL-1Ar溶液共同孵育1h后的Mot与对照组比较有显著性差异(P<0.01),2h后Mot、VCL与对照组比较均有显著性差异(P<0.01);精液与50、100μg·mL-1Ar共同孵育0.5、1、2h后的Mot、(a+b)PM、VCL、VSL与对照组比较均有显著性差异(P<0.01或P<0.05),表明Ar浓度越高,作用时间越长,精子运动能力越低。结论:Ar能降低正常男性体外精子运动能力,其毒性与浓度时间成正比。

补肾活血方含药血清对弱精子症精子运动能力的影响

目的研究体外添加补肾活血方含药血清对弱精子症精子运动能力的影响。方法将弱精子症患者精子与补肾活血方含药血清共培养，应用精子运动CASA分析观察补肾活血方对精子运动能力的影响。结果与含药血清共培养后，运动精子率，前向性运动精子率、平均路径运动速度、曲线运动速度、精子头部侧摆幅度和鞭毛摆动频率均显著提高。结论体外添加补肾活血方含药血清能提高精子运动能力。

刺五加水提物对人精子体外运动活力的影响

目的研究刺五加水提物对正常男性精子体外运动活力的影响,探讨其可能的作用机制。方法将20例正常男性的精子通过上游优化法处理后,一组精子加入10 mg.mL-1的刺五加水提物,另一组加入等量的Ham’s F10培养液作对照。应用计算机辅助的精子分析系统,分别测定孵育0.5,1,2,3,4,5 h后人精子各运动参数。结果随着时间的延长,加入Ham’s F10培养液的精子活动能力有不同程度的下降;加入10 mg.mL-1的刺五加水提物后,不同时段精子的运动能力均较对照组明显提高,精子存活率、前向运动精子百分率、曲线运动速度、直线运动速度和平均路径速度与对照组比较,均明显改善(均P<0.05)。结论刺五加水提物能明显提高正常男性精子的体外存活率和运动能力。

CRISP2基因及蛋白在弱精子症患者中的表达及其临床意义

目的弱精子症作为男性不育的重要因素之一,影响着全球15%的育龄夫妇,但其发病机制尚待阐明。课题组前期研究通过基因芯片技术发现CRISP2在弱精子症患者精子中表达明显下调,但其临床意义仍有待进一步阐明。方法收集2013年1月至2013年6月的弱精子症患者及健康男性精液标本各24例,检测这些精液样本中CRISP2基因及蛋白表达水平,探讨其与精子形态、运动能力及生育预后的相关性。结果弱精子症患者精液标本中CRISP2蛋白表达水平明显低于正常对照组,而CRISP2基因mRNA表达水平并无明显统计学差异。相关性分析显示CRISP2蛋白表达水平与形态正常精子率(r=0.6182,P=0.0037)及前向运动能力(r=0.6309,P=0.0029)呈明显正相关。经过密切随访,CRISP2蛋白高表达患者配偶受孕率明显高于CRISP2蛋白低表达患者(80.0%vs 20.0%,P=0.0230)。结论 CRISP2蛋白表达水平与弱精子症患者的精子形态、前向运动能力呈正相关,且CRISP2蛋白低表达的弱精子症患者生育预后不良,提示CRISP2作为弱精子症患者治疗新靶点的潜在价值。

TEKT3在特发性弱精子症患者精子中的表达

目的:探讨特发性弱精子症患者精子中TEKT3表达的特点。方法:采用非连续密度梯度离心法分离、纯化正常对照组和弱精子症组精子标本各35份,分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中TEKT3 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,弱精子症组TEKT3 mRNA和蛋白表达均显著降低(t=9.610、10.090,P<0.001),相关性分析显示弱精子症组精子TEKT3 mRNA和蛋白表达水平与前向运动精子率呈正相关(r=0.684,P=0.001;r=0.483,P=0.013)。结论:TEKT3表达降低可能在特发性弱精子症发病中具有重要作用。

硫氧还蛋白-3基因及蛋白在弱精子症患者中的表达及其临床意义

目的探讨硫氧还蛋白-3(Trx-3)与特发性弱精子症发生的关系。方法收集2012年9月-2013年12月的弱精子症患者及健康男性精液标本各30例,检测这些精液样本中Trx-3基因及蛋白的表达水平,探讨其与精子形态、运动能力及生育预后的相关性。结果弱精子症患者精液标本中Trx-3蛋白表达水平明显低于正常对照组,而Trx-3基因m RNA表达水平并无明显差异。相关性分析显示Trx-3蛋白表达水平与形态正常精子率(r=0.624,P=0.004)及前向运动能力(r=0.739,P=0.002)呈明显正相关。经过密切随访,Trx-3蛋白高表达患者配偶受孕率明显高于Trx-3蛋白低表达患者。结论 Trx-3蛋白表达水平与弱精子症患者的精子形态、前向运动能力呈正相关,且Trx-3蛋白低表达的弱精子症患者生育预后不良,提示Trx-3作为弱精子症患者治疗新靶点的潜在价值。

“精子危机”渐行渐近

环境污染、工作压力以及生活方式的改变，导致精子数量下降、精子运动能力降低和精子形态异常，降低男性的生育能力。数据显示，1981～1996年。我国男性的精液质量以每年1％的速度下降，精子活动率和正常形态精子比率分别下降了10．4％和8．4％。精子质量和密度下滑是不可逆的，很难再恢复到从前的水平。1990年精子密度每毫升6600万个算正常，1999年降低到每毫升2000万个算正常,