精胺-普鲁兰联合地氯雷他定介导的NOTCH1沉默对急性T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat的影响

目的以精胺-普鲁兰(Ps)作为NOTCH1 siRNA的载体,研究Ps联合溶酶体促渗剂地氯雷他定(DL)介导的NOTCH1沉默对急性T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat的作用。方法采用动态光散射仪分析不同N/P比siRNA/Ps复合物的粒径和Zeta电位。将Jurkat细胞与siNOTCH1/Ps共孵育6 h,换液后加入含10μmol/L DL的RPMI 1640完全培养基继续孵育18 h;实时荧光定量PCR检测NOTCH1的沉默效率;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测NOTCH1下游蛋白C-MYC和凋亡相关蛋白caspase 3和cleaved caspase 3的表达。结果N/P比为5的siRNA/Ps复合物粒径为(203.97±1.07)nm,Zeta电位为(46.13±0.07)mV;复合物在10%FBS培养基中稳定。在Jurkat细胞中,与无DL组相比,siNOTCH1/Ps联合10μmol/L DL可高效沉默NOTCH1,诱导细胞周期阻滞在G 1期,促进细胞凋亡(P<0.05);同时,Jurkat细胞中cleaved caspase 3蛋白的表达水平升高,C-MYC及caspase 3蛋白的表达水平降低(P<0.05)。结论Ps联合溶酶体促渗剂DL有效介导Jurkat细胞中的NOTCH1沉默,从而诱导急性T淋巴细胞白血病细胞G 1期阻滞,并促进细胞凋亡。