糖皮质激素诱导转录因子1基因中rs37973位点基因型对哮喘发病的影响

近年来,哮喘的发病率和死亡率明显升高,其发病涉及遗传、吸烟、环境污染等多种因素。有研究发现,哮喘患者存在明显的家族聚集倾向,遗传度达到60.0%~80.0%[1],这为研究哮喘的发病机制和分子遗传学诊断提供了重要思路。近年来,全基因组关联分析(GWAS)的迅猛发展为基因研究提供了全新手段,与传统候选基因相联分析比较具有一定优势。药物基因组学研究发现,糖皮质激素诱导转录因子1(GLGGI1)基因可明显降低糖皮质激素治疗的反应性[2],且rs37973位点突变起重要作用,其多态性可有效预测糖皮质激素治疗效果。本研究对哮喘患者GLGGI1基因rs37973位点多态性与哮喘发病的相关性进行分析,为哮喘的早期预防、诊断及治疗提供指导。

153例汉族哮喘患者GLCCI1基因rs37973位点多态性及吸入糖皮质激素治疗反应

目的观察中国汉族哮喘患者糖皮质激素诱导转录因子1(GLCCI1)基因rs37973位点的多态性,并比较不同基因型患者吸入糖皮质激素(ICS)的治疗反应。方法选择中国汉族哮喘患者153例,给予吸入布地奈德200μg、2次/d,治疗12周。治疗前采集静脉血,采用PCR法观察GLCCI1基因rs37973位点多态性。对所有患者进行哮喘控制测试评分(ACT)。分别于治疗前及治疗后12周进行肺功能检测,记录第一秒用力呼气容积(FEV1)、第一秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1/Pred%)、第一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC%),计算FEV1改善率与ΔFEV1/预计值%。结果纳入患者GLCCI1基因rs37973位点存在多态性现象,包括AA基因型36例(23.5%)、AG基因型91例(59.5%)、GG基因型26例(17.0%)。三种基因型患者年龄、性别、体质量指数差异无统计学意义,治疗前ACT评分、FEV1、FEV1/Pred%、FEV1/FVC%差异均无统计学意义。GLCCI1基因rs37973位点AA、AG、GG型患者ICS治疗后FEV1改善率、ΔFEV1/预计值%逐渐降低,三组两两相比,P均<0.05。结论汉族哮喘患者存在GLCCI1基因rs37973位点多态性现象,其中AA基因型哮喘患者ICS治疗后肺功能改善情况优于AG、GG基因型哮喘患者。GLCCI1基因rs37973位点多态性可能与哮喘患者ICS治疗反应存在一定相关性。

慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜组织HIF-1α、MUC5AC表达与糖皮质激素抵抗的关系

目的探究慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜组织诱导缺氧因子-1α(HIF-1α)、黏蛋白5AC(MUC5AC)表达与糖皮质激素抵抗的关系。方法选取开滦总医院耳鼻喉科2017年8月至2022年6月接诊的160例慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者为研究对象。给予患者口服泼尼松龙(0.5 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续服用14 d)。治疗前后采用鼻息肉内镜评分系统进行评分,根据评分下降情况分为正常组(n=131)和抵抗组(n=29)。采用免疫组化和实时荧光定量PCR(RT-PCR)观察HIF-1α与MUC5AC在细胞内的表达位置和两者mRNA的表达水平。采用Pearson相关性分析HIF-1α与MUC5AC mRNA表达的相关性。将HIF-1α与MUC5AC mRNA的表达进行单因素和多因素Logistic回归分析和受试者工作特征曲线(ROC)分析。结果抵抗组患者鼻黏膜组织中HIF-1α和MUC5AC mRNA的表达高于正常组(P<0.05)。病理分析显示,HIF-1α主要在细胞核中表达,在细胞质中部分表达;MUC5AC主要在细胞质内表达。Pearson相关性分析显示,患者鼻黏膜组织中HIF-1α与MUC5AC mRNA表达之间呈正相关(r=0.596,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,HIF-1α高表达、MUC5AC高表达是糖皮质激素抵抗发生的独立危险因素(OR=3.268、3.057,P<0.05)。ROC曲线分析显示,以HIF-1αmRNA表达水平≥0.549和MUC5AC mRNA表达水平≥0.543作为预测糖皮质激素抵抗的分界点曲线下面积分别为0.804、0.706,灵敏度为68.70%、86.21%,特异度为76.34%、75.86%。结论慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜组织中HIF-1α、MUC5AC表达水平与糖皮质激素抵抗关系密切,可以作为预测糖皮质激素治疗慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者临床疗效的可靠参考指标。

