氧糖剥夺再灌注对星形胶质细胞缝隙连接与糖摄取功能的影响

目的探讨氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下脑星形胶质细胞缝隙连接与糖摄取功能之间关系。方法取出生1 d的SD大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯化培养,通过OGD模拟缺血缺氧诱导激活培养的原代星形胶质细胞。实验分为正常组,OGD组与OGD+缝隙通道阻断剂CBX组(OGD+CBX组)。采用2-NBDG检测星形胶质细胞在OGD后不同再灌时间(0h,12 h,24 h,48 h)的糖摄取能力以及免疫荧光方法观察缝隙连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)数量与形态变化。结果星形胶质细胞经糖氧剥夺后,随着再灌时间延长糖摄取能力逐渐增加。再灌24 h OGD组糖摄取量为[(2.32±0,43)nmol/jigDNA],与对照组[(0.95±0.28)nmol/fjigDNA]相比糖摄取能力上调2.63倍(t=13.99,P=0.0024);再灌24 h时Cx43形成的缝隙斑点与0 h相比,缝隙连接数量增加2.5倍(t=11.34,P=0.003),斑点大小增加1.85倍(t=10.27,P=0.004)0与OGD组相比,OGD+CBX组再灌48 h星形胶质细胞糖摄取功能下降42%。结论OGD条件下星形胶质细胞Cx43缝隙连接增加糖摄取功能,可能为脑缺血临床治疗潜在靶点。