精氨酸酶1在食管癌患者外周血的表达及其临床意义

目的检测精氨酸酶1(arginase1,Arg1)在食管癌中的表达,分析其与髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressorcells,MDSCs)消长的关系,探讨癌症患者机体免疫抑制状态的可能机制。方法应用流式细胞术检测30例食管癌患者PBMC中的MDSCs比例;实时荧光定量PCR检测PBMC中Arg1、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆Arg1,IL-6和TNF-α含量。结果食管癌患者外周血PBMC中MDSCs比例及Arg1的mRNA水平均明显高于健康对照组(P<0.05),而IL-6和TNF-α的mRNA水平均低于健康对照组(P<0.05)。食管癌患者血浆Arg1含量高于健康对照组(P<0.05),而IL-6和TNF-a含量与健康对照组相比无明显差异(P>0.05)。此外,食管癌患者Arg1 mRNA水平和蛋白水平均与MDSC含量呈正相关(P<0.01)。结论 Arg1在食管癌患者外周血中的高表达与MDSCs水平和食管癌的发生、发展有着密切的关系,其检测将有助于临床食管癌的辅助诊断和预后判断。

重组人精氨酸酶1的表达、纯化及性质鉴定

精氨酸酶催化精氨酸水解生成鸟氨酸和尿素,是哺乳动物尿素循环的关键步骤之一,在机体代谢方面起着重要的作用。在分类上精氨酸属于半必需氨基酸,但在快速增长的组织,特别是肿瘤组织里却属于必需氨基酸。精氨酸酶可以通过分解精氨酸对肿瘤细胞进行营养剥夺,进而起到抑制肿瘤细胞生长的作用,与此同时却较少影响正常组织代谢,因此可能具有良好的应用前景。精氨酸酶包括精氨酸酶1和精氨酸酶2两种,精氨酸酶1主要表达于肝脏,参与肝脏尿素循环。本研究在获得人精氨酸酶1全长c DNA的基础上,将其克隆至原核高表达载体,通过自动诱导系统进行了人肝脏精氨酸酶1重组蛋白(His10-arginase1)的表达。通过Ni-NTA亲和层析和Mono Q阴离子交换层析纯化,重组人精氨酸酶1的产量为每升菌液48.5 mg,其纯度超过95%。通过酶活检测,重组人精氨酸酶1活性可达到128 U/mg。与已报道的精氨酸酶相比较,我们得到的重组人精氨酸酶1具有与之相当的酶活性。本研究为将来进一步深入了解精氨酸酶的生化功能及与相关疾病的关系奠定了基础。

4T1乳腺癌细胞培养上清液促进ANA-1巨噬细胞精氨酸酶1分泌

目的通过模拟体内乳腺癌微环境,探讨4T1小鼠乳腺癌细胞培养上清液在体外对ANA-1巨噬细胞中精氨酸酶1(Arg-1)含量的影响。方法用添加或不添加4T1培养上清液培养ANA-1巨噬细胞,分别在6、8、10、24 h用光学显微镜观察ANA-1细胞形态变化。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、Arg-1 mRNA水平,免疫荧光染色、Western blot法检测i NOS、Arg-1蛋白水平。结果实时荧光定量PCR结果显示,添加4T1上清液的巨噬细胞i NOS mRNA表达水平较对照组减少,Arg-1 mRNA水平较对照组显著升高,且在8 h最显著。与对照组相比,免疫荧光染色和Western blot实验也发现Arg-1表达增强,但添加或不添加4T1培养上清液的细胞i NOS的表达差异不明显。结论 4T1乳腺癌细胞培养上清液诱导ANA-1细胞Arg-1分泌增加。

