小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白生物信息学分析

目的获取小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白（GITR）氨基酸序列,并预测其结构和功能。方法利用网络平台及相关生物学软件对小鼠GITR氨基酸序列进行生物信息学分析。结果小鼠GITR氨基酸序列与人等其他物种具有56%的同源性,具有信号肽、胞外区、跨膜区及胞内区等结构;小鼠GITR蛋白胞外区位于第22-153号氨基酸序列区间;可能含有4个N-糖基化位点、4个丝氨酸磷酸化位点、1个苏氨酸磷酸化位点以及1个酪氨酸磷酸化位点。结论小鼠GITR氨基酸序列的生物信息学分析为进一步表达该蛋白及其相关功能研究奠定了基础。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体及其配体mRNA在哮喘大鼠中性粒细胞上的表达及布地奈德干预的研究

目的:观察布地奈德对哮喘大鼠外周血中性粒细胞上糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)及其配体(GITRL)表达水平的影响。方法:将30只清洁级SD大鼠随机分为3组:对照组、哮喘组、布地奈德干预组,取外周血进行中性粒细胞的分离提纯,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)方法检测GITR/GITRL mRNA在中性粒细胞上的表达。结果:哮喘组中性粒细胞上的GITR/GITRL mRNA的表达水平(△CT分别为3.10±0.23,13.48±2.40)显著高于对照组(△CT分别为5.16±0.70,15.79±1.27)及布地奈德干预组(△CT分别为4.83±0.93,15.63±1.73)(均P<0.05);而布地奈德干预组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。对各组的GITR/GITRL mRNA表达水平进行直线相关分析,结果显示两者表达呈正相关(R2=0.669,P<0.01)。结论:中性粒细胞可能通过GITR/GITRL信号通路参与哮喘的气道炎症过程,布地奈德可能通过下调中性粒细胞上的GITR/GITRL的表达从而减轻哮喘气道炎症反应。

动脉粥样硬化大鼠颈总动脉糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体的表达及意义

目的:通过检测动脉粥样硬化大鼠颈总动脉中糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand,GITRL)的表达,探讨GITRL在动脉粥样硬化过程中的变化及意义。方法:建立大鼠动脉粥样硬化模型,取其颈总动脉,观察粥样硬化病变,采用免疫组织化学及蛋白质印迹(Western blotting)法检测GITRL的表达。结果:动脉粥样硬化大鼠颈总动脉的血管壁脂质沉积明显增多;弹性纤维不完整,连续性破坏、中断。动脉粥样硬化大鼠颈总动脉血管内GITRL的表达水平明显高于非动脉粥样硬化大鼠。结论:GITRL作为高脂饮食后表达上调的一种血管炎性分子,有望作为预测动脉粥样硬化发生的一种独立危险因素。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在调节性T细胞的表达及功能

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)是肿瘤坏死因子家族成员,在调节性T(Treg)细胞组成性高表达。自身免疫炎症过程中GITR的表达增加,参与调节Treg细胞活性并进一步诱导效应T细胞活化。GITR配体(GITRL)使GITR活化后导致Treg细胞的抑制功能下降。另外,GITR与多种细胞的凋亡相关,但GITR信号在机体免疫系统中的作用及GITR与T细胞之间的关系目前仍不清楚。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在Tregs介导下的免疫耐受作用的研究进展

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced TNF receptor,GITR)是胸腺和外周淋巴器官中调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)表达的一个重要功能分子,在Tregs的分化和扩张中起关键性作用,是人类Tregs非常有效的标记物,在Tregs的免疫调节中发挥重要作用。GITR具有许多重要的生物学活性,包括细胞的增殖、分化、存活和凋亡等,其相互作用可打破Tregs介导的免疫耐受,诱发或加重自身免疫性疾病,如哮喘、糖尿病、关节炎、系统性红斑狼疮等。妊娠选择了免疫耐受这一基本机制,Tregs在保护胎儿免受母体免疫攻击方面发挥重要作用,许多研究已表明:在妊娠期间中断Tregs的相互作用会导致胎儿特异性抗原的产生,继而导致不良妊娠结局。综述GITR在Tregs介导下的免疫耐受作用。

