桑叶多糖MLPⅡ的基本结构及对糖尿病模型大鼠的降血糖作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ。高效液相色谱分析桑叶多糖MLPⅡ主要由甘露糖(man)、鼠李糖(rha)、葡萄糖(glc)、木糖(xyl)和阿拉伯糖(ara)等5种单糖组成,其摩尔比为n(man)∶n(rha)∶n(glc)∶n(xyl)∶n(ara)=8.73∶1.04∶6.53∶2.13∶1.00;红外光谱显示桑叶多糖MLPⅡ的主要连接键为β-糖苷键。桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠的降血糖试验结果表明,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的体质量与对照组糖尿病模型大鼠相比提高了26.22%,而空腹血糖(FBG)浓度降低了52.89%,达到极显著水平,并且治疗组糖尿病模型大鼠的糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)和C-肽(C-P)水平得到改善,损伤胰岛细胞得到修复,胰岛β细胞合成和胰岛素分泌的能力增强。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可有效控制糖尿病模型大鼠的体质量和空腹血糖水平,并改善糖耐量,而促进糖尿病模型大鼠胰岛β细胞合成及胰岛素分泌可能是桑叶多糖MLPⅡ降血糖作用机制之一。

桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ,通过检测分析MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数和肝脏生理指标,探究桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用。与糖尿病对照组模型大鼠相比,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠肝脏组织中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)含量分别降低了40.59%、38.58%和52.81%,而肝脏组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝糖原含量和肝脏葡萄糖激酶活性则分别升高了15.88%、198.48%和169.77%,均达到极显著水平。与糖尿病对照组模型大鼠相比,桑叶多糖MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数均明显提高,肝脏的脂肪变性程度明显减轻,其中150 mg/kg MLPⅡ治疗组均达到极显著水平。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可显著改善糖尿病模型大鼠的肝脏糖脂代谢和胰岛素抵抗,其作用可能与调节胰岛素的释放和肝脏的氧化应激水平有关。

丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠VEGF及血小板参数的影响

[目的]探讨丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及血小板参数的影响。[方法]取大鼠58只,分为5组,除正常组外,其余组给予高脂饲料四周,按35mg·kg-1给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(Strep to zoe in,STZ)溶液1次,造模成功后除模型组和正常对照组外,各组连续灌胃药物4周,取血测定血糖血脂,VEGF及血小板参数。[结果]大鼠造模后VEGF的表达明显升高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01),给予丹蛭降糖灌胃后,VEGF的高表达明显降低(P<0.01),疗效优于吡格列酮组。造模后,模型组大鼠血小板计数(PLT)降低,血小板平均容积(MPV)、血小板分布宽度(PPW)增高,予丹蛭降糖方后PLT水平上调,MPV、PDW降低,丹蛭高剂量组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);血糖及三酰甘油水平明显下降,与模型组比较(P<0.01)。[结论]具有益气养阴活血作用的丹蛭降糖胶囊,可控制VEGF的高表达,调节血小板参数,降低血糖及三酰甘油水平。

糖尿病模型大鼠强骨宝方含药血清对成骨细胞培养上清液IL-6、TNF-α及AGEs的影响

目的:探讨强骨宝方糖尿病模型大鼠含药血清对体外培养成骨细胞上清液中IL-6、TNF-α及AGEs的影响。方法:采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原酶消化法从1-2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出成骨细胞,鉴定细胞后,分别用20%不灭活的强骨宝方糖尿病模型大鼠含药血清、单纯的糖尿病模型大鼠血清及正常大鼠血清加入成骨细胞培养体系,培养5d、7d及10d,分时段检测培养上清液中IL-6、TNF-α及AGEs的量。结果:强骨宝含药血清组第5d上清液中的IL-6(78.38±18.35)pg/ml、TNF-α(0.5731±0.4316)ng/ml及AGEs(71.52±22.13)荧光值/每毫克蛋白均显著低于模型对照组(P<0.01),并接近于空白对照组;而模型对照组各时段3项指标均显著高于相应的空白对照组(P<0.01),并且3项指标均随培养时间延长而显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:糖尿病模型大鼠血清会促进体外培养的成骨细胞分泌IL-6、TNF-α及AGEs的形成,糖尿病模型大鼠强骨宝方含药血清能有效抑制IL-6、TNF-α在正常水平并控制非酶促糖基化反应及AGEs的产生。

