精氨酸残基和赖氨酸残基对大鼠血红素加氧酶-1催化功能的影响

目的研究和探讨大鼠血红素加氧酶鄄1(RHO鄄1)中保守的碱性氨基酸精氨酸残基和赖氨酸残基对该酶催化功能的影响。方法应用定点诱变制备20种RHO鄄1的变异型酶质粒,其中RHO鄄1中保守的碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸被置换成谷氨酸,将它们在大肠埃希菌中表达并纯化后,用光谱扫描方法在以NADPH-细胞色素P鄄450还原酶提供电子的模拟体内反应体系下测定变异型酶和野生型酶的活性,从而观察变异型酶的活性是否发生改变。结果变异型酶R35E、K39E、R44E、R136E、K148E、K149E、K153E、R185E和K196E对血红素的降解速度低于野生型酶。结论R35等9个精氨酸残基和赖氨酸残基在参与RHO鄄1催化血红素降解的反应中对该酶的催化功能有着重要影响。

转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤

目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。

小分子对氯化血红素催化性能的影响

以氯化血红素 (hemin)催化H2 O2 氧化邻苯三酚红反应为指示反应 ,研究了氨基酸、有机碱、表面活性剂等多种小分子对hemin催化性能的影响 .发现L 精氨酸、L 组氨酸、L 苯丙氨酸、L 色氨酸对hemin的催化性能有明显的增强作用 ,并使其最适pH更接近天然过氧化物酶的最适pH ;具有芳香结构的阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠胶团 (SDBS)也可提高hemin的催化性能 ,且与L 精氨酸、L 组氨酸、L 苯丙氨酸有明显的协同效应 .该结果可为hemin与保守氨基酸衍生表面活性剂胶团模拟过氧化物酶研究提供科学依据 .

氯化高铁血红素对ADMA所致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究氯化高铁血红素(Hemin)对非对称二甲基精氨酸(ADMA)诱导的血管内皮损伤的保护作用及其与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),MTT法检测Hemin(5～20μmol/L)对ADMA(3～30μmol/L)诱导细胞损伤的影响,Western blot法检测胞内MMP-9蛋白表达水平,RT-PCR技术评价MMP-9、iNOS及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)mRNA的表达量,ELISA法检测细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化。结果 ADMA(3～30μmol/L)能使细胞活性降低,其损伤呈剂量依赖性,10μmol/L的ADMA显著升高了MMP-9、iNOS、MCP-1和TNF-α的表达水平(P<0.01)。而10μmol/L的Hemin预处理能明显干预ADMA对细胞活性的影响,并能下调ADMA诱导的MMP-9、iNOS、MCP-1和TNF-α的表达,与对照组相比差异具有显著性(P<0.01)。结论 Hemin对ADMA所致内皮细胞损伤有保护作用,且与MMP-9和iNOS水平降低有密切关系。

L-精氨酸对兔肺缺血再灌注时血红素氧合酶-1的影响

目的探讨L1广精氨酸对兔肺缺血再灌注时血红素氧合酶-1（HO-1）的影响。方法健康日本大耳白兔20只，雌雄不拘，体重1．7～2．6kg，随机分为2组，肺缺血再灌注组（IR组）和L-广精氨酸治疗组（L-Arg组），每组10只。建立兔单肺原位缺血再灌注损伤模型，L-Arg组肺缺血前20min耳缘静脉注射LArg溶液100mg／kg。采用原位杂交方法测定兔肺组织HO-1的表达；计算肺组织湿／干重比（W／D）及损伤肺泡百分数（IAR）；电镜下观察肺组织超微结构。结果HO-1在两组肺血管内皮、部分血管平滑肌、外膜层及部分气道上皮均有表达；与IR组比较，L-Arg组HO-1水平升高，W／D及IAR降低（P〈0．05）；L-Arg组肺组织形态学异常改变轻于IR组。结论L广精氨酸可通过上调肺组织HO-1的表达，增强肺组织HO-1的活性，减轻兔肺缺血再灌注损伤。

精氨酸血红素治疗急性间歇性卟啉病六例

例1患者女，25岁。主因间断乏力、红茶色尿16个月，周期性腹痛、腰背痛14个月，腹痛、恶心、呕吐1d于2011年2月8日就诊于河北省人民医院消化科。入院前曾多次腹痛、腰背痛，排便、排气减少，伴恶心、呕吐，全身乏力不适，心动过速，尿液为红茶色，发作诱因多为月经来潮、劳累、上呼吸道感染，就诊于多家医院，均诊断为肠梗阻，予对症治疗后好转。后腹痛再次发作，因尿液呈橘红色，在阳光下晒1h后变为暗红色或酒红色，怀疑为卟啉病，