血清-糖皮质激素诱导激酶1基因对少突胶质细胞分化的影响

目的:探讨血清-糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)对少突胶质细胞分化的影响.方法:利用免疫荧光染色检测糖皮质激素对体外培养少突胶质前体细胞(OPCs)分化的影响;原位杂交检测SGK1在少突胶质细胞中的表达情况;通过构建SGK1真核表达载体和鸡胚神经管电穿孔转化,研究SGK1过表达对少突胶质细胞发生发展的影响.结果:在体外,SGK1的激活物氢化可的松能促进OPCs分化;抑制物GSK650394则会阻断OPCs分化,鸡胚神经管过表达SGK1会促进少突胶质细胞转录因子2和Sox10的提前表达.结论:SGK1能促进少突胶质前体细胞的发生及分化.

系统性红斑狼疮患者CD4+ CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和叉状头螺旋转录因子的表达及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4 + CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)和叉状头螺旋转录因子(Foxp3)的表达及意义。方法采用流式细胞术检测40例SLE患者(SLE组)和13例健康对照者(对照组)外周血辅助性T细胞17(Thl7细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+ T细胞的百分比及CD4 + CD25 + T细胞Foxp3和GITR的表达并进行比较。分析SLE组患者上述指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分及狼疮肾炎(LN)的关系。结果SLE组Thl7细胞百分比、Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比及CD4+ CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于对照组,Treg细胞百分比低于对照组(P<O.05)。SLE组CD4+CD25 + T细胞GITR的阳性表达与SLEDAI评分呈正相关(P<0. 05).高疾病活动组Treg细胞百分比低于低疾病活动组,CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率高于低疾病活动组(P<0. 05)。LN组Thl7细胞百分比和CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于非LN组(P<0.05).结论SLE患者存在免疫失调和Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比失调,GITR的表达与SLE密切相关。

组蛋白脱乙酰酶2-核转录因子-κB/激活蛋白-1介导的重度哮喘对糖皮质激素不敏感的分子机制

目的探讨重度哮喘患者对糖皮质激素不敏感的分子机制,尤其从糖皮质激素/糖皮质激素受体(glucocorticoid/glucocorticoid receptor,GC/GR)及组蛋白脱乙酰酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)及其下游的炎性转录因子途径进行研究。方法临床招募健康对照者12例,轻中度哮喘患者12例,重度哮喘患者10例,收集其外周血,进行地塞米松(dexamethasone,Dex)抑制IL-8释放试验,检测重度哮喘患者外周血单个核细胞(peripheral blood molecule cells,PBMCs)是否存在激素敏感性下降。通过Western blot和细胞免疫荧光染色法检测PBMCs的GRα蛋白质水平及跨膜转运情况。HDAC2活性试剂盒检测PBMCs核蛋白的HDAC2活性,Western blot检测磷酸化NF-κB、激活蛋白1(activating protein-1,AP-1)的亚基磷酸化c-Jun及磷酸化c-Fos的水平。结果重度哮喘患者PBMCs在TNFα诱导IL-8释放实验中表现出对Dex敏感性下降;GR总蛋白质水平虽然代偿性升高,但GRα水平下降且向核内转移减弱;HDAC2活性降低,炎性转录因子NF-κB、AP-1亚基被激活。结论重度哮喘患者的PBMCs中存在激素不敏感,可能是通过HDAC2-NF-κB/Ap-1介导的炎症通路引起了GRα表达量下降和转运能力降低。