精氨酸酶1在原发性肝癌及肝转移癌鉴别中的作用

目的:探讨精氨酸酶-1(Arg-1)在原发性肝癌(PHC)和肝转移癌(HM)鉴别中的意义。方法:123例肝癌患者行超声引导下细针穿刺活检,标本制作成细胞块进行免疫组化染色,观察Arg-1表达情况。所有患者行手术切除后进行组织病理学诊断,结合细胞学、血清肿瘤标记物、临床及影像学随访结果进行最终判定。计算采用Arg-1鉴别PHC和HM的敏感度和特异性。结果:123例患者中PHC 78例,HM 45例。在PHC患者中,Arg-1呈高表达(83.3%)且以强染色为主(60.3%),高、中度分化肝细胞癌患者中阳性表达率(92.9%)高于低分化患者(76.9%),在胆管细胞型肝癌患者中不表达,在混合型肝癌患者中阳性表达率为75%;在HM患者中,Arg-1阳性表达率较低(8.9%),存在于结直肠癌、胰腺癌、乳腺癌肝转移患者中且均为弱染色,其他原发部位肝转移患者未见Arg-1阳性表达。Arg-1用于PHC和HM鉴别的敏感度为83.3%,特异性为91.1%。结论:细针穿刺活检标本行Arg-1免疫组化染色用于PHC和HM鉴别的敏感度和特异性均较高,值得进一步推广。

激肽原1、精氨酸酶-1在儿童川崎病急性期外周血中的表达及临床意义

目的:检测急性期川崎病(KD)患儿外周血中激肽原1(KNG1)、精氨酸酶-1(Arg-1)的表达并探讨二者的临床意义。方法:选取深圳市儿童医院2020年12月1日至2022年12月31日确诊为川崎病的117例患儿进行研究。根据是否合并冠状动脉病变(CAL)将KD患儿分为CAL组(n=53)和非冠状动脉病变组(NCAL)组(n=64)。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测急性期KD患儿外周血KNG1及Arg-1水平。应用二元Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析急性期KD患儿合并CAL的危险因素及KNG1、Arg-1对其的预测价值。结果:CAL组的KNG1及Arg-1水平均高于NCAL组(P<0.01)。多因素Logistic回归分析提示KNG1、Arg-1和中性粒细胞百分比(N%)是KD并发CAL的独立危险因素。ROC分析显示,KNG1对CAL的最佳预测值为1.536 ng/mL,曲线下面积(AUC)为0.823(95%CI 0.750~0.896),而Arg-1≥7.028 ng/mL可用于预测CAL的发生,AUC为0.862(95%CI 0.792~0.931),N%对KD并发CAL的最佳预测值则为54.7%,AUC为0.610(95%CI 0.507~0.712)。此外还发现与单项指标相比,KNG1联合Arg-1及N%对急性期KD患儿并发CAL的预测价值最大(AUC=0.929,95%CI 0.881~0.977),灵敏度和特异度分别为84.9%和92.2%。结论:急性期KD患儿血清中高表达的KNG1和Arg-1均是发生CAL的独立危险因素,可能参与KD并发CAL的发生和发展。

皮肤再生医疗技术对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶1表达水平的影响

目的探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法(MEBT)/湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)表达水平的影响。方法选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组,空白组、MEBO组、贝复新组和对照组,每组各12只,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型。模型建立后,MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(贝复新)纱布,对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖。通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化,以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化。结果(1)造模后第7、14天,MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组(P<0.05);(2)造模第3天,MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组,而Arg1 mRNA表达水平低于空白组;造模后第7、14天,与对照组相比,MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高,iNOS mRNA表达水平较低(P<0.05)。结论MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合,其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达,参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关。

