强骨宝方糖尿病模型鼠不同时效与量效的含药血清对成骨细胞增殖的影响

目的:探讨强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清促进体外培养成骨细胞增殖的最佳时相与量效。方法:采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原酶消化法从1-2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出成骨细胞,鉴定细胞后,用不灭活的不同时效(灌胃3d、5d,末次灌胃后1h、3h)、不同浓度(5%、10%、20%)的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清加入成骨细胞培养体系,培养48、72h,应用MTT比色法来检测其对成骨细胞增殖功能的影响。结果:各时相的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清对成骨细胞的增殖作用呈浓度依赖性,即20%>10%>5%;其中以3d末次灌胃后1h、20%的含药血清作用最明显,在成骨细胞培养48h、72h后均具有显著促进其增殖作用。结论:灌胃3d、末次灌胃后1h、20%不灭活的强骨宝方糖尿病模型鼠含药血清对成骨细胞增殖作用最明显。

Ⅱ型糖尿病模型小鼠粪便微生物多样性分析

【目的】揭示粪便微生物对Ⅱ型糖尿病的作用以及影响。【方法】以SPF级BKS-DB雄性小鼠为T2DM模型,通过测定对照组(CN组)和模型组(T2DM组)粪便微生物16SrRNA基因分析其群落结构与组成。【结果】门水平上,发现T2DM模型组小鼠粪便中蝴蝶菌门、弯曲杆菌门菌群丰度显著高于CN组。属水平中,T2DM组发现16个特有菌属,其中丰度占比最大的是库特氏菌属。在差异显著的前10个菌属中,9个菌属T2DM组菌群丰度显著高于CN组(P<0.05),仅有1个菌群丰度显著低于CN组。通过LEfSe分析,发现厌氧菌属、棒状杆菌属在T2DM模型组出现富集,而这两种菌属都存在于免疫力低下的人群中,与糖尿病呈正相关存在。【结论】在T2DM模型小鼠的粪便中,蝴蝶菌门、拟杆菌属等菌群出现高表达现象,同时,厌氧菌属、棒状杆菌属也出现了失衡,这可能导致了机体免疫力降低,正向影响糖尿病的发生。

桑叶多糖MLPⅡ的基本结构及对糖尿病模型大鼠的降血糖作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ。高效液相色谱分析桑叶多糖MLPⅡ主要由甘露糖(man)、鼠李糖(rha)、葡萄糖(glc)、木糖(xyl)和阿拉伯糖(ara)等5种单糖组成,其摩尔比为n(man)∶n(rha)∶n(glc)∶n(xyl)∶n(ara)=8.73∶1.04∶6.53∶2.13∶1.00;红外光谱显示桑叶多糖MLPⅡ的主要连接键为β-糖苷键。桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠的降血糖试验结果表明,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的体质量与对照组糖尿病模型大鼠相比提高了26.22%,而空腹血糖(FBG)浓度降低了52.89%,达到极显著水平,并且治疗组糖尿病模型大鼠的糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)和C-肽(C-P)水平得到改善,损伤胰岛细胞得到修复,胰岛β细胞合成和胰岛素分泌的能力增强。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可有效控制糖尿病模型大鼠的体质量和空腹血糖水平,并改善糖耐量,而促进糖尿病模型大鼠胰岛β细胞合成及胰岛素分泌可能是桑叶多糖MLPⅡ降血糖作用机制之一。

桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ,通过检测分析MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数和肝脏生理指标,探究桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用。与糖尿病对照组模型大鼠相比,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠肝脏组织中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)含量分别降低了40.59%、38.58%和52.81%,而肝脏组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝糖原含量和肝脏葡萄糖激酶活性则分别升高了15.88%、198.48%和169.77%,均达到极显著水平。与糖尿病对照组模型大鼠相比,桑叶多糖MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数均明显提高,肝脏的脂肪变性程度明显减轻,其中150 mg/kg MLPⅡ治疗组均达到极显著水平。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可显著改善糖尿病模型大鼠的肝脏糖脂代谢和胰岛素抵抗,其作用可能与调节胰岛素的释放和肝脏的氧化应激水平有关。