坎地沙坦对糖尿病肾病小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1表达的影响及意义

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂坎地沙坦(candesartan)对糖尿病肾病(D iabetic nephrop-athy,DN)小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)表达的影响及意义。方法采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病(DN)模型。将正常C57BL/6小鼠随机分成3组,每组12只:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)、Candesartan治疗组(DC组)。治疗8 wk后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾皮质SGK1及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达;W estern b lot检测各组肾皮质中SGK1及CTGF蛋白的表达。结果与N组相比,D组小鼠肾重/体重、24 h尿蛋白量,肾小球滤过率均明显增加;肾皮质中SGK1、CTGF mRNA及蛋白质的表达均明显升高。经Candesartan干预后(DC组),相应生化指标较D组有明显改善,SGK1、CTGF的表达水平较D组亦有明显下调。纤维化指标CTGF的表达与SGK1呈正相关。结论Candesartan可以延缓糖尿病肾病的肾脏纤维化过程,它对细胞内SGK1信号转导途径的抑制作用可能是其抗纤维化作用的主要环节,该作用与AngⅡ-AT1途径被阻断有关。

甲状旁腺激素对大鼠成骨细胞转化生长因子-β_1基因转录的影响

目的:探讨甲状旁腺激素(PTH)对大鼠成骨细胞(ROB)的转化生长因子-β1-(TGF-β1)基因转录的影响。方法:ROB被分成3组培养:(1)对照组,在每个培养周期(48h)的前6h和后42h的培养液中均不加PTH;(2)PTH间歇刺激组(间刺组),仅在前6h的培养液中加PTH;(3)PTH持续刺激组(持刺组),前6h和后42h的培养液中均加PTH。第3周期细胞内mRNA含量用RT-PCR测定。结果:第3周期细胞内mRNA含量变化情况为:第6小时以间刺组最高,其余二组相似;第24小时依次是间刺组>对照组>持刺组;第48小时间刺组与对照组相似,持刺组最低。结论:PTH间歇与持续刺激对TGF-β1基因转录均有明显影响,该基因转录增强可能是PTH间歇刺激促成骨机制之一。

脓毒症时骨骼肌细胞糖皮质激素受体表达与低氧诱导因子关系的研究

目的研究脓毒症时骨骼肌中糖皮质激素受体(GR)表达与低氧诱导因子(HIF-1α)的关系,进一步阐明脓毒症时骨骼肌蛋白高分解代谢的机制。方法 54只Balb/c小鼠随机分为对照组、脓毒症组和治疗组。脓毒症组通过采用腹腔注射脂多糖(10mg/kg)诱导脓毒症(n=24);治疗组(n=24)在伤前2h分别使用糖皮质激素受体拮抗剂(RU38486(10mg/kg)灌胃,余处理同脓毒症组。同时设立对照组(n=6),于伤后24、6、1、2h取材。利用蛋白免疫印迹(western blot)测定肌组织重链肌球蛋白(MHC),半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测GR和HIF-1αmRNA的表达变化。结果在内毒素注射6h后,脓毒症小鼠骨骼肌MHC的含量较对照组显著减少,伤前使用糖皮质激素受体拮抗剂RU38486灌胃,于6h后骨骼肌MHC含量增多,后期均高于脓毒症组。脓毒症小鼠GR与HIF-1αmRNA表达在整个实验过程中显著增加;使用RU38486灌胃后,于伤后6h GR mRNA的表达明显降低(P<0.05),并维持在较低水平,在整个治疗过程中HIF-1α明显降低。相关性分析表明,脓毒症中GR与HIF-1α的表达呈正相关。结论体内GR表达增高是脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解显著增加的原因之一,其作用可能是在基因水平与HIF-1α协同作用,进而导致骨骼肌蛋白分解增强。