红芪多糖对改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的治疗作用。方法采用高热量饲料加低剂量注射链脲佐菌素(STZ)造模,分别予二甲双胍及HPS进行干预,测定干预后血糖(FPG)、血清胰岛素(Ins)、C肽(CP)、游离脂肪酸(FFA)水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果HPS可降低高热量饲料加STZ所致T2DM大鼠FPG,增加ISI,降低Ins及CP分泌,抑制FFA的产生。结论HPS可通过多途径多环节减轻糖尿病模型大鼠的胰岛素抵抗。

益气养阴活血法对糖尿病模型大鼠血清核因子-kB的影响

目的观察益气养阴活血法对糖尿病模型大鼠血清NF-kB的影响。方法取大鼠55只,分为5组,除正常对照组外,其余组给予高脂饲料,按30mg/kg给大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)溶液1次,造模成功后除模型组和正常对照组外,各组连续灌胃药物4周,取血测定血糖、NF-kB,监测尿白蛋白、肾重量。结果造模后NF-kB的表达明显升高,与正常组比较有十分显著性差异(P<0.01)。给予丹蛭降糖方灌胃后,NF-kB的高表达较模型组明显降低(P<0.01),尿微量白蛋白排泄显著下降(P<0.05),血糖与治疗前比较明显降低(P<0.01)。结论具有益气养阴活血作用的丹蛭降糖胶囊可控制NF-kB的高表达,减少尿白蛋白的排泄,降低血糖。

紫阳富硒茶对糖尿病模型大鼠血糖作用的影响

目的研究紫阳富硒茶对糖尿病模型大鼠血糖作用的影响。方法用四氧嘧啶建立糖尿病模型大鼠后,用紫阳富硒茶液灌胃4周,观察糖尿病模型大鼠血糖(FBG)的变化。结果紫阳富硒茶能明显降低糖尿病模型大鼠的FBG。结论紫阳富硒茶具有降低血糖的作用。

桑叶多糖MLP Ⅱ对糖尿病模型大鼠糖代谢的改善作用

采用小剂量注射链脲佐菌素联合高脂高糖饮食建立糖尿病大鼠模型,并灌胃给予桑叶多糖MLPⅡ,用电子显微镜观察各试验组大鼠肝脏组织超微结构变化,采用Western blot与RT-PCR方法分别检测大鼠肝脏组织的葡萄糖激酶(glucokinase,GCK)和胰岛素受体底物2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)的蛋白质表达水平以及基因mRNA转录水平,研究桑叶多糖MLPⅡ的降血糖作用机制。结果表明:与糖尿病模型对照组相比,150 mg/kg桑叶多糖MLPⅡ治疗组大鼠肝脏细胞超微结构得到明显改善,肝糖原颗粒明显增多,GCK和IRS-2的蛋白质表达水平及基因mRNA转录水平显著上升(P<0.05)。结果提示,桑叶多糖MLPⅡ能显著调节糖尿病模型大鼠的糖代谢,其作用机制可能与改善糖尿病模型大鼠肝脏细胞超微结构,上调IRS-2介导的GCK表达,促进肝糖原合成与贮存有关。