高成模率和高稳定性的糖尿病大鼠模型制备——高脂高糖膳食+STZ体重联合体表面积法构建糖尿病大鼠模型

目的构建高成模率和高稳定性的高血糖伴胰岛素抵抗(IR)大鼠模型。方法 Wistar大鼠高脂高糖膳食4 w后,腹腔注射2次链脲佐菌素(STZ),进行间隔时间及注射剂量遴选实验。选用上述最佳造模法进行药效学及模型稳定性实验:将成模大鼠随机分为模型对照组和二甲双胍治疗组,4 w后检测药物影响;模型对照组(1/2)再继续普食饲养8 w,判断模型稳定性。结果 2次STZ腹腔注射间隔时间2 d组,成模率最高(90%),注射剂量以25 mg/kg+m2成模率最高(100%)。此法造模,所有大鼠禁食血糖、随机血糖均达糖尿病标准,且二甲双胍治疗有效;模型对照组无1例自愈。结论高脂高糖4 w+2次STZ腹腔注射(25 mg/kg+m2,间隔2 d)可成功制备高成模率和高稳定性的伴IR的糖尿病大鼠模型。

苦荞醋对糖尿病模型小鼠血糖的影响

研究了3种不同含量D-手性肌醇的苦荞醋给予STZ(链脲佐菌素)造成糖尿病模型小鼠血糖、口服糖耐量及血脂生化指标的影响。将健康的昆明雄小鼠随机分为对照组、模型组和苦荞醋2号低、中、高3个剂量组与苦荞醋1、3号高剂量组。饲养4周后,测定不同剂量苦荞醋对小鼠血糖、口服糖耐量的影响。结果表明在4周的血糖测量中,与模型组比较苦荞醋2号中剂量组均有显著性差异(P<0.05),血糖比模型组下降了17.2%。对小鼠口服糖耐量试验,苦荞醋2号可辅助抑制糖负荷引起的血糖升高。苦荞醋2号具有降血糖活性。

丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠VEGF及血小板参数的影响

[目的]探讨丹蛭降糖胶囊对糖尿病模型大鼠血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及血小板参数的影响。[方法]取大鼠58只,分为5组,除正常组外,其余组给予高脂饲料四周,按35mg·kg-1给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(Strep to zoe in,STZ)溶液1次,造模成功后除模型组和正常对照组外,各组连续灌胃药物4周,取血测定血糖血脂,VEGF及血小板参数。[结果]大鼠造模后VEGF的表达明显升高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01),给予丹蛭降糖灌胃后,VEGF的高表达明显降低(P<0.01),疗效优于吡格列酮组。造模后,模型组大鼠血小板计数(PLT)降低,血小板平均容积(MPV)、血小板分布宽度(PPW)增高,予丹蛭降糖方后PLT水平上调,MPV、PDW降低,丹蛭高剂量组与模型组比较具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);血糖及三酰甘油水平明显下降,与模型组比较(P<0.01)。[结论]具有益气养阴活血作用的丹蛭降糖胶囊,可控制VEGF的高表达,调节血小板参数,降低血糖及三酰甘油水平。

红芪多糖对改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的治疗作用。方法采用高热量饲料加低剂量注射链脲佐菌素(STZ)造模,分别予二甲双胍及HPS进行干预,测定干预后血糖(FPG)、血清胰岛素(Ins)、C肽(CP)、游离脂肪酸(FFA)水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果HPS可降低高热量饲料加STZ所致T2DM大鼠FPG,增加ISI,降低Ins及CP分泌,抑制FFA的产生。结论HPS可通过多途径多环节减轻糖尿病模型大鼠的胰岛素抵抗。

柞树叶水提物对Ⅱ型糖尿病模型小鼠的治疗作用

采用高糖高脂膳食加链脲佐菌素诱导制作Ⅱ型糖尿病模型小鼠,研究柞树叶水提物调节糖尿病模型小鼠血糖浓度、改善生命体征和减轻脏器损伤的作用。与模型对照组相比,按照5、15、30 mg/(kg·d)3种剂量灌胃给予柞树叶水提物的糖尿病模型小鼠的体征均有所改善,饮水和摄食量减少,且呈剂量依赖性;试验第4周,3种剂量给药治疗组糖尿病模型小鼠的空腹血糖浓度均显著或极显著降低,胰岛素敏感指数(ISI)显著升高,血清胰岛素(INS)和胰岛素受体β(IRS-β)浓度未见明显变化;3种剂量给药治疗组小鼠肝组织病理变化程度明显减轻,以30 mg/(kg·d)剂量给药治疗组效果最佳。试验结果提示,柞树叶水提物可能通过提高受体对胰岛素的敏感性,改善胰岛素抵抗而发挥降血糖作用,并使肝损伤明显减轻。