牦牛垂体特异转录因子-1、生长激素和α-乳清蛋白基因多态性的分析

利用PCR-RFLP技术分析了麦洼牦牛、九龙牦牛和西藏牦牛GH、Pit-1和α-LA基因的多态性。采用普通牛所用的PCR引物均能在牦牛上正确地扩增出上述几个基因相应大小的片段。GH、Pit-1和α-LA(-1689)基因特定位点均未检测到多态性,基因型分别为AA、BB和AA;利用PCR-RFLP分析牦牛乳蛋白基因型具有准确、快速的特点,并能对新生牦牛和公牦牛乳蛋白或泌乳相关基因型进行分析。

转录因子基因Mfhb-1的表达对苜蓿体细胞胚胎发生过程中主要内源激素含量的影响

以经2,4-D诱导的苜蓿幼嫩叶片的叶肉细胞为材料,利用HPLC技术对Mfhb-1基因的正义、反义转化植株体细胞胚胎发生过程中的的主要内源激素含量进行测定。结果显示,Mfhb-1基因的表达可能在苜蓿体细胞胚胎发生诱导初期抑制了IAA、GA3和ZT的合成,促进了ABA的合成。

家蚕保幼激素信号途径中转录因子BmKr-h1的基因克隆与表达分析

Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2锌指结构的转录因子,在昆虫变态发育中起重要作用。从家蚕5龄第3天幼虫的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,该基因全长c DNA为1 918 bp,其中开放阅读框1 047 bp,GC含量42.2%,编码348个氨基酸。氨基酸序列比对分析发现大部分昆虫物种的Kr-h1都含有8个锌指结构,暗示该蛋白质的功能具有一定的保守性。通过生物信息学方法预测Bm Kr-h1不含信号肽和糖基化位点,但含有19个可能的磷酸化位点,暗示其活性可能受到磷酸化和去磷酸化修饰的影响。利用原核表达系统表达获得了可溶的Bm Kr-h1蛋白并制备了抗体。Western blot和半定量RT-PCR检测的结果显示,不论在mRNA水平还是蛋白质水平,Bm Kr-h1在家蚕幼虫5龄初期和吐丝期的翅原基都有较高水平表达,而在蛹期的表达量较低。用保幼激素(JH)类似物Methoprene和蜕皮激素(20E)分别注射家蚕5龄第3天幼虫,发现2种激素均能诱导蚕体内Bm Kr-h1的表达上调。免疫组织化学结果显示,Bm Kr-h1在5龄第3天幼虫各组织中的表达量很低,而在吐丝期的中肠、脂肪体和表皮中都有一定水平的表达,暗示其可能参与家蚕蜕皮变态的过程。上述结果表明Bm Kr-h1可以响应JH和20E的诱导,提示其在家蚕的变态发育中发挥作用。

哮喘患者GLCCI_1基因检测指导吸入糖皮质激素的安全性用药效果

目的探讨哮喘患者GLCCI_1基因检测指导吸入糖皮质激素安全性用药的临床价值。方法选取80例哮喘患者,依据GLCCI_1基因检测结果分为野生型等位基因组(n=64)以及突变型等位基因组(n=16),均采用布地奈德气雾剂治疗,比较2组患者临床疗效。结果野生型等位基因组患者治疗总有效率92.2%,不良反应发生率7.8%,而突变型等位基因组患者治疗总有效率75%,不良反应发生率25%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者FEV1、FEV1/FVC、FVC、PEF比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GLCCI_1基因检测可显著提高吸入糖皮质激素治疗效果并降低不良反应发生率。

血清和糖皮质激素诱导激酶1 rs9402571和rs72550326与复发性流产的关系

目的探讨血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)rs9402571和rs72550326与复发性流产之间的关系。方法采用病例对照研究方法,收集40例自然流产患者(自然流产组)及24例复发性流产患者(复发性流产组)抗凝血,另收集同期40例人工流产患者为对照组,利用3730XL测序仪测序研究SGK1 rs9402571和rs72550326基因多态性。结果 SGK1-rs9402571基因型:对照组为GT和TT,而自然流产组和复发性流产组均以GT为主,其次是TT和GG。3组基因型和等位基因频率分布比较差异有统计学意义(P<0.05)。SGK1-rs72550326基因型:对照组为CC和CG,而自然流产组以CC为主,其次是CG,复发性流产组以CC为主,其次是GG。3组基因型分布比较差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SGK1 rs9402571可能与复发性流产有关。

