氯、锌离子对猪精子钙通道和若干酶活调控作用的研究

研究了氯离子、锌离子等对猪精子钙通道的调控作用及其机理。将由健康公猪采得的精液经纱布过滤后分为3组,每组6个重复。第1组精液不加任何物质,第2、3组精液分别加氯化钠液和硫酸锌液,混匀并静置2.5h后,观测精子活力和精子、精清中离子含量与酶活。结果表明:(1)在猪精液中分别加适量的氯离子、锌离子,能刺激精清中钙离子向精子中转移,使得精子内钙离子含量显著地(P<0.05)增加,精清中钙离子有一定程度的(P>0.05)减少;(2)加锌或加氯离子,精子活力极显著(P<0.01)地增强;(3)加锌离子组,精子内碱性磷酸酶、碳酸酐酶、腺苷酸环化酶活性极显著地(P<0.01)提高,cAMP含量极显著地(P<0.01)增多;精清内碱性磷酸酶、腺苷酸环化酶活性极显著地(P<0.01)提高,cAMP含量显著地(P<0.05)增多;(4)加氯离子组,精清内碱性磷酸酶、腺苷酸环化酶活性极显著地(P<0.01)提高,精清内cAMP含量显著地(P<0.05)增多;但精子内碳酸酐酶、腺苷酸环化酶活性和cAMP含量都无显著的(P>0.05)变化。上述结果表明:猪精液加适量锌离子或氯离子,对精子细胞钙通道功能可能都有上调作用,并能提高精液中碱性磷酸酶、腺苷酸环化酶、碳酸酐酶活性,增加精液中cAMP含量,增强精子活力。

人精子CatSper1 mRNA表达与精子活力的相关性研究

目的研究不同精子活力的人精子中精子特异性阳离子通道蛋白1(CatSper1)mRNA的表达差异,以及其与精子活力相关指标的相关性。方法分别收集少、弱精症患者精液标本和健康人对照精液标本各25份,用Trizol试剂提取精子中的总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CatSper1 mRNA表达改变。结果少、弱精症组CatSper1 mRNA表达水平与健康人对照组相比,差异具有统计学意义[(0.54±0.01)vs(1.13±0.05),P<0.01]。CatSper1 mRNA表达与精子活率以及a+b级精子百分率之间呈显著正相关。结论人精子CatSper1 mRNA表达与人精子活力呈正相关。

CatSper1在精索静脉曲张模型大鼠精子中的差异表达及左卡尼汀对其的保护作用

目的:通过制备精索静脉曲张大鼠模型,检测其附睾精子中精子特异性钙通道(CatSper1)的表达,观察左卡尼汀对大鼠精子CatSper1的影响。方法:70只雄性大鼠随机分为7组,每组10只。分别为对照组(A组),精索静脉曲张组(B组),精索静脉曲张+生理盐水组(C组),精索静脉曲张+小、中、大剂量左卡尼汀组(D、E、F组)和F+延长喂养14 d组(G组)。手术结扎部分左肾静脉制备精索静脉曲张大鼠模型,12周后,C组给予生理盐水1 ml/d,D、E、F组分别用左卡尼汀小[0.05 g/(kg·d)]、中[0.1 g/(kg·d)]、大[0.2 g/(kg·d)]剂量灌胃35 d,G组在F组基础上延长灌胃14 d;实验结束后处死大鼠,进行精子参数分析,应用RT-PCR以及Western印迹分别检测精子中CatSper1 mRNA及蛋白表达情况。结果:与A组比较,B组a+b级精子百分率、精子活率及浓度均不同程度下降(P<0.01),B组精子CatSper1 mRNA及蛋白相对表达量均明显下降(1.44±0.67 vs 0.71±0.38;1.87±0.67 vs 0.84±0.42,P<0.01)。与C组比较,应用左卡尼汀后,各组精子浓度无明显增加,a+b级精子百分率、精子活率以及精子CatSper1 mRNA及蛋白表达含量明显增高,尤其大剂量组F、G组增高更加明显(P<0.01)。与F组比较,G组延长应用2周左卡尼汀,精子CatSper1 mRNA及蛋白表达量无明显增加(P>0.05)。结论:精索静脉曲张模型大鼠精子中CatSper1表达下降,应用左卡尼汀后,CatSper1的表达量及a+b级精子百分率、精子活率明显增加。

生精散对大鼠精子特异性钙通道的影响

目的:研究生精散对雷公藤多甙所制备弱精子症模型大鼠精子特异性钙通道(CatSper1)的影响。方法:60只雄性大鼠随机分为正常对照组、雷公藤多甙组、0.9%氯化钠溶液组及生精散小、中、大剂量组,每组10只。正常对照组每日灌胃0.9%氯化钠溶液1mL/d,其余各组雷公藤多甙20mg.kg-1.d-1,21d后0.9%氯化钠溶液组每日灌胃0.9%氯化钠溶液1mL/d,生精散小(0.01g.kg-1.d-1)、中(0.02g.kg-1.d-1)、大剂量(0.03g.kg-1.d-1)组分别按体质量给予灌服生精散,连续14d,进行精液常规分析,用RT-PCR检测大鼠精子CatSper1的表达。结果:与0.9%氯化钠溶液组比较,生精散各组精子密度、a+b级精子百分率、精子存活率均显著提高(P<0.01),生精散小剂量组CatSper1无明显变化,中、大剂量组CatSper1显著提高(P<0.01)。结论:雷公藤多甙可成功制备弱精子症大鼠模型,中剂量、大剂量生精散可以通过提高CatSper1基因含量,提高精子密度、a+b级精子百分率及精子存活率,从而达到治疗弱精子症的目的。