脂多糖通过上调CYP1A1环氧化酶活性抑制巨噬细胞精氨酸酶-1的表达

目的探索细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导时巨噬细胞中精氨酸酶-1(Arginase-1,Arg-1)的调控作用及机制。方法使用LPS刺激小鼠单核巨噬细胞细胞系RAW264.7(RAW),分为0 h组、12 h组、24 h组(每组设3复孔,n=3),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测CYP1A1、Arg-1 mRNA及蛋白表达;构建阴性对照和高表达、敲除CYP1A1的RAW(NC/RAW、CYP1A1/RAW、CYP1A1 KO/RAW)细胞系以及突变CYP1A1羟化酶活性的RAW(CYP1A1m/RAW)细胞系,分为NC/RAW+LPS组、CYP1A1 KO/RAW+LPS组、CYP1A1/RAW+LPS组、CYP1A1m/RAW+LPS组,使用LPS刺激后检测Arg-1 mRNA、蛋白表达及信号转导和转录活化因子6(signal transducer and activators of transcription-6,STAT6)活化水平;使用STAT6抑制剂AS1517499作用CYP1A1敲除RAW细胞,设立NC/RAW+PBS+LPS组、NC/RAW+AS1517499+LPS组、CYP1A1 KO/RAW+PBS+LPS组、CYP1A1 KO/RAW+AS1517499+LPS组,检测Arg-1 mRNA、蛋白表达;使用CYP1A1环氧化酶活性抑制剂甲二氢愈创木酸(Nordihydroguaiaretic Acid,NDGA)及12(S)-羟基二十碳四烯酸[12(S)-HETE]作用RAW细胞,设立RAW+PBS+LPS组、RAW+12(S)-HETE+LPS组、RAW+NDGA+LPS组,检测Arg-1 mRNA、蛋白表达及STAT6活化水平。结果LPS可诱导RAW中的CYP1A1及Arg-1呈错峰高表达(P<0.05);CYP1A1高表达可抑制LPS诱导时RAW中Arg-1表达(P<0.05)及STAT6活化,敲除则可增强上述效应(P<0.05),而STAT6抑制剂AS1517499可消除CYP1A1敲除带来的增强效应(P<0.05);突变CYP1A1的羟化酶活性或使用其代谢产物12(S)-HETE刺激均不影响Arg-1表达(P>0.05),而使用CYP1A1环氧化酶抑制剂NDGA可增强Arg-1表达(P<0.05)及STAT6活化。结论CYP1A1可通过抑制LPS诱导时巨噬细胞中STAT6活化水平以降低Arg-1表达,但此效应与CYP1A1羟化酶活性及其致炎产物12(S)-HETE无关,而可能与CYP1A1环氧化酶活性有关。

肝细胞癌中精氨酸酶1和诱导型一氧化氮合成酶表达的临床意义及其相关性研究

目的探讨精氨酸酶1(Arg-1)和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在肝细胞癌(HCC)中表达的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测146例肝细胞癌及对应癌旁组织中Arg-1和iNOS的表达,采用χ2检验、Spearman等级相关分析、Kaplan-Meier生存分析及Cox多因素分析等统计学方法,分析两者表达的临床病理特征及其相关性和预后的关系。结果Arg-1和iNOS的阳性率分别为18.7%(23/123)和37.0%(54/146),明显低于癌旁组织100%(146/146)和93.8%(137/146),差异有统计学意义(χ^2=212.521,P<0.01,χ^2=104.276,P<0.01);两者表达存在一定的正相关性(r=0.331,P<0.01)。Arg-1低表达与术前血清甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤大小、分化程度、组织学类型及Edmondson分级相关,iNOS低表达与分化程度、Edmondson分级相关性(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,患者无复发生存期(RFS)Arg-1(+)组>Arg-1(-)组以及Arg-1(+)iNOS(+)组>Arg-1(+)iNOS(-)组>Arg-1(-)iNOS(+)组>Arg-1(-)iNOS(-)组(P<0.05);COX多因素分析显示年龄、肿瘤大小、Edmondson分级、脉管癌栓与RFS显著相关(P值均<0.05)。结论在HCC中Arg-1与iNOS表达存在正相关性,两者均可反映HCC的恶性程度,两者降低/缺失表达可能协同参与了HCC的发生与发展,联合检测Arg-1与iNOS对HCC的分化程度及预后判断可能具有一定的意义。