茧壳水煎剂对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的降血糖作用

用不同剂量的茧壳水煎剂分别对正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠进行了降血糖作用研究。结果显示 :干茧壳剂量为 1 6、3 2g/kg·d的茧壳水煎剂对正常小鼠连续灌胃 2 0d ,其血糖水平没有明显变化 ;用干茧壳剂量为 1 6g/kg·d的茧壳水煎剂对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠连续灌胃 2 0d ,或用干茧壳剂量为 3 2g/kg·d的茧壳水煎剂对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠连续灌胃 10d ,其血糖没有显著降低 ;而干茧壳剂量为 3 2g/kg·d的茧壳水煎剂对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠连续灌胃 14、2 0d ,有显著的降血糖作用 ,但是若不继续灌胃给药 ,则 7d后 ,这种降血糖作用又丧失。

超细大豆皮膳食纤维对糖尿病模型小鼠糖耐量的影响

目的:探讨超细大豆皮膳食纤维对正常和四氧嘧啶致糖尿病模型小鼠糖耐量的影响。方法:对正常和四氧嘧啶致糖尿病模型小鼠灌胃5g/kgbw超细大豆皮膳食纤维(140～200目和穿过200目)后进行血糖耐量实验。结果:与正常对照组比较,正常小鼠两个剂量组的血糖曲线下面积分别减小14.94%和15.48%,有显著性差异(P<0.05),餐后血糖峰值分别降低12.38%和12.51%;对糖尿病模型小鼠,两个剂量组的血糖曲线下面积分别减小24.05%和29.68%,有极显著性差异(P<0.01),餐后血糖峰值分别降低38.71%和39.26%。结论:超细大豆皮膳食纤维使正常和糖尿病模型小鼠的糖耐量有显著改善,使餐后血糖峰值及血糖值降低,但大豆皮膳食纤维的粒度差别对正常和糖尿病模型小鼠的血糖耐量和餐后血糖峰值影响差别不明显。

化腐再生法治疗糖尿病肌腱坏死模型大鼠的实验研究

目的探讨化腐再生法对糖尿病肌腱坏死模型大鼠的治疗效果及机理。方法将20只Wistar大鼠造成糖尿病大鼠模型,随机分为化腐再生组、单纯化腐组、单纯再生组、对照组。所有大鼠均采用物理化学联合方式造成两处表皮及肌腱坏死创口,之后分别采用不同药物换药治疗,并进行分泌物提取,观察创面的面积(cm2)与分泌物中活性因子的变化,并加以分析。结果在肌腱坏死大鼠模型的治疗中,与其他方法治疗相比,化腐再生组创面剩余面积较其他组明显缩小,在修复中后期较其他组有显著差异(P<0.05或P<0.01),创面渗出液中的总蛋白、总氨基酸、溶菌酶单位面积含量在不同时期显著增加,与创面愈合具有正相关关系。结论化腐再生法对糖尿病大鼠肌腱坏死模型的治疗效果明显优于其他各组疗法,其机理可能与各种活性因子共同作用有关。

改良链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型及其饲养方法

链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型的方法操作简单,模型可靠、稳定,因此该种方法被广泛应用于糖尿病的基础研究中。本实验通过对正常组和模型组两组大鼠的观察,发现:造模成功的大鼠在72h内体重比造模前普遍减少,多精神萎靡,皮毛缺少光泽,色灰黄,摄食量、饮水量、尿量明显增加。尾静脉采血法测量血糖时,要注意采血部位的局部消毒。

