糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体及其配体mRNA在哮喘大鼠中性粒细胞上的表达及布地奈德干预的研究

目的:观察布地奈德对哮喘大鼠外周血中性粒细胞上糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)及其配体(GITRL)表达水平的影响。方法:将30只清洁级SD大鼠随机分为3组:对照组、哮喘组、布地奈德干预组,取外周血进行中性粒细胞的分离提纯,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法检测GITR/GITRL mRNA在中性粒细胞上的表达。结果:哮喘组中性粒细胞上的GITR/GITRL mRNA的表达水平(△CT分别为3.10±0.23,13.48±2.40)显著高于对照组(△CT分别为5.16±0.70,15.79±1.27)及布地奈德干预组(△CT分别为4.83±0.93,15.63±1.73)(均P<0.05);而布地奈德干预组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。对各组的GITR/GITRL mRNA表达水平进行直线相关分析,结果显示两者表达呈正相关(R2=0.669,P<0.01)。结论:中性粒细胞可能通过GITR/GITRL信号通路参与哮喘的气道炎症过程,布地奈德可能通过下调中性粒细胞上的GITR/GITRL的表达从而减轻哮喘气道炎症反应。

小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白生物信息学分析

目的获取小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白（GITR）氨基酸序列,并预测其结构和功能。方法利用网络平台及相关生物学软件对小鼠GITR氨基酸序列进行生物信息学分析。结果小鼠GITR氨基酸序列与人等其他物种具有56%的同源性,具有信号肽、胞外区、跨膜区及胞内区等结构;小鼠GITR蛋白胞外区位于第22-153号氨基酸序列区间;可能含有4个N-糖基化位点、4个丝氨酸磷酸化位点、1个苏氨酸磷酸化位点以及1个酪氨酸磷酸化位点。结论小鼠GITR氨基酸序列的生物信息学分析为进一步表达该蛋白及其相关功能研究奠定了基础。

动脉粥样硬化大鼠颈总动脉糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体的表达及意义

目的:通过检测动脉粥样硬化大鼠颈总动脉中糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand,GITRL)的表达,探讨GITRL在动脉粥样硬化过程中的变化及意义。方法:建立大鼠动脉粥样硬化模型,取其颈总动脉,观察粥样硬化病变,采用免疫组织化学及蛋白质印迹(Western blotting)法检测GITRL的表达。结果:动脉粥样硬化大鼠颈总动脉的血管壁脂质沉积明显增多;弹性纤维不完整,连续性破坏、中断。动脉粥样硬化大鼠颈总动脉血管内GITRL的表达水平明显高于非动脉粥样硬化大鼠。结论:GITRL作为高脂饮食后表达上调的一种血管炎性分子,有望作为预测动脉粥样硬化发生的一种独立危险因素。

系统性红斑狼疮患者CD4+ CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和叉状头螺旋转录因子的表达及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4 + CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)和叉状头螺旋转录因子(Foxp3)的表达及意义。方法采用流式细胞术检测40例SLE患者(SLE组)和13例健康对照者(对照组)外周血辅助性T细胞17(Thl7细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+ T细胞的百分比及CD4 + CD25 + T细胞Foxp3和GITR的表达并进行比较。分析SLE组患者上述指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分及狼疮肾炎(LN)的关系。结果SLE组Thl7细胞百分比、Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比及CD4+ CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于对照组,Treg细胞百分比低于对照组(P<O.05)。SLE组CD4+CD25 + T细胞GITR的阳性表达与SLEDAI评分呈正相关(P<0. 05).高疾病活动组Treg细胞百分比低于低疾病活动组,CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率高于低疾病活动组(P<0. 05)。LN组Thl7细胞百分比和CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于非LN组(P<0.05).结论SLE患者存在免疫失调和Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比失调,GITR的表达与SLE密切相关。