乙型肝炎组织精氨酸酶1的表达与其组织学分级的相关性

目的研究精氨酸酶1(Arg-1)在乙型肝炎组织中的表达及与炎症和纤维化分级的相关性。方法 HBsAg阳性肝穿刺及手术标本118例,按肝炎修正HAI记分法分为G0-G4级和S0-S4期,用Western blot检测Arg-1蛋白在G0,G4,S0,S4组中的表达;用免疫组织化学检测Arg-1在G0,G1,G2,G3,G4及S0,S1,S2,S3,S4各组中的表达。结果 Arg-1在G0、S0组高表达,在G4、S4组表达水平明显降低。Arg-1弥漫表达于G0、S0组肝细胞胞浆和部分肝细胞胞核,门管区肝细胞表达更为明显;随着炎症和纤维化程度增加,Arg-1表达强度逐渐降低,且表达强度与炎症和纤维化分级呈负相关(P<0.01)。结论 Arg-1与乙型肝炎病理生理过程密切相关,可以作为乙型肝炎组织学分级的一项参考指标。

BMSCs条件培养液诱导小胶质细胞分泌精氨酸酶1的初步研究

目的初步探讨BMSCs条件培养液对小胶质细胞(microglia,MGs)激活及其分泌精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)的影响。方法取4周龄SD大鼠股骨和胫骨骨髓,采用差速贴壁法分离培养原代BMSCs,行Vimentin免疫荧光染色鉴定。取新生3日内SD大鼠全脑,采用胰蛋白酶消化法分离培养原代MGs,行Iba1免疫荧光染色鉴定。收集对数生长期BMSCs培养液制备BMSCs条件培养液,取原代MGs,分别使用含BMSCs条件培养液的DMEM/F12培养基(实验组)和普通DMEM/F12培养基(对照组)培养。培养48 h后采用倒置相差显微镜观察MGs的形态改变;Iba1免疫荧光染色观察MGs激活状态;Iba1和Arg1免疫荧光双标染色及Western blot检测MGs中Arg1的表达。结果倒置相差显微镜观察示BMSCs约14 d进入对数生长期,Vimentin免疫荧光染色结果示98%以上细胞呈阳性反应;MGs约21 d进入对数生长期,Iba1免疫荧光染色结果示约80%细胞呈阳性反应。倒置相差显微镜观察示实验组MGs被激活,激活后的MGs胞体增大、突起变短、呈阿米巴样变化。免疫荧光染色示实验组Iba1阳性细胞显著多于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.007,P=0.000);免疫荧光双标染色示实验组Iba1和Arg1双阳性细胞显著多于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.007,P=0.000);Western blot示实验组Arg1蛋白相对表达量显著高于对照组,比较差异有统计学意义(t=0.001,P=0.000)。结论 BMSCs条件培养液可激活MGs,并促进MGs表达Arg1。

表没食子儿茶素没食子酸酯对IL-4刺激的小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶-1表达的影响

为探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对白介素-4（IL-4）刺激的巨噬细胞精氨酸酶1（Arg-1）和诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）表达的影响.将6~8周龄Balb/c小鼠经无血清DMEM培养基刺激后,收集腹腔巨噬细胞用于体外培养.体外培养的巨噬细胞经20ng/mL IL-4和不同浓度EGCG处理后,用实时荧光定量PCR（RTqPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测Arg-1和iNOS的mRNA表达水平和含量.结果显示IL-4和EGCG单独处理均可显著刺激Arg-1的表达和抑制iNOS的表达,而EGCG（12.5~50μM）增强IL-4刺激的Arg-1表达和IL-4对iNOS表达的抑制作用,且存在剂量依赖效应.上述结果提示EGCG以剂量依赖方式促进IL-4刺激的Arg-1表达、抑制iNOS的表达.