双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF家族表达的影响

目的:观察双丹明目胶囊对糖尿病大鼠模型视网膜VEGF家族因子VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,采用随机数字法分为A空白组、B模型组、C双丹明目组、D阳性对照组4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ 50mg/kg的剂量一次性大鼠尾静脉注射法建立糖尿病视网膜病变大鼠模型,造模后1wk开始连续灌胃用药,灌胃后4wk,处死动物,免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c的表达。结果:成模后用药第4wk,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度均高于正常组,其中模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0. 01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c表达的平均灰度值均高于模型组(P<0. 05),平均光密度值均低于模型组(P<0. 01)。结论:双丹明目胶囊能明显降低VEGF家族中VEGF-a、VEGF-b、VEGF-c在糖尿病模型大鼠视网膜中的表达,对其视网膜有一定的保护作用。

两种实验性糖尿病模型小鼠的比较

目的:通过对链脲佐菌素(STZ)模型鼠和db/db模型鼠的糖尿病模型鼠的特点以及对三类降糖药反应性的比较,客观评价两种糖尿病模型鼠在药物研究中的应用价值。方法:离乳、雄性BALB/c小鼠高脂饲料喂养4周后,空腹12h STZ(45mg/kg)腹腔注射,连续3次,一周后检测糖耐量受损、空腹血糖大于8.0mmol/L的为STZ模型鼠。将STZ模型鼠和8周龄空腹血糖大于8.0mmol/L的db/db模型鼠各随机分组,每组8只分别给予罗格列酮(12mg/kg)、格列苯脲(45mg/kg)、胰岛素(1U/kg)和生理盐水(0.1mL/10g),每天1次,连续给药4周后检测两模型鼠及其对照组糖脂代谢相关的生化指标及激素水平。结果:STZ模型鼠和db/db模型鼠分别与正常BALB/c鼠、C57BL鼠对比,STZ模型鼠和db/db模型鼠均口服葡萄糖耐量试验(OGTT)异常,空腹血糖、血TG和TC显著升高。但STZ模型鼠的胰岛素与C肽水平低于正常;而db/db鼠血C肽、胰岛素浓度显著升高;3种降糖药给药4周后STZ模型鼠的空腹血糖均明显降低,OGTT显著改善;罗格列酮对db/db模型鼠也可显著降低空腹血糖并改善糖耐量,但相同剂量的格列苯脲和胰岛素对db/db模型鼠的空腹血糖和糖耐量无影响。给予3倍剂量的胰岛素,db/db模型鼠才表现出空腹血糖的显著降低。结论:STZ模型鼠胰岛功能受损并有一定程度的胰岛素抵抗,对3种降糖药均敏感。db/db模型鼠表现出高度的胰岛素耐受,对内源性和外源性的胰岛素都不敏感,对罗格列酮的敏感性与STZ模型鼠相当。

家蚕预蛹粉对糖尿病模型小鼠的降血糖效果试验

利用变态发育至预蛹期的家蚕制备预蛹粉及脱脂预蛹粉,并添加至饲料中饲喂四氧嘧啶诱导糖尿病模型小鼠,观测小鼠血糖值及基本生理状况和主要脏器指数的改变。试验组糖尿病模型小鼠饲喂添加5%家蚕预蛹粉的饲料后,其"三多一少"症状有显著改善,肝脏指数、肾脏指数和血糖浓度均极显著降低,脾脏指数极显著提高,其中空腹血糖(FBG)比对照模型组小鼠下降20.38%,餐后血糖(PBG)下降39.07%;饲喂添加5%脱脂预蛹粉饲料的糖尿病模型小鼠,其控制血糖效果明显低于预蛹粉添加组。试验组糖尿病模型小鼠饲喂添加1%、5%和10%预蛹粉的饲料后的糖化血红蛋白(HbA1 c)均极显著低于对照模型组小鼠,分别降低了31.39%、45.89%和54.42%;5%和10%预蛹粉添加组模型小鼠的血清C肽极显著高于对照模型组小鼠,分别增加了18.97%和29.31%。试验结果显示,家蚕预蛹粉能有效控制糖尿病模型小鼠的血糖水平,并改善小鼠的基本生理状况和脏器指数,但总体效果略低于拜糖平添加组;脱脂后的家蚕预蛹粉的降血糖效果显著降低,提示其降血糖活性分子可能存在于脂溶性物质中。