类风湿关节炎患者外周血中糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关基因及其配体的表达和意义

目的:研究糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)与其配体(GITRL)在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达及其与临床指标的相关性,探讨GITR/GITRL在RA中的意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测RA组(n=53)、骨关节炎(OA)组(n=35)及正常对照组(n=35)外周血GITR/GITRLmRNA含量,同时利用流式细胞仪检测上述三组患者的GITR在CD4+CD25+T细胞的表达,并研究GITRmRNA与RA患者DAS28评分、抗环瓜氨酸(CCP)抗体、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)及类风湿因子(RF)的关系。结果:RA患者外周血GITRmRNA水平和GITRLmRNA水平(分别为12.38±5.72,16.41±10.16)明显高于正常对照组(分别为8.75±3.78,11.99±8.42)及OA组(分别为9.59±5.87,12.09±7.53;均P<0.05)。RA患者与OA组及正常对照组比较,外周血CD4+CD25+GITR+T细胞的比例也明显增高[分别为(28.12±16.85)%,(21.01±14.42)%,(19.98±9.40)%,均P<0.05]。RA患者GITRmRNA表达水平与DAS28评分及ESR呈明显正相关(r值分别为0.361和0.427,P<0.01)。结论:RA患者GITR/GITRL表达增多,与RA发病及疾病活动度有关。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在调节性T细胞的表达及功能

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)是肿瘤坏死因子家族成员,在调节性T(Treg)细胞组成性高表达。自身免疫炎症过程中GITR的表达增加,参与调节Treg细胞活性并进一步诱导效应T细胞活化。GITR配体(GITRL)使GITR活化后导致Treg细胞的抑制功能下降。另外,GITR与多种细胞的凋亡相关,但GITR信号在机体免疫系统中的作用及GITR与T细胞之间的关系目前仍不清楚。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在Tregs介导下的免疫耐受作用的研究进展

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced TNF receptor,GITR)是胸腺和外周淋巴器官中调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)表达的一个重要功能分子,在Tregs的分化和扩张中起关键性作用,是人类Tregs非常有效的标记物,在Tregs的免疫调节中发挥重要作用。GITR具有许多重要的生物学活性,包括细胞的增殖、分化、存活和凋亡等,其相互作用可打破Tregs介导的免疫耐受,诱发或加重自身免疫性疾病,如哮喘、糖尿病、关节炎、系统性红斑狼疮等。妊娠选择了免疫耐受这一基本机制,Tregs在保护胎儿免受母体免疫攻击方面发挥重要作用,许多研究已表明:在妊娠期间中断Tregs的相互作用会导致胎儿特异性抗原的产生,继而导致不良妊娠结局。综述GITR在Tregs介导下的免疫耐受作用。

肿瘤坏死因子-α对角质形成细胞株HaCaT细胞糖皮质激素受体表达的影响

目的:研究肿瘤坏死因子(TNF)-α对角质形成细胞糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法:采用反转录实时定量PCR和Western blotting观察经TNF-α作用后,培养的人角质形成细胞株HaCaT细胞的GRα、GRβ mRNA和蛋白质的表达情况。结果:TNF-α对HaCaT细胞GRα的表达无明显影响,但可上调HaCaT细胞GRβ的表达,并且呈剂量和时间依赖。结论:TNF-α可增加GRβ的表达,可能是炎性细胞因子参与诱发糖皮质激素皮肤耐受现象的内在机制之一。

糖皮质激素受体-α、核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的:探讨糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)-α、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR-α、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达及其分布。结果:GR-α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致,GR-α不但在表皮呈弥漫性表达,还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而,与正常对照皮肤相比,GR-α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF-κB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中,在正常对照组皮肤中均为胞质表达,而在慢性皮炎组中为胞质表达和(或)胞核均有表达。TNF-α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异,为弱阳性反应。结论:慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR-α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。