激素性股骨头坏死过程中低氧诱导因子1α与骨细胞凋亡

背景:激素性股骨头缺血坏死发病机制未明,缺血缺氧是其根本原因,缺氧状态下低氧诱导因子1α参与多种信号通路传导。作者的前期研究发现,骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血坏死存在关联。目的:分析低氧诱导因子1α和骨细胞凋亡是否与激素性股骨头缺血坏死存在关联。方法:选健康5月龄新西兰白兔20只,随机分为空白对照组和实验组,每组10只。实验组兔给予激素联合内毒素制备激素性股骨头缺血坏死模型。最后一次给药后第4周处死所有实验动物,取双侧后肢股骨头,光镜与电子显微镜下观察形态与超微结构变化,计算各组空缺骨陷窝;应用免疫组织化学技术检测低氧诱导因子1α表达,应用TUNEL法检测骨细胞凋亡。结果与结论:实验组空缺骨陷窝率高于空白对照组(P<0.01);实验组骨细胞凋亡高于空白对照组(P<0.01);实验组低氧诱导因子1α低于空白对照组(P<0.01);实验组中低氧诱导因子1α表达与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.675),实验组中空缺骨陷窝率与细胞凋亡率呈正相关(r=0.793)。结果说明,在激素性股骨头缺血坏死早期,低氧诱导因子1α的低表达与骨细胞凋亡存在相关性,二者参与了激素性股骨头缺血坏死的病理变化过程,骨细胞的死亡方式为凋亡。

糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白与炎症反应关系的研究

目的探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白（GILZ）在炎症反应过程中的作用机制。方法采用无血清RPMI1640培养基分两组培养人单核细胞株THP-1细胞，其中刺激组加入地塞米松（DEX）刺激，而对照组仅加无血清RPMI1640培养基。12h后提取两组细胞总RNA和总蛋白；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法在转录水平半定量检测GILZ基因；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）在翻译水平检测核转录因子κB（NF-κB）p65与激活蛋白-1（AP-1）的蛋白表达。收集10例临床创伤患者[创伤严重度评分（ISS）≥16分]伤后24h内的外周血，提取白细胞后分为刺激组和对照组，对照组给予无血清RPMI1640培养基。刺激组在对照组的基础上加入DEX刺激，培养12h后提取白细胞总RNA和总蛋白；用RT-PCR方法在转录水平半定量检测GILZ基因；用Western blotting方法在翻译水平检测NF-κB p65与AP-1的蛋白表达。结果在DEX刺激下，DEX刺激组THP-1细胞和创伤患者外周血白细胞GILZ mRNA表达水平均较对照组升高（P均＜0．01）；DEX刺激组NF-κB p65与AP-1蛋白在THP-1细胞和创伤患者外周血白细胞的表达水平均低于对照组（P均＜0．01）。结论糖皮质激素可上调GILZ基因表达；GILZ的高表达可以抑制NF-κB与AP-1的活性，具有抗炎症反应的作用。

血清和糖皮质激素诱导激酶1 rs2811681和rs2758152与自然流产的关系

目的探讨血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)rs2811681和rs2758152与自然流产之间的关系。方法选取2013年1~12月我院64例自然流产患者作为病例组,同期40例人工流产患者作为对照组,采用3730XL测序仪检测血清SGK1 rs2811681和rs2758152基因多态性,χ2检验比较病例组与对照组基因型及等位基因频率分布。结果 1 SGK1-rs2811681对照组基因型是AG+GG,而病例组以AG+GG为主,其次是AA,两组基因型分布比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组等位基因A和G频率各占50.0%,而病例组A占64.8%,G占35.2%,对照组和病例组等位基因频率比较差异具有统计学意义(P<0.05),2 SGK1-rs2758152对照组基因型GT+TT和GG各占50.0%,而病例组GT+TT占29.7%,GG占70.3%;等位基因频率对照组G占75.0%,T占25.0%,而病例组G占82.0%,T占18.0%。对照组和病例组基因型及等位基因频率比较均无统计学意义(P>0.05)。结论 SGK1 rs2811681与自然流产有关,而SGK1 rs2758152与自然流产无关。

雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响

背景:雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少,其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的:分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法:实验分3组:空白对照组(即h FOB 1.19,未感染任何反转录病毒)、阴性对照组(即含无效干扰片断雌激素受体β-sh RNA-nc)、最佳RNAi组(即ERβ-sh RNA-3)。将前期最佳RNAi组的雌激素受体β-sh RNA反转录病毒载体感染人成骨细胞,通过抗性筛选并扩大培养,利用MTT法检测雌激素受体β稳定抑制后对细胞增殖的影响;随后在雌激素干预下,通过Western blot技术检测雌激素受体β蛋白表达的稳定抑制效率,并使用半定量RT-PCR和Western blot技术检测雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。结果与结论:(1)成功筛选出稳定感染ERβ-shR NA-3反转录病毒载体的人成骨细胞,MTT法检测显示雌激素受体β稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响(P>0.05);(2)在雌激素干预下,雌激素受体β蛋白的抑制率为(93.11±0.57)%(P<0.05),且雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1 mR NA和蛋白的上调率分别为(26.65±3.81)%和(23.79±3.76)%,骨形态发生蛋白2 mR NA和蛋白的上调率分别为(16.62±1.71)%和(18.08±3.20)%(均P<0.05);(3)结果提示雌激素受体β可能通过调控转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2的表达在骨代谢中发挥作用。

围手术期糖皮质激素对鼻息肉组织miR-200a、HIF-1α、VEGF表达的影响

目的探讨围术期糖皮质激素对鼻息肉组织miR-200a、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法按随机数字法将90例鼻息肉患者分为激素组与非激素组,各45例,均择期行鼻内镜手术,激素组给予围术期糖皮质激素干预,非激素组则未使用,比较两组的临床疗效;选择来源于同期行单纯鼻中隔偏曲矫正术30例患者的下鼻甲黏膜组织为对照组,测定比较各组组织miR-200a、HIF-1α及VEGF表达,且行Spearman相关性分析。结果激素组治疗总有效率显著高于非激素组,术后6个月复发率显著低于非激素组(P <0. 05);与治疗前比较,两组治疗后鼻息肉组织miR-200a显著上调,HIF-1α及VEGF表达均显著下调,差异有统计学意义(P <0. 05),且激素组治疗后上述指标均显著优于非激素组(P <0. 05); HIF-1α与VEGF呈正相关(P <0. 05),与miR-200a呈负相关(P <0. 05)。结论围术期糖皮质激素干预可能通过上调miR-200a表达,下调HIF-1α及VEGF表达以增强鼻息肉鼻内镜手术效果,显著降低术后复发率。

山葡萄转录因子CBF1基因的克隆及序列分析

采用生物信息学方法比对多种低温诱导植物的CBF1同源基因,在其保守区域设计一对兼并引物,在特殊的RT-PCR条件下,结合反向PCR技术对山葡萄低温诱导转录因子CBF1的全长基因进行了克隆,经测序和序列分析显示,山葡萄转录因子CBF1基因ORF长为753 bp,无内含子,编码251个氨基酸,编码蛋白分子量和等电点分别为27.503 kD和3.11,属酸性蛋白质。应用Blast软件将山葡萄转录因子CBF1基因与大麦(Hordeum vulquare)、水稻(Oryza sativa)等10种植物CBF1基因氨基酸序列比较同源性达到80.7%,且在AP2/EREBP结构域有高度的保守性,表明已成功克隆山葡萄(Vitis amurensis)转录因子CBF1基因,将其命名为ViCBF1,在GenBank上的登录号为DQ517296。