糖尿病模型大鼠强骨宝方含药血清对成骨细胞培养上清液IL-6、TNF-α及AGEs的影响

目的:探讨强骨宝方糖尿病模型大鼠含药血清对体外培养成骨细胞上清液中IL-6、TNF-α及AGEs的影响。方法:采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原酶消化法从1-2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出成骨细胞,鉴定细胞后,分别用20%不灭活的强骨宝方糖尿病模型大鼠含药血清、单纯的糖尿病模型大鼠血清及正常大鼠血清加入成骨细胞培养体系,培养5d、7d及10d,分时段检测培养上清液中IL-6、TNF-α及AGEs的量。结果:强骨宝含药血清组第5d上清液中的IL-6(78.38±18.35)pg/ml、TNF-α(0.5731±0.4316)ng/ml及AGEs(71.52±22.13)荧光值/每毫克蛋白均显著低于模型对照组(P<0.01),并接近于空白对照组;而模型对照组各时段3项指标均显著高于相应的空白对照组(P<0.01),并且3项指标均随培养时间延长而显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:糖尿病模型大鼠血清会促进体外培养的成骨细胞分泌IL-6、TNF-α及AGEs的形成,糖尿病模型大鼠强骨宝方含药血清能有效抑制IL-6、TNF-α在正常水平并控制非酶促糖基化反应及AGEs的产生。

大波斯菊种子水提物对Ⅰ型糖尿病模型小鼠肝肾功能及生化指标的影响

为了研究大波斯菊种子水提物对Ⅰ型糖尿病模型小鼠肝肾功能及生化指标的影响。对阴性对照组(健康)、阳性对照组(糖尿病)、高浓度组(2.0g/mL)、中浓度组(1.0 g/mL)、低浓度组(0.5g/mL)分别连续30 d灌服生理盐水及不同浓度大波斯菊种子水提物,并进行肝肾及相关生化指标的测定。结果高浓度组较阳性对照组:肝脏、肾脏中MDA含量显著降低,而肝脏、肾脏中SOD和GSH含量显著升高,血液生化指标ALT、AST、TC、BUN显著降低。表明大波斯菊种子水提物可延缓糖尿病小鼠肝肾损伤状况。

双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响

目的观察双丹明目胶囊对糖尿病模型大鼠视网膜VEGF-a、VEGF-b表达的影响。方法将40只SD大鼠,采用随机数字表法分为A(正常组)、B(模型组)、C(双丹明目组)、D(阳性对照组)4组,每组10只20眼。将B、C、D三组实验大鼠采用STZ(以50 mg/kg的剂量)一次性尾静脉注射建立糖尿病视网膜病变模型,造模1周后开始连续灌胃用药,灌胃后4周、8周,分别处死一半动物,采用免疫组化法检测视网膜组织中VEGF-a、VEGF-b的表达。结果成模后用药第4周、8周,模型组、双丹明目组、阳性对照组视网膜中VEGF-a、VEGF-b蛋白表达平均灰度值均低于正常组,平均光密度值均高于正常组,其中模型组与正常组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);双丹明目组、阳性对照组VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值均高于模型组、平均光密度值均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论双丹明目胶囊能明显提高糖尿病模型大鼠视网膜中VEGF-a、VEGF-b表达的平均灰度值、降低其平均光密度值,表明双丹明目胶囊能明显降低VEGF-a、VEGF-b在视网膜中的表达。

通络方剂对1型糖尿病大鼠模型肾脏保护作用的形态学研究

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾脏病理改变的影响。方法SD大鼠给予STZ以50 mg/kg腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,随机分成糖尿病组、通络方剂治疗组。另选9只大鼠作为正常对照组。通络方剂治疗组给予通络方剂1.0 g/(kg.d)灌胃,其余大鼠予以等量蒸馏水灌胃,3组大鼠在相同环境条件下饲养。6周后处死,取肾脏行HE染色以及透射电镜观察肾皮质组织病理改变。结果糖尿病组大鼠与正常对照组大鼠相比,光镜及电镜下已出现糖尿病肾病病理改变,而通络方剂组肾皮质病理病变较轻。结论通络方剂对STZ诱导的1型糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用。