慢性肾功能衰竭肾阳虚型大鼠肾组织细胞糖皮质激素受体、细胞白介素-1β及肿瘤坏死因子-α的变化

目的研究肾阳虚型慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾组织细胞糖皮质激素受体(GR)及白介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性因子的变化,探讨CRF肾阳虚证的证候学基础。方法采用腺嘌呤灌胃复制肾阳虚型CRF模型,并设正常组、模型组(腺嘌呤每日200 mg/kg)、济生肾气丸组(腺嘌呤每日200 mg/kg+济生肾气丸每日40 g/kg)、保肾康组(腺嘌呤每日200 mg/kg+保肾康每日33.3 mg/kg),保肾康为对照组。实验全过程24 d,第1～12日每日灌胃1次,第12日后隔日灌胃1次。实验结束,用酶联免疫吸附法测定肾组织IL-1β、INF-α及GR的水平。结果模型组大鼠肾组织细胞IL-1β、INF-α水平明显升高,GR水平明显降低。济生肾气丸组、保肾康组与模型组比较IL-1β、INF-α水平显著降低,GR水平显著升高。济生肾气丸组同保肾康组比较IL-1β、INF-α明显降低,GR水平明显升高。结论 IL-1β、INF-α及GR与CRF肾阳虚证密切相关;济生肾气丸能降低IL-1β、TNF-a水平,并能提高GR的活性。

肿瘤坏死因子及其单克隆抗体对肾病综合征复发患者糖皮质激素受体表达的影响

【目的】研究肿瘤坏死因子α（TNF-α及其单克隆抗体（简称单抗）对肾病综合征（NS）复发患者外周血单个核细胞（PBMC）糖皮质激素受体（GR）亚型表达的影响。[方法]25例NS患者根据病情分为NS复发组（A组，13例）、NS稳定组（B组，12例）；ELISA法检测两组及正常对照组（C组）TNF-α、TNF—α单抗干预前后的PBMC培养液上清中ORa、GRp的蛋白表达。【结果】干预前A组GRn表达低于B、c组，GR8表达高于B、C组，且差异均有显著性（P〈0．05）。TNF-α干预后三组GRβ表达较干预前高，A组GRa较干预前低，差异均有显著性（P〈0．05），TNF-α及其单抗干预后三组GR8表达较各TNF-α干预组低，A组GRd表达较其TNF-α干预组高（P〈0．05），较干预前则均无明显变化（P〉0．05）。TNF-α单抗干预后A组GRα表达较干预前高，GRf]表达较干预前低，且差异均有显著性（P〈0．05）。[结论]NS复发与GRa表达减低、GRβ表达亢进有关，TNF-α可能通过引起GR亚型比例改变参与Ns复发，而其单抗可缓解这种改变。

阻断糖皮质激素受体对严重烫伤大鼠血浆肿瘤坏死因子含量的影响

目的：为进一步阐明烫伤后糖皮质激素受体（ＧＲ）减少，对血浆肿瘤 坏死因子（ＴＮＦ）含量的影响。方法 以 ＲＵ３８４８６阻断大鼠体内的 ＧＲ，观察其血 浆肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）含量的变化。结果 烫伤８小时后，大鼠血浆中ＴＮＦ含量 是对照组的１２．５倍（Ｐ＜０．０１），复合ＧＲ阻断后，将进一步提高。结论 烫伤后 ＧＲ减少，可导致体内ＴＮＦ释放增多，这可能正是ＧＲ减少加重烫伤后肺、肾功能 衰竭的原因之一。

