有效降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的糖基供体研究

用低聚壳聚糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、壳聚糖和羧甲基壳聚糖对牛乳β-乳球蛋白进行糖基化处理,通过动物实验及ELISA方法检测各糖基化产物的抗原性和免疫原性,结果显示低聚半乳糖的糖基化处理降低牛乳β-乳球蛋白的抗原性和免疫原性效果最佳,分别降低41%和18%。凝胶过滤层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果显示,低聚半乳糖糖基化产物的相对分子质量为40kDa,保持原有的二聚体结构。该结合物与β-乳球蛋白比较,乳化稳定性、溶解性和分散性无显著性差异,而热稳定性和抗氧化性明显提高。以上结果表明,低聚半乳糖是糖基化法降低牛乳β-乳球蛋白免疫原性的较理想的糖基供体。

用不保护或少保护的糖基受体合成寡糖

用不保护或少保护的葡萄糖、甘露糖、鼠李糖作为糖基受体 ,经由糖原酸酯的中间体 ,能高区选和立体选地合成寡糖。α- ( 1→ 6) -连接的甘露寡糖、β- ( 1→ 6) -连接的葡萄寡糖、3,6-支化的甘露寡糖及葡萄寡糖用此方法能用很简单步骤合成 ,如具有重要生物活性的寡糖植保素激活剂葡萄六糖、具有抗肿瘤活性的香菇多糖的活性片段 ,以及一些具有重要生理功能的多糖的重复单元等。本文同时简述了用少保护的半乳糖和氨基葡萄糖为糖基受体合成寡糖的进展。

α-氟代半乳糖的合成

α-氟代半乳糖是一类重要的1-氟代糖,可在化学-酶法催化过程中作为糖基供体合成各类重要的半乳糖苷化合物,但这类氟代糖的大量获得至今没有完整实用的合成方法。作者以D-半乳糖为原料,将其全乙酰化获得五乙酰基-β-半乳糖,用吡啶-氟化氢络合物在-20℃进行氟化反应,得到四乙酰基-α-氟代半乳糖,然后用甲醇钠/甲醇溶液进行脱乙酰反应,TLC及核磁共振氢谱验证所得产物,成功获得α-氟代半乳糖(δ=5.57,J1,2=2.7,J1,F=53.9 Hz)。

肿瘤相关糖抗原GM3及其衍生物合成方法研究进展

GM3及其衍生物合成中的糖苷化反应条件苛刻,端基碳的立体构型较难控制,能否高效地得到α糖苷键是评价反应优劣的重要标志之一。笔者综述了近年来GM3及其衍生物的合成方法,涉及糖供体化合物的选择、糖受体的确定、立体选择性的控制及新糖苷化反应催化剂的发展。

UDP-糖基供体在中药苷类成分生物合成中的应用及研究进展

尿苷二磷酸(UDP)-糖基供体是三萜、黄酮和蒽醌等中药活性成分糖基化修饰的重要组成前体。近年来,通过代谢工程策略合成苷类化合物已取得一定进展,但UDP-糖基供体在不同类型的底盘细胞中产量普遍偏低,极大地限制了中药苷类化合物的高效生物合成。作者从UDP-糖基供体的生物合成、循环再生以及代谢合成途径中关键基因调控、代谢模块优化等方面,重点综述了UDP-糖基供体在苷类成分合成中供应的研究进展,并展望了UDP-糖基供体在生物合成中的挑战和发展方向,以期为今后苷类成分的生物合成相关研究提供借鉴。

一株产CGTase环糊精葡萄糖基转移酶的细菌改性甜菊苷的研究

本文对筛选的一株产CGTase环糊精葡萄糖基转移酶的细菌(Bacillus sp.CGT7)转化并改性甜菊苷进行了研究,探讨了影响酶活性和转化效果的因素.实验结果表明,在CGT7菌的培养过程中,碳源、氮源、温度和初始pH等因素对菌株产酶活性均有不同程度的影响,适宜的碳源为马铃薯淀粉,氮源为豆粕粉,培养温度为30℃,初始pH值为8.5.适宜条件下培养的CGT7菌的酶活性可达544 U/mL,以甜菊糖苷为底物、环糊精为糖基供体时,转糖苷产物Stv-Glu浓度为0.61 mg/mL.