石斛合剂序贯治疗对糖尿病模型大鼠TOLL样受体及相关基因表达的影响

目的观察石斛合剂对糖尿病模型大鼠Toll样受体9(Toll-like receptor,TLR9)及相关基因的影响。方法取健康SPF级SD大鼠38只,随机分为正常组、糖尿病模型组、石斛合剂临床等效用药组;高糖高脂喂养12周,用石斛合剂序贯治疗48天,用RT-PCR检测大鼠肝脏组织中TLR9及部分相关基因mRNA的表达。结果经过石斛合剂的治疗,TLR9 mRNA水平明显高于模型组,MyD88,TNF-α表达有所降低。结论石斛合剂对糖尿病模型大鼠的降血糖血脂作用机制与TLR9的表达上升与免疫调节有关。

不同Roux肠袢长度的十二指肠空肠旁路术对2型糖尿病模型大鼠糖代谢的影响

目的:探究不同Roux肠袢长度的十二指肠空肠旁路术(DJB)对2型糖尿病模型(Goto-Kakizaki,GK)大鼠术后体重、空腹血糖(FPG)与胰高血糖素样肽(GLP-1)的影响,并进一步探究GK大鼠的GLP-1相关受体在胃十二指肠吻合处、十二指肠残端屈氏韧带处以及共同通路空肠处的术后表达的情况及其相关机制。方法:采用抽签法将40只GK大鼠随机分成5组,每组8只。对照组离断十二指肠后重新吻合作为A组,手术组实施保留全胃的不同Roux肠袢长度的DJB,分别留取10、20、30和40cm的Roux肠袢作为B、C、D和E组。分别于术前3d及术后1、3、5、8周眼眶后采集静脉血,动态监测大鼠体重和FPG值变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠的GLP-1水平。8周后统一取出GK大鼠胃十二指肠吻合处、十二指肠残端屈氏韧带处以及共同通路空肠处三处标本,采用免疫组化法分析GLP-1受体的表达。结果:全组40只GK大鼠的手术成功率为72.5.%,保留40cm肠袢的E组术后1~5周相继死亡。与术后同时间点对照组相比,手术组在术后整个周期中体重改变不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。与本组术前和术后同时间点对照组相比,所有DJB手术组术后FPG、GLP-1水平均下降(P<0.05);术后1、3周,手术组E组FPG、GLP-1水平较手术组B、C组下降明显(P<0.05);与对照组相比,DJB各手术组伴随Roux肠袢延长GLP-1受体在胃十二指肠处以及共同通路空肠处逐渐升高(P<0.05),而在十二指肠残端屈氏韧带处逐渐减少(P<0.05)。结论:DJB对GK大鼠有降糖效果,降糖效果随着Roux肠袢长度的延长而提高,其降低血糖的机制可能与GLP-1受体在各肠段的表达量相关,结果显示GLP-1受体在食物流经处的表达可能与Roux肠袢长度相关。

双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响

目的观察双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响。方法将40只SD大鼠,采用随机数字表法分为A(正常组)、B(模型组)、C(双丹明目组)、D(阳性对照组)4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ(以50 mg/kg的剂量)一次性尾静脉注射建立糖尿病视网膜病变模型,造模1周后开始连续灌胃用药,灌胃后4周、8周,分别处死一半动物,采用免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b的表达。结果成模后用药第4周、8周,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度值均高于正常组,其中模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值均高于模型组、平均光密度值均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论双丹明目胶囊能明显提高糖尿病模型大鼠视网膜中VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值、降低其平均光密度值,表明双丹明目胶囊能明显降低VEGF-a、VEGF-b在视网膜中的表达。

