上调miR-210对糖尿病足模型大鼠的干预效果及作用机制研究

目的上调微小RNA-210(miR-210)对糖尿病足模型大鼠的干预效果及相关作用机制。方法选取健康、清洁级SD雄性大鼠40只,随机选取10只为空白组,剩余30只建立糖尿病足模型,成功27只随机分为模型组、阴性对照组、miR-210上调组,各9只。采用实时荧光定量PCR检测miR-210表达,统计创面愈合率,观察病理组织,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性因子、血管内皮活性相关因子水平,采用免疫印迹(Western blot)检测VEGF-PI3K/AKT-eNOS信号通路相关蛋白表达。结果模型组、阴性对照组、miR-210上调组miR-210表达均低于空白组;且miR-210上调组miR-210表达最高(P<0.05)。模型组、阴性对照组、miR-210上调组干预后3 d、干预后5 d创面愈合率均低于空白组,且miR-210上调组干预后3 d、干预后5 d创面愈合率最高(P<0.05)。4组干预后5 d创面愈合率均高于干预后3 d(P<0.05)。干预后5 d,模型组、阴性对照组、miR-210上调组IL-18、TNF-α、VCAM-1、ET水平均高于空白组,NO、NOS水平低于空白组,且miR-210上调组差异最明显(P<0.05)。干预后5 d,模型组、阴性对照组、miR-210上调组VEGF、SDF1α、AKT、eNOS表达均高于空白组,且miR-210上调组VEGF、SDF1α、AKT、eNOS表达最低(P<0.05)。结论上调miR-210能提高糖尿病足模型大鼠创面愈合率,抑制炎性反应,改善血管内皮活性,其作用机制可能与VEGF-PI3K/AKT-eNOS信号通路有关。

三黄生肤油联合硫化氢对糖尿病足模型大鼠的治疗作用

目的:观察三黄生肤油联合硫化氢对糖尿病足(DF)模型鼠的治疗作用。方法:利用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,随后利用切除足部皮肤制造DF模型。48只造模成功的DF模型大鼠使用数字表法分为基质对照组、硫化氢组、三黄生肤油组和三黄生肤油+硫化氢组,每组12只。各组大鼠采用相应药剂涂抹创面、2次/天,连续3周。比较四组治疗期间足底皮温、足底痛阈、创面愈合率和创面肉芽组织血管数。结果:治疗后,三黄生肤油+硫化氢组创面愈合率高于基质对照组(1、2、3周,P<0.05或P<0.01)、硫化氢组和三黄生肤油组(P<0.05)。硫化氢组和三黄生肤油组创面愈合率高于基质对照组(2,3周,P<0.05),但硫化氢组与三黄生肤油组创面愈合率无显著性差异(P>0.05)。治疗前四组足底皮温和足底痛阈无显著性差异(P>0.05)。三黄生肤油+硫化氢组治疗2、3周足底皮温高于基质对照组,足底痛阈低于基质对照组(P<0.05)。三黄生肤油+硫化氢组治疗3周足底皮温高于硫化氢组和三黄生肤油组,足底痛阈低于硫化氢组和三黄生肤油组(P<0.05)。硫化氢组和三黄生肤油组治疗3周足底皮温高于基质对照组,足底痛阈低于基质对照组(P<0.05),但硫化氢组和三黄生肤油组间无显著性差异(P>0.05)。创面肉芽组织中血管数,三黄生肤油+硫化氢组、硫化氢组和三黄生肤油组均高于基质对照组(P<0.05),三黄生肤油+硫化氢组又高于硫化氢组和三黄生肤油组(P<0.05)。结论:三黄生肤油联合硫化氢可改善DF模型鼠足底皮温和痛阈,增加创面血管生成,有利于创面的愈合,疗效优于单用三黄生肤油或硫化氢。

裸花紫珠调控IGF-1/PI3K/Akt信号通路对糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的影响

目的 探讨裸花紫珠调控胰岛素样生长因子(IGF)-1/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠创面愈合的影响。方法 采用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型大鼠,再用DM大鼠和正常大鼠构建溃疡模型,可分为正常组、模型组、凡士林纱布组、裸花紫珠组,每组12只。正常组和模型组均用生理盐水纱布外敷,凡士林纱布组(10 mg/kg),裸花紫珠组(20 mg/kg)。采用Photoshop软件测算大鼠创面愈合率,光学显微镜观察创缘组织结构变化。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测创面组织IGF-1、IGF-1受体(IGF-1R)、PI3K、Akt、一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、VEGF受体(VEGFR)2的基因表达水平;并用Western印迹检测各组组织中IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、eNOS、VEGF、VEGFR2蛋白表达水平。结果 治疗后第3、7天,与模型组比较,凡士林纱布组、裸花紫珠组创面愈合率显著升高,且治疗第7天裸花紫珠组和正常组显著高于凡士林纱布组(P<0.05);病理结果显示,除模型组外,各组毛细血管、炎症细胞、纤维细胞生长均明显增加;RT-PCR检测提示,正常组、凡士林纱布组及裸花紫珠组创面组织中IGF-1、IGF-1R、PI3K、Akt、eNOS、VEGF、VEGFR2 mRNA及蛋白表达均较模型组明显升高,且正常组及裸花紫珠组明显高于凡士林纱布组(P<0.05)。结论 裸花紫珠能有效促进DFU大鼠创面愈合,并可能通过IGF-1/PI3K/Akt信号通路发挥治疗作用。

通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血间充质干细胞的微环境影响

研究发现,通心络联合外周血间充质干细胞移植可通过调节HIF-1/VEGF通路及miR-210表达来促进内皮细胞增殖、分化,进而促进新生血管形成。然而,局部恶劣的微环境,如缺血缺氧、炎症反应、氧化应激等,不利于心肌梗死区干细胞移植后的生存、分化,致使其疗效受限。因此,本实验研究就通心络是否改善糖尿病足（dibetic foot,DF）大鼠缺血下肢外周血间充质干细胞移植炎症水平,以探讨其促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果的作用.

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及miR-210表达的影响

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达的影响。方法将70只♂Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,酶联免疫吸附测定VEGF-A和HIF-1α;大鼠缺血肢肌组织分别采用Western blot检测VEGF-A和VEGF-R2蛋白表达和RT-PCR检测VEGF-A基因表达。结果检测结果显示:与对照组比较,模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各用药组VEGF-A、VEGF-R2和mi R-210表达均明显升高(P<0.01),其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达,促进内皮细胞增殖、分化,促进新生血管形成。