酿酒酵母5号染色体精细物理图谱绘制

利用脉冲电泳（ＰｕｌｓｅｄＦｉｅｌｄＧｅｌＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＰＦＧＥ）分析了酵母菌Ａ３６４ａ的电泳核型，以５号染色体专一探针确定了该染色体在电泳核型中的位置，以内切酶ＢａｍＨＩ对该染色体ＤＮＡ进行部分酶切后，与整合型载体ＹＩｐ５连接获得了一个染色体专一的基因文库，其转化子数目超过了理论要求值。从文库中筛选与已知探针有同源性的片段并用内切酶ＢａｍＨＩ，ＥｃｏＲＩ，ＨｉｎｄＩＩ，ＰｓｔＩ和ＳａｌＩ分析这些插入片段，获得了一个覆盖Ａ３６４ａ５号染色体（其长度估计为６２０ｋｂ）９．４％的精细物理图谱。利用边界克隆和菌落杂交将使我们能够对整条染色体进行进一步的“步查”