补充肌酸及间歇性运动对大鼠内源性肌酸合成的影响

目的:探讨补充大剂量肌酸对运动大鼠自身肌酸合成的影响.方法:补充肌酸的大鼠进行短时间大强度的间歇性跑台运动,观察对肾脏精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性、胍乙酸含量、骨骼肌肌酸含量和血清肌酸含量的影响.结果:补充相当于人体冲击剂量(1.5 g/kg/d)的肌酸对短时间大强度运动的大鼠肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量并不产生明显的影响;而补充超大剂量肌酸,均可引起运动大鼠肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量明显下降(P<0.01);超大剂量补充肌酸引起运动大鼠血清肌酐含量增加(P<0.01).

补充大剂量肌酸抑制运动训练大鼠内源性肌酸的合成

目的:探讨补充大剂量肌酸对运动大鼠自身肌酸生物合成和体内肌酸代谢的影响。方法:给游泳训练大鼠补充肌酸,测定大鼠肾脏精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性、酶促反应产物胍乙酸含量、骨骼肌肌酸含量、血清肌酸和肌酐含量、血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、大鼠游泳力竭时间。结果:补充超大剂量(6 .0g/kg/d)肌酸可引起大鼠腹泻,造成腓肠肌和比目鱼肌湿重显著下降(P <0 .0 5 ) ;补充相当于人体冲击剂量(1 5g/kg/d)和超大剂量肌酸,均可引起运动大鼠肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量明显下降(P <0 . 0 1) ;超大剂量补充肌酸引起游泳大鼠血清肌酐含量增加。此外,运动训练能提高肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量,促进内源性肌酸的合成。结论:超大剂量补充肌酸可抑制运动机体内源性肌酸的合成。建议实践中不宜超量超时补充肌酸,有必要对人体补充肌酸的冲击剂量(0 . 3g/kd/d或2 0g/d)的健康安全性进行深入研究。

大剂量、长时间补充肌酸对大鼠自身肌酸生物合成的影响

目的 :探讨大剂量、长时间补充肌酸对大鼠自身肌酸生物合成过程和肌酸代谢的影响。方法 :测定不同剂量补充肌酸 4周后大鼠肾脏的精氨酸 -甘氨酸脒基转移酶 (AGAT)活性和酶促反应产物胍乙酸含量、骨骼肌肌酸含量、血清肌酸激酶活性和肌酐水平。结果 :补充 4周不同剂量的肌酸后 ,大鼠体重有增加的趋势 ,同时腓肠肌湿重显著增加 (P <0 0 5 ) ,但 6 0g/kg组大鼠的体重和腓肠肌湿重低于其它剂量组。肾脏AGAT活性和胍乙酸含量有不同程度的降低 (P <0 0 1) ,补充剂量越大 ,降低程度越明显。结论 :大剂量、长时间补充肌酸可显著影响内源性肌酸的合成。超大剂量补充肌酸还会造成腹泻和骨骼肌量丢失。研究结果提示 ,补充肌酸应适量适时 ,不可长时间大剂量或超大剂量使用。

常规方法(冲击量+维持量)补充肌酸对运动训练大鼠内源性肌酸合成影响的动态观察

目的:动态观察常规方法(冲击量+维持量)补充肌酸对运动训练大鼠自身肌酸生物合成和代谢的影响。方法:将60只大鼠按体重随机分为6组:3组为补充肌酸组,分别以冲击量(1.5g/kg/d)1周、冲击量(1.5g/kg/d)1周+维持量(0.15g/kg/d)4周和冲击量1周+维持量(0.15g/kg/d)8周补充肌酸;其余3组为相应对照组。各组大鼠每天进行游泳训练4小时。分别于实验1周、5周、9周后测定大鼠肾脏精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性,肾脏、肝脏和血清胍乙酸(GA)含量,肾脏、骨骼肌和血清肌酸含量,血清和骨骼肌肌酸激酶(CK)活性及血清肌酐水平。结果:冲击量补充肌酸可导致运动训练大鼠肾脏AGAT活性以及肾脏、肝脏和血清胍乙酸含量降低,随着维持期延长,上述指标逐步恢复至对照组水平。补充肌酸引起肾脏肌酸含量明显增加,肾脏和血清肌酸含量与AGAT酶活性呈明显负相关。结论:冲击量补充肌酸可抑制运动训练大鼠内源性肌酸的合成,而在维持量阶段抑制状态逐渐缓解。建议运动员补充肌酸时不使用冲击剂量而只使用维持剂量。