糖皮质激素或肿瘤坏死因子拮抗剂联合改善病情抗风湿药物治疗难治性类风湿关节炎的疗效和对Th17/调节性T细胞平衡影响探析

目的对应用抗风湿类药物与糖皮质激素或肿瘤坏死因子拮抗剂类药物联合对难治性类风湿性关节炎疾病实施治疗的效果进行对比研究。方法将90例难治性类风湿性关节炎患者分为对照组和治疗组,平均每组45例。采用抗风湿类药物与肿瘤坏死因子拮抗剂类药物联合对对照组患者实施治疗;采用抗风湿类药物与糖皮质激素类药物联合对治疗组患者实施治疗。结果治疗组患者难治性类风湿性关节炎疾病治疗效果明显优于对照组;Th17/调节性T细胞比值的改善幅度明显大于对照组;关节炎症状消失时间和用药治疗总时间明显短于对照组。结论应用抗风湿类药物与糖皮质激素剂类药物联合治疗难治性类风湿性关节炎效果明显。

脓毒症时骨骼肌细胞糖皮质激素受体表达与低氧诱导因子关系的研究

目的研究脓毒症时骨骼肌中糖皮质激素受体(GR)表达与低氧诱导因子(HIF-1α)的关系,进一步阐明脓毒症时骨骼肌蛋白高分解代谢的机制。方法 54只Balb/c小鼠随机分为对照组、脓毒症组和治疗组。脓毒症组通过采用腹腔注射脂多糖(10mg/kg)诱导脓毒症(n=24);治疗组(n=24)在伤前2h分别使用糖皮质激素受体拮抗剂(RU38486(10mg/kg)灌胃,余处理同脓毒症组。同时设立对照组(n=6),于伤后24、6、1、2h取材。利用蛋白免疫印迹(western blot)测定肌组织重链肌球蛋白(MHC),半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GR和HIF-1αmRNA的表达变化。结果在内毒素注射6h后,脓毒症小鼠骨骼肌MHC的含量较对照组显著减少,伤前使用糖皮质激素受体拮抗剂RU38486灌胃,于6h后骨骼肌MHC含量增多,后期均高于脓毒症组。脓毒症小鼠GR与HIF-1αmRNA表达在整个实验过程中显著增加;使用RU38486灌胃后,于伤后6h GR mRNA的表达明显降低(P<0.05),并维持在较低水平,在整个治疗过程中HIF-1α明显降低。相关性分析表明,脓毒症中GR与HIF-1α的表达呈正相关。结论体内GR表达增高是脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解显著增加的原因之一,其作用可能是在基因水平与HIF-1α协同作用,进而导致骨骼肌蛋白分解增强。

糖皮质激素对脑外伤患者血浆肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β的调控作用

目的研究糖皮质激素（glucocorticoid,GC）对脑外伤患者血浆肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）的调控作用,指导临床合理用药。方法随机选取2013年4月-2016年8月入住厦门大学附属第一医院神经外科的脑外伤患者120例,依随机表对照法随机分为激素组60例和非激素组60例,另外选择60例健康的体检者作为对照组。激素组给予常规剂量的地塞米松治疗1周。对照组不做任何处理。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定2组患者在治疗后第1、2、7、14天时血浆中TNF-α和IL-1β的含量。结果在第1、2天激素组的血浆中TNF-α和IL-1β的含量明显高于对照组（P〈0.05）,与非激素组差异无统计学意义。而在第7、14天明显低于非激素组（P〈0.05）,与对照组无明显差异。结论糖皮质激素对脑外伤患者TNF-α和IL-1β的调控具有明显的滞后性,损伤早期不能及时降低TNF-α和IL-1β的含量,在恢复期又使其降低,削弱了其对神经的保护作用,这可能会加剧患者的病情。

吸入型糖皮质激素对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清白介素-8、肿瘤坏死因子α水平及肺功能的影响

研究表明,慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血液中某些炎性细胞因子如白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平增高〔1〕。吸入型糖皮质激素（ICS）是COPD稳定期维持治疗的重要药物,可以改善肺通气,阻止气道阻塞继续进展,其作用机制较为复杂。

毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、微小RNA-302e、核因子-κB mRNA水平变化及意义