精氨酸酶-1在肝细胞癌中的低表达及其临床意义

背景与目的:精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)是肝脏鸟氨酸循环的催化酶,研究表明Arg-1表达改变显著影响细胞代谢和生长状态。本研究旨在探讨Arg-1在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,分析Arg-1与HCC临床病理指标之间的相关性。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)检测31例HCC及癌旁肝组织、12例正常肝组织中Arg-1 mRNA及蛋白表达水平。采用组织芯片结合免疫组织化学法检测Arg-1在158例HCC及癌旁组织中的表达,结合临床病理资料统计分析。结果:Arg-1 mRNA和蛋白表达水平在HCC组织中明显低于癌旁和正常肝组织(F=57.83、160.89,P均<0.01),且与HCC的分化程度相关(F=10.41、30.03,P均<0.01)。Arg-1蛋白阳性定位于细胞质及部分细胞核;Arg-1在HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中阳性表达率分别为88%、98.7%和100%,HCC组织中Arg-1蛋白表达明显低于癌旁(χ2=14.7416,P<0.01)及正常肝组织(χ2=4.1415,P<0.05)。Arg-1表达与HCC分化程度、血管侵犯、术后复发有关(χ2=22.8459、10.2639、10.6368,P均<0.05),而与HCC患者年龄、性别、HBsAg感染、血清AFP水平、有无肝硬化、肿瘤直径、肿瘤个数均无关。结论:HCC中Arg-1表达降低,并与HCC分化、转移及复发呈显著相关,提示Arg-1对HCC发生、进展发挥负性调控作用,检测HCC中Arg-1可作为评估患者预后的参考指标。

叉头框蛋白O4/精氨酸酶1介导的炎症反应在心肌梗死后伤口愈合及血管病中的作用

心血管病是多种心脏和血管疾病的总称,包括心肌梗死和高血压等,是全球范围内造成死亡的第一位原因。转录因子叉头框蛋白O4(FoxO4)有多种生物学功能,参与了人类多种疾病的发生。最近,笔者研究团队发现了FoxO4在心肌梗死后左心室重构中的一种新功能。FoxO4可以通过内皮精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)促进心肌梗死后早期炎症反应。缺血时,FoxO4可以激活内皮Arg1的转录,导致一氧化氮生成减少,单核细胞通过内皮屏障黏附和迁移增加。与野生型小鼠相比,FoxO4失活可以减轻心肌梗死后炎症反应,更好地保护心功能。根据FoxO4和Arg1之间的这种联系,推测FoxO4/Arg1/一氧化氮信号通路可能在高血压的发生过程中发挥着潜在的作用,因为Arg1和一氧化氮已被证实在血管生物学中发挥关键作用。FoxO4可能成为心肌梗死后心脏修复及血管疾病的潜在治疗靶点。

不同浓度1,25二羟基维生素D3对高糖诱导的巨噬细胞中血管内皮生长因子C及精氨酸酶1表达影响的研究

目的观察不同浓度1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对高糖环境下巨噬细胞内血管内皮生长因子C(VEGFC)、精氨酸酶1(Arg⁃1)表达的影响。方法25 mmol/L葡萄糖体外培养小鼠巨噬细胞系(U937),用不同浓度1,25(OH)2D3处理巨噬细胞,根据1,25(OH)2D3浓度分为空白对照组(Con,0 mol/L)、0.001μmol/L(L)组、0.01μmol/L(M)组、0.1μmol/L(H)组,各组均干预24 h。RT⁃PCR、Western blot法分别检测各组VEGFC、Arg⁃1蛋白和mRNA表达水平。结果VEGFC、Arg⁃1蛋白、mRNA表达水平随1,25(OH)2D3浓度增加而增加[(43.16±3.25)vs(47.30±3.57)vs(50.54±3.25),(8.24±0.25)vs(10.27±0.23)vs(13.24±0.24);(0.28±0.26)vs(0.39±0.22)vs(0.96±0.21),(0.34±0.42)vs(0.82±0.25)vs(1.57±0.27)],M组VEGFC、Arg⁃1蛋白和mRNA表达量最高。Spearman相关性分析显示,浓度为0.01μmol/L时1,25(OH)2D3水平与VEGFC、Arg⁃1蛋白和mRNA水平呈正相关(P<0.05),与白介素6(IL⁃6)、肿瘤坏死因子α(TNF⁃α)呈负相关(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3浓度为0.01μmol/L时,巨噬细胞内VEGFC、Arg⁃1表达最高,IL⁃6、TNF⁃α含量最低,1,25(OH)2D3能减轻高糖环境下巨噬细胞的炎症反应。