常规方法(冲击量+维持量)补充肌酸对内源性肌酸合成代谢的影响

目的:探讨常规方法(冲击量+维持量)补充肌酸对大鼠自身肌酸生物合成代谢的影响。方法:冲击剂量(1.5g/kg/d)补充肌酸1周和维持剂量(0.15g/kg/d)补充肌酸1月、2月后,分别测定大鼠肾脏精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性,肾脏和肝脏胍乙酸含量,肾脏、骨骼肌和血清肌酸含量,血清和骨骼肌肌酸激酶(CK)活性及血清肌酐水平。结果:冲击量及维持量补充肌酸均可导致大鼠肾脏AGAT活性以及肾脏和肝脏胍乙酸含量降低,引起肾脏肌酸含量明显增加,肾脏和血清肌酸含量与AGAT酶活性呈明显负相关。冲击期血清肌酐水平显著升高,但在维持期恢复正常。结论:常规方法(冲击量+维持量)补充肌酸可显著抑制内源性肌酸的合成。

长期(8个月)补充肌酸对大鼠内源性肌酸合成的影响

目的:探讨长期(8个月)补充肌酸对大鼠内源性肌酸合成的影响。方法:21天龄雄性SD大鼠连续补充0.35g/kg/d肌酸(肌酸组)或对照液(对照组)8个月,观察其内源性肌酸生物合成途径中L-精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性和主要代谢物质含量的变化。结果:8个月后,与对照组相比,肌酸组大鼠肾脏L-精氨酸-甘氨酸脒基转移酶活性显著降低,肾脏、肝脏和血清胍乙酸含量较低;肾脏、肝脏、血清和腓肠肌肌酸含量变化不明显,比目鱼肌和跖肌肌酸含量显著升高;肾脏结构、血清肌酐含量和骨骼肌肌酸激酶活性等均无显著性差异。肾脏AGAT活性与肾脏肌酸含量和血清肌酸含量均无显著相关关系(P>0.05)。结论:长期补充0.35g/kg/d肌酸可抑制大鼠内源性肌酸合成,提高骨骼肌肌酸含量,但不会对肾脏结构产生影响。

补充肌酸对生长发育期雌、雄大鼠内源性肌酸合成的影响

目的:探讨补充肌酸对生长发育期雌、雄大鼠内源性肌酸合成的影响,为不同群体合理使用肌酸提供实验依据。方法:21天龄雌性和雄性SD大鼠随机分为5组,每组雌、雄大鼠各6或7只,分别连续补充0(对照液)、0.15、0.35、0.75或1.5g/kg/d肌酸液8周。观察内源性肌酸合成代谢途径中L-精氨酸-甘氨酸脒基转移酶(AGAT)活性和其它主要指标的变化。结果:与相同性别对照组相比,雌性或雄性大鼠补充肌酸8周后,肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量均降低,且补充肌酸剂量越大,降低越明显;腓肠肌、跖肌和比目鱼肌肌酸含量、血清肌酐含量升高;肾脏结构无明显差异。补充相同剂量肌酸的雄性大鼠肾脏AGAT活性和肝脏胍乙酸含量均高于雌性大鼠。结论:补充肌酸对生长发育期雌性或雄性大鼠的内源性肌酸合成均有抑制作用。雌性大鼠内源性肌酸合成能力弱于雄性。补充肌酸有助于提高骨骼肌肌酸含量。大剂量(1.5g/kg/d)补充肌酸不会对肾脏结构产生明显影响。

构建整合型重组枯草芽孢杆菌高效合成胍基乙酸

胍基乙酸作为一种能源性物质,在食品、医药和饲料等行业有着广泛的应用前景,但目前尚未实现利用生物法工业化生产胍基乙酸。本研究在食品级安全菌株枯草芽孢杆菌中设计胍基乙酸的合成路线,利用调控关键酶表达、解除反馈抑制、增加膜通透性等技术,实现全细胞催化高效合成胍基乙酸。首先基于进化树挖掘筛选最佳L-精氨酸:甘氨酸脒基转移酶,利用强启动子与基因组整合相结合的策略提高关键酶表达水平;其次,引入谷氨酸棒杆菌中用于L-精氨酸合成的鸟氨酸循环途径,缓解副产物L-鸟氨酸对酶的反馈抑制,并敲除L-精氨酸降解途径,强化底物再生;再次,增强N-乙酰胞壁-L-丙氨酸酰胺酶(N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase,LytC)基因表达,改善细胞膜通透性;最后,使用菌株Bs-13在最佳转化条件下,经24 h获得13.1 g/L胍基乙酸,转化速率为0.54 g/(L·h),底物甘氨酸的转化率为92.7%。以上策略一定程度上提高了胍基乙酸的生产效率,为生物法合成胍基乙酸提供了参考。