槲皮素糖苷衍生物的合成研究进展

槲皮素广泛存在于自然界中,具有抗氧化,抗炎,抗菌,抗病毒等多种生物活性,但由于水溶性差,生物利用度低问题,制约了槲皮素的应用。槲皮素糖苷化可以增大水溶性,提高其生物代谢稳定性,改善其治疗效果,成为了国内外的研究热点。近年来通过化学合成,生物合成方法合成槲皮素糖苷衍生物取得了巨大进展,本文将以槲皮素糖苷的化学合成为主,对近年来国内外合成槲皮素糖苷衍生物的研究做一个简要综述。

糖基转移酶活性供体UDP-糖的生物合成及循环再生

UDP-糖基供体依赖的糖基转移酶(UGTs)能够高效且特异性地催化多种天然产物及药物的糖基化修饰,从而达到提高水溶性、增加稳定性及改善生物活性的目的。但是,UGTs催化的糖基化反应需要使用价格昂贵且稳定性差的UDP-糖基供体,如UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖等,这严重限制了UGTs的工业化应用。研究人员通过构建多酶级联催化体系以及改造体内代谢途径,能有效提高UDP-糖基供体的生物合成及再生效率,在一定程度上减少或避免了反应体系中外源UDP-糖的使用。该文概述了糖基化反应中UDP-糖基供体生物合成及循环再生策略的研究进展,从而为UGTs的规模化应用及新型糖苷类化合物的生物合成提供参考与借鉴。

Effects of Na2S2O3 and Glucose on the Compositions of Glycerolipids and Their Fatty Acids in Synechocystis sp. PCC 6803 Cells

Compositions of glycerolipids and fatty acid compositions of glycerolipids were compared among Synechocystis sp. PCC 6803 cells grown in the BG-11 medium containing different concentrations of glucose and Na2S2O3 in this study. It was found that Na2S2O3 can effectively increase the percentage of sulphoquinovosyl diacylglycerol (SQDG) and phosphatidylglycerol (PG) to total membrane lipids and the simultaneous application of glucose with Na2S2O3 can counteract the effect of Na2S2O3. In addition, Na2S2O3 can significantly increase the percentage of palmitic acid (C, 16:0) in fatty acid composition of monogalactosyl diacylglycerol (MGDG) and digalactosyl diacylglycerol (DGDG) and decrease the fatty acid unsaturation degree accordingly, and these effects can also be eliminated by glucose. These results indicate that Na2S2O3 can take as a reductant to make membrane lipids in a low unsaturated state, and the simultaneous application of glucose can decrease the reducing power of Na2S2O3. In addition, Na2S2O3 can take as a sulfur donor for the synthesis of SQDG.

6-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成

本文首次报道了6-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成方法。采用卤代糖法,以α-D-吡喃葡萄糖为起始原料制得糖基供体2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃葡萄糖溴化物,然后与1-(6-氯-3-羟基-1H-吲哚-1-基)乙-1-酮进行偶联成苷反应得1-O-(N-乙酰基-6-氯-3-吲哚基)-2,3,4,6-四-O-乙酰基-D-葡萄糖苷,最后在甲醇钠/甲醇条件下脱乙酰基得目标化合物,总收率52%。所得目标化合物的HPLC纯度93.2%,HPLC保留时间及熔点均与标准品一致。

植物丝氨酸羧肽酶样酰基转移酶的结构、功能和应用

植物丝氨酸羧肽酶样酰基转移酶与丝氨酸羧肽酶相比具有相似的结构特点和很高的同源性,能够催化酰基葡萄糖酯的酰基转移反应,参与植物次生代谢产物的酰基化修饰,丰富天然产物结构多样性,改善化合物水溶性、稳定性等理化性质。本文重点介绍植物来源丝氨酸羧肽酶样酰基转移酶家族的结构特点、催化机制、功能鉴定及其生物催化应用等方面的研究进展,为促进此类酰基转移酶基因的功能表征和利用合成生物技术合成活性次生代谢产物提供参考。