DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。

精斑鉴别技术研究进展

斑痕类型鉴别是法医物证检验的重要步骤。精斑是最常见的人体斑痕类型之一,现场精斑的确认对案件类型和犯罪事实有重要的证明作用。传统的精液/精斑检测主要依靠精子镜检、酶活化方法和抗原抗体反应,这些基于形态学的或蛋白质酶学的检测方法对微量、混合、降解及污染检材的组织来源鉴别存在着明显的不足。近年来,随着转录组学、表观遗传学的迅速发展,PRM1、PRM2等精液特异mRNA标记在精液/精斑鉴定的法医实践中得到了应用,组织差异DNA甲基化的研究也为疑难检材的组织鉴定开辟了新的途径。本文对精液和精斑的法医学组织鉴定进行综述,以期为相关研究提供参考。

Chelex100法和有机法联合应用检验微量精斑DNA

某日一女学生(16岁)在放学回家途中被犯罪分子强奸.现场提取卫生纸1份,在其边缘部位留有少许擦拭状斑迹,据受害人回忆,这是案发时犯罪分子曾用过并弃下的.

染色混合精斑涂片DNA检验方法的研究

建立了染色混合精斑涂片DNA的提取方法,通过两步扩增的技术与垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色法,成功检测了3个STR位点.结果显示,所有染色涂片DNA分型均与对照血样一致,苏木素-伊红(HE)染色比酸性复红-美蓝(Baecchi)染色对DNA的降解作用要小;涂片灵敏度检验可达到少于10个精子,且室温保存一年以内的涂片其灵敏度光显著差异.该方法简单、快速、可靠,为染色混合精斑涂片的PCR分析提供了新方法.

用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。

用ELISA检测精液及精斑中精子抗原的研究

本实验应用单克隆抗人精子抗体和酶标记羊抗人精子抗体,采用ELISA方法确定精子抗原成份的存在。对10份新鲜精液,15份精斑进行了验测,其结果阳性率为100%。新鲜精液(精子数约10,000万个/ml)稀释100万倍,精斑浸出液稀释50万倍,均可出现阳性。对唾液斑、尿斑、乳汁斑、阴道斑、汗斑及输精管结扎的精液均为阴性。实验结果表明,本法检验精子抗原具有灵敏度高,特异性好的优点。

用双抗夹心间接ELISA方法检测p30确证人类精斑

检测p30确证精斑有下列几种方法：免疫扩散，免疫电泳，交叉免疫电泳，胶乳凝集抑制试验，薄层免疫分析和酶联免疫吸附试验(ELISA)。这些方法各有优缺点，就灵敏度而论，则以酶联免疫吸附试验为高。最近，我们在国家自然科学基金会的资助下，建立了双抗夹心间接ELISA法来确证人类的精斑，获得了满意的结果，现报导如下：

单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定精斑G2m(n)因子

人类免疫球蛋白同种异型(human immuhoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统。在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定。关于人精液中同种异型因子的检测报道极少，我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道，我们应用抗G2m(n)单克隆抗体建立了测定精液及精斑G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。现报道如下。

甲硝唑、克霉唑对精斑混合斑前列腺特异抗原检验的影响

目的研究分析妇科用药甲硝唑、克霉唑对法医精斑混合斑前列腺特异抗原(PSA)检验结果的影响,同时测试金标PSA试剂条的灵敏度。方法在已知浓度、相同体积的精斑混合斑稀释液中,分别加入系列甲硝唑、克霉唑粉剂,制备成药物梯度浓度为0.022 6~0.153 2 g·mL^(-1)混合液,孵育后使用全自动化学发光免疫分析仪进行PSA定量检测,观察加药前后PSA浓度定量结果有无变化,同时进行金标法PSA检验。结果在已知浓度的PSA溶液中,加入甲硝唑、克霉唑粉剂量越大,药物浓度越高,定量检测PSA下降越明显,而克霉唑对PSA的检验影响更大;PSA定量值为7.399 ng·mL^(-1)时金标试剂条表现为弱阳性,PSA定量值为4.790 ng·mL^(-1)时,金标试剂条表现为阴性。结论甲硝唑(0.022 6 g·mL^(-1))、克霉唑(0.024 6 g·mL^(-1))均可精斑混合斑PSA检测值下降;金标法PSA试剂条灵敏度约为5 ng·mL^(-1),使用时应予以关注,以免漏检。

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.

a-萘磷酸钠-坚牢兰B显现精斑指印研究

1987年英国法科学工作者B·H·Parkin采用琼脂制板法显现精斑指印，该法有一定的作用，但同时也受到许多条件的制约．如琼脂板的尺寸，限制了显现范围．不能完全满足现场劫查中搜寻、显现精斑指印的需要．

Gm抗原检测用于精斑检验一例

安徽省某地人民检察院于1992年11月底送来一强奸案某些物证检材，包括受害人彭某内裤带斑迹布片，彭某和被告人钱某唾液痕、血痕纱布。要求鉴定被害人彭某内裤片上的斑迹是否为人精斑：如果是精斑，则是否为钱某所遗留。

混合斑中无精子精斑DNA检验的研究

在日常性侵犯案件的DNA 检验中,经常遇到无精子精斑的混合斑,按照常规的二步消化分离法提取DNA进行STR检验则难以成功,对于此类案件常常不予检验,不能充分发挥DNA在案件中的证据作用.籍针对此类案件以Y-Plex6试剂盒对无精子精斑及其混合斑进行了检验,取得成功,现报道如下:……

应用马铃薯汁凝集素作精斑确证试验的探讨

本文对用马铃薯汁凝集素作精斑确证试验进行了实验探讨。结果发现,检材浸液采用沸水浴加热处理,可除去非精斑检材的非特异抑制的干扰。用本法检测较新鲜的精斑(1年内),特异性好,准确性高,其灵敏度虽逊于他法,但因马铃薯易得,适于基层应用。

精斑定性检验52例回顾分析

在性犯8罪物证检验中,确认精斑存在与否是非常关键的.检验精斑的方法很多,如P30检验、抗人精血消沉淀环及琼脂糖扩散试验等,其特点各异.最近笔者以Dot-ELISA进行P30检验、抗人精血清沉淀环试验及沉渣涂片镜检精子3种不同的方法对52例性犯罪案件进行了检验并做了统计分析,报告如下1 检验方法(1)P30检验,以DO-ELIA直接法进行(HRP-P30购于公安部第二研究所)(2)沉淀环试验,所用抗人精血清效价为1:2000,分别购于公安部第二研究所及淮北市公安局(3)精子检验,沉渣涂片,用美蓝染色后直接镜检,一般可用化人精血清沉淀环试验后的沉渣涂片。