CX3CR1通过调控巨噬细胞极化影响肾间质纤维化

目的:CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)与CX3C趋化因子配体1(CX3C chemokine ligand 1,CX3CL1)结合后促使巨噬细胞等炎症细胞向受损部位迁移,巨噬细胞极化与肾间质纤维化相关。本研究旨在探讨CX3CR1是否通过调控巨噬细胞极化来影响肾间质纤维化的进展。方法:建立C57/B6小鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾间质纤维化模型,并将其分为CX3CR1抑制剂组与模型组,分别连续5 d腹腔注射CX3CR1抑制剂AZD8797或生理盐水,于建模后第7天取小鼠建模侧肾脏。分别采用苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色和Masson染色观察肾间质炎症细胞浸润和胶原纤维沉积情况。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测小鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)、CX3CR1的mRNA表达和CX3CR1蛋白质表达情况。采用全基因组测序鉴别2组肾组织的差异表达基因并用RT-PCR验证精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的差异表达。采用流式细胞术检测2组肾组织M2型巨噬细胞占比。结果:CX3CR1抑制剂组小鼠肾间质炎症细胞浸润明显减少,胶原纤维沉积明显减轻。CX3CR1抑制剂组小鼠肾组织中CX3CR1 mRNA及蛋白质水平、α-SMA和FN mRNA水平均明显低于模型组(均P<0.05)。全基因组测序显示2组肾组织中差异表达前5位的基因依次为Ugt1a6b、Serpina1c、Arg-1、Retnla和Nup62,RT-PCR证实CX3CR1抑制剂组Arg-1 mRNA水平明显高于模型组(P<0.001)。流式细胞术结果显示CX3CR1抑制剂组小鼠肾脏中Arg1+CD206+M2型巨噬细胞占比明显高于模型组(P<0.01)。结论:抑制CX3CR1的表达可有效缓解小鼠肾间质纤维化,其机制可能与巨噬细胞向M2型极化及Arg-1的表达上调有关。

胃癌患者癌组织中精氨酸酶-1的表达及预后价值

目的探讨胃癌患者癌组织中精氨酸酶-1(Arg-1)的表达及预后价值。方法通过免疫组织化学检测92例胃癌患者癌组织中Arg-1的表达,采用卡方检验比较Arg-1表达水平与临床病理参数的关系,Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验比较高、低Arg-1表达的胃癌患者预后差异,Cox比例风险模型分析影响胃癌预后的危险因素。结果92例胃癌组织样本中71例(77.2%)Arg-1呈高表达,21例(22.8%)呈Arg-1低表达。癌组织中Arg-1高表达与患者TNM分期、分化程度、局部浸润深度、Lauren分型、淋巴结转移和远处转移相关(均P<0.05)。Arg-1高表达组1年、3年、5年无瘤生存率为73.1%、48.3%及28.0%,Arg-1低表达组1年、3年、5年无瘤生存率为82.4%、61.2%及44.0%,Arg-1高表达组无瘤生存率低于Arg-1低表达组(均P<0.01)。Arg-1高表达组1年、3年、5年总生存率为78.3%、55.3%及35.1%,Arg-1低表达组1年、3年、5年总生存率为85.2%、70.2%及46.0%,Arg-1高表达组总生存率低于Arg-1低表达组(均P<0.01)。影响胃癌患者无瘤生存率的单因素为TNMⅢ~Ⅳ期、局部浸润深度、淋巴结转移、远处转移和Arg-1高表达(均P<0.05),多因素分析显示Arg-1高表达、TNMⅢ~Ⅳ期、远处转移及淋巴结转移是无瘤生存率的独立危险因子。TNMⅢ~Ⅳ期、局部浸润深度、淋巴结转移、远处转移和Arg-1高表达为影响总生存率的单因素(均P<0.05),多因素分析显示Arg-1高表达、TNMⅢ~Ⅳ期、淋巴结转移和远处转移是影响胃癌患者总生存率的独立危险因素。结论Arg-1高表达可作为胃癌患者术后预后不良的指标。