雀麦膳食纤维对2型糖尿病模型大鼠血糖、血脂影响的研究

目的探讨雀麦膳食纤维粉(Oats dietary fiber bran,ODFB)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)模型大鼠血糖、血脂的影响.方法将Wister大鼠50只(体质量为194.5±5.3g)随机分5组,每组雌雄各半:A组为阴性对照组,10只,喂饲基础饲料;另40只为糖尿病模型组,制成T2DM大鼠模型,再随机分为B,C,D,E 4组.每组10只即.B(糖尿病对照组即阳性对照组)组继续喂饲高糖、高脂饲料,C,D及E组喂饲分别加入含DF30%、40%和60%的ODFB高糖、高脂饲料,8W后观察DF对大鼠糖代谢、脂代谢和食物利用率的影响.结果①与B组相比,C,D和E组动物食物利用率明显增加;②三个剂量组均有明显的降低空腹血糖(Fasting blood glu-cose,FBG)、血清甘油三酯(Triglycerides,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low densitylipid-cholesterol,LDL-C),同时升高高密度脂蛋白胆固醇(High density lipid-cholesterol,HDL-C)水平的作用,而D,E作用更显著;③与B组比较,C,D,E三组糖耐量曲线下面积明显减少;D,E两组血糖水平已接近阴性对照组(A组)水平.结论一定剂量的ODFB有改善T2DM大鼠模型食物利用率、降糖和降脂作用.

MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜组织中的表达

目的:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法复制糖尿病大鼠模型,观察糖尿病模型大鼠不同时期视网膜组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达水平,阐明MMP-2在糖尿病大鼠糖尿病视网膜病变(DR)中的作用。方法:雌性SD大鼠分为正常对照组(n=24)、4周模型组(n=30)、6周模型组(n=30)和8周模型组(n=30),模型组大鼠连续5d腹腔注射小剂量STZ复制糖尿病大鼠模型,正常对照组大鼠注射等量的柠檬酸钠溶液。4、6和8周时检测各组大鼠体质量和血糖水平。末次检测后麻醉获取大鼠右眼视网膜组织,采用RT-PCR和Western blotting法检测MMP-2mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色观察大鼠视网膜组织中MMP-2表达情况。结果:造模前,各组大鼠体质量和禁食12h的空腹血糖值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。4周模型组大鼠死亡3只,6周时死亡5只,8周时死亡7只,存活动物继续进行实验。各模型组大鼠体质量均明显低于同时期正常对照组(P<0.05或P<0.01),而空腹血糖值明显升高(P<0.05或P<0.01)。各模型组大鼠视网膜组织中MMP-2mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。正常对照组大鼠视网膜结构层次清晰分明、细胞排列整齐,可见单层排列的神经节细胞,核圆形或椭圆形状,核较大;与正常对照组比较,模型组大鼠视网膜组织结构松散,内核层及视杆细胞层细胞外界膜模糊,数量减少。MMP-2阳性细胞可见棕黄色颗粒沉淀,在神经节细胞层胞浆和血管内皮细胞尤为集中。4、6及8周模型组MMP-2阳性表达水平均高于正常对照组(P<0.05)。结论:MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜上表达,并随着糖尿病大鼠模型维持时间的延长呈递增趋势,说明MMP-2与DR有关。

黄连降糖片对2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应的影响

目的:探讨不同剂量黄连降糖片对链脲佐菌素(STE)诱导的2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应的影响及其量效关系。方法:将SPF级SD雄性大鼠120只随机分为正常组(n=10)和造模组(n=110),将造模组高脂高糖饲料喂养加小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立SD大鼠2型糖尿病模型后随机分为模型组、黄连降糖片组(1～9片)及阳性组,每组10只。运用蒸馏水、黄连降糖片及盐酸二甲双胍分别干预4周后检测各组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组相比,黄连降糖片2～9片组大鼠空腹血糖(FBG)降低(P<0.05),血清GSH-Px、SOD活性增强(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),与阳性组相比,黄连降糖片3～9片组大鼠血清GSH-Px活性增强(P<0.05),5～9片组大鼠血清SOD活性升高(P<0.05),6～9片组大鼠血清MDA含量降低(P<0.05),且在2～8片范围内随着药物剂量的增加,降糖幅度增加,调节氧化应激的作用增强。结论:黄连降糖片的降糖机制可能与抑制2型糖尿病模型大鼠氧化应激反应有关,且在一定剂量范围内存在量效关系。