异甘草素减轻重症急性胰腺炎小鼠心肌损伤机制

目的探讨异甘草素(ISL)对重症急性胰腺炎(SAP)心肌损伤的保护机制。方法将雄性小鼠36只随机分为对照组、SAP组和ISL组,每组12只,SAP组和ISL组采用L-精氨酸制备小鼠SAP模型,ISL组首次注射精氨酸24h后腹腔注射ISL100mg/kg,对照组和SAP组给予等量DMSO。检测各组血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及心脏组织超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽活性、丙二醛水平。采用Western blot法检测心脏组织中核转录因子-E2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶(HO-1)蛋白表达水平。结果 SAP组小鼠心肌细胞肿胀,部分细胞崩解,心肌纤维结构消失,有较多炎性细胞浸润,ISL组心肌损害减轻。与对照组比较,SAP组SOD及谷胱甘肽活性明显降低,丙二醛及Nrf2、HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与SAP组比较,ISL组cTnI、CK-MB、LDH、丙二醛水平明显下降,SOD[(102.1±10.4)U/mg vs (81.2±7.7)U/mg]及谷胱甘肽活性[(16.2±2.8)U/mg vs (11.2±3.6)U/mg]明显升高,且更进一步激活了Nrf2、HO-1蛋白水平表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ISL可能通过激活心脏组织中Nrf2/HO-1通路,减轻SAP诱导的心肌损伤。

便秘间断腹痛肠梗阻红色尿1例报道

卟啉病在临床上比较少见，常表现为多个系统受损，没有特异的症状和体征。临床医师对卟啉病缺乏认识和经验不足，是导致漏诊和误诊的主要原因。卟啉病一旦发作，国内均采用高糖及对症支持治疗。本文采用精氨酸血红素（Normosang）成功抢救危重血卟啉病1例，在国内危重症血卟啉病治疗方面积累了一些经验。

西地那非对大鼠海绵体组织亚铁血红素氧化酶1(HO-1)活性的影响

为评估枸橼酸西地那非处理的大鼠海绵体组织中的亚铁血红素氧化酶-1（HO-1）的活性，Aziz MT等人进行了一项研究，研究者将192只SD雄性大鼠平均分为4组。第1组为对照组给予常规的动物饮食；第2组通过胃管灌入枸橼酸西地那非；第3组通过胃管灌入枸橼酸西地那非和HO抑制剂（锌原卟啉，ZnPP）：第4组胃灌注西地那非和一氧化氮合酶（NOS）抑制剂L-硝基精氨酸甲基酯（L-NAME）。在给药后的0．5h、1h、2h和3h分别从各组处死12只大鼠。

家兔动脉粥样硬化进程中内皮依赖性因子的变化及其相互关系研究

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO -1) /一氧化碳(CO)系统与一氧化氮合酶(NOS) /一氧化氮(NO)在动脉粥样硬化中的变化、相互关系及对动脉粥样硬化进程的影响。方法 家兔予以高胆固醇饮食(n=8)以及在高胆固醇饮食的同时经饮水给予L -精氨酸(n=8)或亚硝基左旋精氨酸甲酯(n=8),或经腹腔注射血红素L -赖氨酸盐(n=8)或锌原卟啉9 (ZnPP- IX) (n=8 ),共10周。结果与对照组比较,胆固醇组主动脉NO生成量显著减少,CO生成则明显增加,NOS活性显著降低(P均<0 .01),而HO -1表达升高,主动脉斑块面积达(40. 2±8 .9)% 。与胆固醇组比较,外源性血红素L -赖氨酸盐干预组的主动脉内膜斑块面积[ (26. 6±9 .2)% ]明显缩小,主动脉CO的生成量和HO- 1表达明显升高(P<0. 01),但NOS活性与NO产量较正常对照组显著降低(P<0 .01),与胆固醇组比较则无显著差异;与胆固醇组比较,外源性L 精氨酸显著升高主动脉cNOS活性,增加NO生成量,主动脉斑块面积[ (28. 1±7 .7)% ]明显缩小(P均<0. 01),而HO -1的表达和CO的生成较正常对照组显著升高,与胆固醇组相比差异无统计学意义。与胆固醇组比较,血红素L 赖氨酸盐干预组、L 精氨酸组的主动脉组织内c- myc及c- fos的mRNA和蛋白表达均显著降低,而ZnPP组和亚硝基左旋精氨酸甲酯组则无明显差异。