血浆精氨酸酶1构建Logistic回归模型预测乙肝肝硬化失代偿风险的临床价值

目的探讨精氨酸酶-1(Arg-1)在乙肝肝硬化患者血浆表达的意义并评估其预测肝硬化失代偿风险的价值。方法收集2020年8月-2021年6月于中山大学附属第三医院就诊的乙肝肝硬化代偿期(HBV-CC)患者20例、行经颈静脉肝内门腔静脉分流术(TIPS)的乙肝肝硬化失代偿期(HBV-DC)患者20例,同时纳入同期健康体检者12人作为对照组。采用酶联免疫吸附试验测定外周血浆Arg-1浓度,另外检测乙肝肝硬化失代偿期患者门静脉血浆Arg-1浓度,并对血浆Arg-1浓度与肝硬化相关临床指标进行相关性分析和二元Logistic回归分析。结果乙肝肝硬化患者外周血浆Arg-1表达量明显高于对照组[(6.14±4.33)ng/mL vs.(3.24±1.30)ng/mL,t=3.713,P=0.001],HBV-DC组明显高于HBV-CC组和对照组[(7.54±5.32)ng/mL vs.(4.74±2.47)ng/mL、(3.24±1.30)ng/mL,P均<0.05],HBV-DC组外周血Arg-1表达量显著高于门静脉血[(7.54±5.32)ng/mL vs.(4.84±3.07)ng/mL,t=2.322,P=0.032]。乙肝肝硬化患者外周血浆Arg-1表达量与总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素、APRI、FIB-4评分呈正相关。以发生肝硬化失代偿为因变量,纳入总胆红素、脾脏厚度、Arg-1等自变量进行多因素二元Logistic回归分析,结果显示:总胆红素升高(OR=15.42,95%CI:1.302~182.653,P=0.030)、脾脏厚度增大(OR=75.872,95%CI:4.657~1236.099,P=0.002)、Arg-1浓度超过4.45 ng/mL(OR=14.026,95%CI:1.234~159.403,P=0.033),均能显著增加肝硬化失代偿发生的风险。联合独立危险因素构建评分模型,并绘制列线图。HBV-DC发生概率的极佳临界值>34%,风险评分预测肝硬化患者发生失代偿的ROC曲线下面积为0.926(P<0.001),灵敏度为75%,特异度为95%。结论乙肝肝硬化患者血浆Arg-1表达量与肝脏生化功能、胆汁酸代谢、肝硬化分级以及失代偿风险相关,由总胆红素、脾脏厚度、Arg-1构建Logistic回归模型,对肝硬化失代偿发生有较高的预测价值。

肝细胞癌SLeX和Arg-1表达的临床病理研究

目的探讨唾液酸化Lewis X(SLeX)和精氨酸酶-1(Arg-1)表达与肝细胞癌(HCC)临床病理特征及预后的关系。方法120例HCC手术切除标本及30例癌旁肝组织,应用EliVisionTMplus免疫组织化学染色二步法检测SLeX和Arg-1在HCC癌组织及癌旁肝组织中的表达,分析SLeX和Arg-1与HCC患者性别、年龄、肉眼类型、瘤体大小、分化等级、转移及5年生存期等临床病理特征的相关性。结果HCC癌组织SLeX和Arg-1阳性率分别为44.2%(53/120)和75.8%(91/120),癌旁肝组织分别为3.3%(1/30)和100.0%(30/30),差异有统计学意义(均P<0.05)。SLeX和Arg-1表达与性别、年龄、肉眼类型、瘤体大小无关(均P>0.05)。在低分化、有转移和5年内死亡患者中SLeX高表达,Arg-1低表达,呈负相关性(r=-0.31)。结论SLeX和Arg-1与HCC发生发展显著相关,SLeX表达上调和(或)Arg-1表达下调均预示HCC分化差、易转移、预后不良。