目的:探讨毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-302e、核因子-κB(NF-κB)mRNA水平变化及意义。方法:选取毛细支气管炎患儿108例为研究对象,均行糖皮质激素治疗。比较糖皮质激素治疗前后患儿血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平变化。采用Pearson法分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA间的相关性。根据糖皮质激素治疗效果将患儿分为有效组和无效组,比较不同疗效患儿一般资料及生化指标。分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平对糖皮质激素治疗效果的影响,以及它们对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值。结果:糖皮质激素治疗后患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平低于治疗前,miR-302e水平高于治疗前(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患儿血清IL-6与TNF-α、NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.512、0.564,均P<0.05),与miR-302e呈负相关(r=-0.573,P<0.05);患儿血清TNF-α与NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.521,P<0.05),与miR-302e水平呈负相关(r=-0.559,P<0.05);患儿血清miR-302e与NF-κB mRNA水平呈负相关(r=-0.571,P<0.05)。无效组患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平,以及重度病情患儿占比高于有效组,miR-302e水平低于有效组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平异常以及病情严重程度(重度)是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素(均P<0.05)。血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值高于上述指标单独预测。结论:经糖皮质激素治疗后,毛细支气管炎患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平降低,miR-302e水平升高,四者水平异常是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素,联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值更高。

抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6对脓毒症诱导的心肌功能障碍保护机制的研究进展

心脏是脓毒症最常并发功能障碍的器官之一。脓毒症诱导的心肌功能障碍在重症监护病房患者中的发病率和死亡率均较高,患者的医疗负担较重。研究表明,抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的表达有利于减轻脓毒症诱导的心肌功能障碍,但具体作用机制尚未完全阐明。本文阐述TRAF6在脓毒症心肌细胞自噬、炎症反应、氧化应激及细胞凋亡等方面的调控机制,探讨抑制TRAF6的表达对脓毒症诱导的心肌功能障碍保护机制的研究进展。

血清可溶性肿瘤坏死因子受体P55、金属硫蛋白1E对雌激素受体阳性乳腺癌根治术病人临床转归的影响

目的探讨血清可溶性肿瘤坏死因子受体P55(sTNFR-P55)、金属硫蛋白1E(MT1E)对雌激素受体(ER)阳性乳腺癌根治术病人临床转归的影响。方法2017年2月~2018年3月在本院治疗的ER阳性乳腺癌根治术病人146例,依据术后临床转归情况分为复发转移组和未复发转移组,比较两组病人的临床资料、血清sTNFR-P55、MT1E水平。采用多因素Logistic回归分析影响ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的相关因素。制作受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)分析血清sTNFR-P55、MT1E及两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的预测价值。结果截止随访结束,146例ER阳性乳腺癌根治术病人共有32例发生复发转移。复发转移组肿瘤直径、肿瘤坏死因子-α、糖类抗原125(CA125)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、肿瘤分期为Ⅲ期占比、血清sTNFR-P55、MT1E水平均高于未复发转移组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CYFRA21-1(OR=2.768,95%CI 1.107~6.920)、CEA(OR=2.751,95%CI 1.101~6.879)、肿瘤分期为Ⅲ期(OR=3.611,95%CI 1.444~9.029)、sTNFR-P55(OR=3.343,95%CI 1.337~8.361)及MT1E(OR=3.267,95%CI 1.307~8.169)均为影响ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的相关因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sTNFR-P55、MT1E及两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归预测的灵敏度分别为78.12%(95%CI 59.56~90.06)、75.00%(95%CI 56.25~87.87)、71.88%(95%CI 53.02~85.60),特异度分别为63.16%(95%CI 53.56~71.85)、75.44%(95%CI 66.32~82.80)、96.49%(95%CI 90.73~98.87),AUC分别为0.723(95%CI 0.642~0.793)、0.760(95%CI 0.682~0.827)、0.880(95%CI 0.816~0.928)。结论血清sTNFR-P55、MT1E与ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归有关,且血清sTNFR-P55、MT1E两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归预测效能较高。