野芭蕉花液对糖尿病模型大鼠血糖、血脂的影响

目的观察野芭蕉花提取物对糖尿病模型大鼠血糖、血脂、糖化血红蛋白的影响。方法将普通级雄性大鼠分为正常组、模型组、消渴丸组和野芭蕉花提取物小剂量组、中剂量组、大剂量组共6组。观察野芭蕉花提取物引起的糖尿病模型大鼠空腹血糖(FBG)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、糖化血红蛋白(HbA1c)含量变化。结果野芭蕉花提取物能显著降低糖尿病模型大鼠空腹血糖、胆固醇、三酰甘油水平和糖化血红蛋白含量,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论野芭蕉花提取物有明显的降血糖、调节血脂的作用。

高成模率和高稳定性的糖尿病大鼠模型制备——高脂高糖膳食+STZ体重联合体表面积法构建糖尿病大鼠模型

目的构建高成模率和高稳定性的高血糖伴胰岛素抵抗(IR)大鼠模型。方法 Wistar大鼠高脂高糖膳食4 w后,腹腔注射2次链脲佐菌素(STZ),进行间隔时间及注射剂量遴选实验。选用上述最佳造模法进行药效学及模型稳定性实验:将成模大鼠随机分为模型对照组和二甲双胍治疗组,4 w后检测药物影响;模型对照组(1/2)再继续普食饲养8 w,判断模型稳定性。结果 2次STZ腹腔注射间隔时间2 d组,成模率最高(90%),注射剂量以25 mg/kg+m2成模率最高(100%)。此法造模,所有大鼠禁食血糖、随机血糖均达糖尿病标准,且二甲双胍治疗有效;模型对照组无1例自愈。结论高脂高糖4 w+2次STZ腹腔注射(25 mg/kg+m2,间隔2 d)可成功制备高成模率和高稳定性的伴IR的糖尿病大鼠模型。

改良链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型及其饲养方法

链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型的方法操作简单,模型可靠、稳定,因此该种方法被广泛应用于糖尿病的基础研究中。本实验通过对正常组和模型组两组大鼠的观察,发现:造模成功的大鼠在72h内体重比造模前普遍减少,多精神萎靡,皮毛缺少光泽,色灰黄,摄食量、饮水量、尿量明显增加。尾静脉采血法测量血糖时,要注意采血部位的局部消毒。

化腐再生法治疗糖尿病肌腱坏死模型大鼠的实验研究

目的探讨化腐再生法对糖尿病肌腱坏死模型大鼠的治疗效果及机理。方法将20只Wistar大鼠造成糖尿病大鼠模型,随机分为化腐再生组、单纯化腐组、单纯再生组、对照组。所有大鼠均采用物理化学联合方式造成两处表皮及肌腱坏死创口,之后分别采用不同药物换药治疗,并进行分泌物提取,观察创面的面积(cm2)与分泌物中活性因子的变化,并加以分析。结果在肌腱坏死大鼠模型的治疗中,与其他方法治疗相比,化腐再生组创面剩余面积较其他组明显缩小,在修复中后期较其他组有显著差异(P<0.05或P<0.01),创面渗出液中的总蛋白、总氨基酸、溶菌酶单位面积含量在不同时期显著增加,与创面愈合具有正相关关系。结论化腐再生法对糖尿病大鼠肌腱坏死模型的治疗效果明显优于其他各组疗法,其机理可能与各种活性因子共同作用有关。

双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF家族表达的影响

目的:观察双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF家族因子VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,采用随机数字法分为A空白组、B模型组、C双丹明目组、D阳性对照组4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ 50mg/kg的剂量一次性大鼠尾静脉注射法建立糖尿病视网膜病变大鼠模型,造模后1wk开始连续灌胃用药,灌胃后4wk,处死动物,免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c的表达。结果:成模后用药第4wk,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度均高于正常组,其中模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0. 01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c表达的平均灰度值均高于模型组(P<0. 05),平均光密度值均低于模型组(P<0. 01)。结论:双丹明目胶囊能明显降低VEGF家族中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c在糖尿病模型大鼠视网膜中的表达,对其视网膜有一定的保护作用。