人参皂苷Rg1抑制癫痫大鼠大脑胼胝体区小胶质细胞激活和炎性因子表达的作用

目的:探讨人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)抑制氯化锂-匹罗卡品联合诱导的癫痫大鼠模型大脑胼胝体区小胶质细胞(microglia,MG)的激活和炎性因子的表达作用,为临床应用Rg1治疗癫痫提供理论依据。方法:80只健康雄性SD大鼠随机分为4组:即空白对照组、模型组、Rg1预治疗组、卡马西平(carbamazepine,CBZ)预治疗组,每组20只;采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射制备癫痫大鼠模型,治疗组提前进行药物预处理,模型组给予相同剂量的生理盐水,记录行为学发作情况,注射匹罗卡品后2 h给予安定终止,3 d后取材;免疫荧光组织化学染色和Western Blot检测大脑胼胝体区精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iN OS)和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的蛋白表达变化。结果:与模型组相比,Rg1预治疗组明显缩短癫痫大鼠的大发作时间;模型组与空白对照组比较,大脑胼胝体区MG明显激活,胞体变圆,突起减少,呈"M1型"阿米巴样状态;Rg1预治疗组较模型组相比,MG的激活明显降低,Arg-1蛋白的表达明显上调,iN OS和IL-1β等炎性因子的表达显著下调。结论:Rg1增加癫痫大鼠大脑胼胝体区Arg-1蛋白的表达,降低iN OS和IL-1β等炎性因子的表达,抑制MG的激活和极化,减轻炎症因子的表达,缩短癫痫大鼠大发作时间。

早期胃癌肿瘤浸润深度与癌组织PD-L1、Arg-1表达的关系

目的 探讨早期胃癌肿瘤浸润深度与癌组织程序性死亡配体-1(PD-L1)、精氨酸酶-1(Arg-1)表达的关系。方法 回顾性选取2020年1月至2022年1月在琼海市人民医院治疗的早期胃癌患者110例,采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织和癌旁组织的PD-L1、Arg-1表达,内镜检查早期胃癌浸润深度情况,分析早期胃癌浸润深度的影响因素。结果 早期胃癌组织PD-L1和Arg-1阳性表达率分别为58.18%和76.36%,均明显高于癌旁组织(22.73%、30.91%),差异均有统计学意义(P<0.05)。合并溃疡、病变边缘有隆起、PD-L1阳性表达、Arg-1阳性表达组织黏膜下层深浸润比例分别为54.35%、51.16%、43.75%和39.29%,明显高于未合并溃疡、病变边缘无隆起、PD-L1阴性表达、Arg-1阴性表达组织(15.63%、19.40%、15.22%和7.69%),差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤大小>1 cm、未分化型组织PD-L1阳性表达率分别为73.33%和97.67%,Arg-1阳性表达率分别为95.56%和93.02%,明显高于肿瘤大小≤1 cm(47.69%、63.08%)、分化型组织(32.84%、65.67%),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示合并溃疡、病变边缘隆起、PD-L1和Arg-1表达是黏膜下层深浸润的影响因素(OR=2.779,95%CI:1.540~5.013;OR=2.596,95%CI:1.667~4.043;OR=1.976,95%CI:1.378~2.834;OR=1.749,95%CI:1.321~2.315;P<0.05)。结论 早期胃癌肿瘤组织PD-L1、Arg-1表达上调,与肿瘤大小及组织分化有关,同时PD-L1、Arg-1表达是肿瘤浸润深度的影响因素。