人糖皮质激素诱导型肿瘤坏死因子受体与类风湿关节炎

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）作为一种系统性自身免疫性疾病，其发病机制与许多因素有关。其中T淋巴细胞的异常活化为关键环节之一。T淋巴细胞被诱导增殖分化成效应细胞时，需要双信号的作用，即第一信号——抗原识别，第二信号来自共刺激分子。研究发现，共刺激分子中的肿瘤坏死因子（TNF）一肿瘤坏死因子受体（TNFR）（TNF—TNFR）超家族是RA的关键致病因子。

系统性红斑狼疮患者CD4+ CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和叉状头螺旋转录因子的表达及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4 + CD25 + T细胞糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)和叉状头螺旋转录因子(Foxp3)的表达及意义。方法采用流式细胞术检测40例SLE患者(SLE组)和13例健康对照者(对照组)外周血辅助性T细胞17(Thl7细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+ T细胞的百分比及CD4 + CD25 + T细胞Foxp3和GITR的表达并进行比较。分析SLE组患者上述指标与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分及狼疮肾炎(LN)的关系。结果SLE组Thl7细胞百分比、Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比及CD4+ CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于对照组,Treg细胞百分比低于对照组(P<O.05)。SLE组CD4+CD25 + T细胞GITR的阳性表达与SLEDAI评分呈正相关(P<0. 05).高疾病活动组Treg细胞百分比低于低疾病活动组,CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率高于低疾病活动组(P<0. 05)。LN组Thl7细胞百分比和CD4 + CD25 + T细胞GITR的阳性表达率均高于非LN组(P<0.05).结论SLE患者存在免疫失调和Thl7细胞百分比/Treg细胞百分比失调,GITR的表达与SLE密切相关。

死亡受体、配体系统与卵巢肿瘤

细胞凋亡主要表现为凋亡信号通路的启动及相关基因的表达,不同信号转导途径介导和参与细胞凋亡的发生过程,其中死亡受体信号途径是直接启动凋亡的一条最具特征性的路径。细胞表面死亡受体是肿瘤坏死因子受体超家族成员,死亡受体信号通过与其特异性配体结合,以其独特的诱导凋亡方式参与细胞凋亡的过程,介导肿瘤细胞凋亡。卵巢肿瘤的发生除了与多种癌基因和抑癌基因的异常激活和表达有关以外,细胞凋亡的抑制也是其形成的重要机制。就死亡受体、配体系统的有关机制及其与卵巢肿瘤的关系做一综述。

TRAIL及其受体DR4、DR5与肿瘤细胞凋亡

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL（Tumor necrosis factor-Related Apoptosis InducingLigand）是最近发现的TNF家族的又一新成员，与Apo-1L（FasL）有较高的同源性。和TNF家族其他成员不同的是，TRAIL在体内仅以膜结合型存在。目前发现的TRAIL受体有两类，一类是死亡受体，包括TRAIL-R1（DR4）和TRAIL-R2（DR5），此类受体都含有死亡结构域并能向细胞内传递死亡信号，当TRAIL与DR结合时，诱导肿瘤细胞或转化细胞凋亡；

TRAIL及其受体的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能选择性诱导多种肿瘤细胞系的凋亡,而对正常细胞没有作用。TRAIL通过活化Casepase或线粒体依赖的途径诱导细胞凋亡。这种凋亡信号可以被其诱骗受体(DcR)所阻断,并且受Bcl-2家族蛋白所调节。本文将介绍TRAIL诱导凋亡的信号传导途径以及TRAIL的临床应用。

血清SGK1、TRAP1、FOXQ1与晚期胃癌患者化疗疗效和 预后的关系研究

目的探讨晚期胃癌患者血清中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)、叉头框蛋白Q1(FOXQ1)水平与化疗疗效和预后的关系。方法选择2017年10月至2020年10月该院收治的127例晚期胃癌患者(胃癌组),均接受SOX方案(奥沙利铂+替吉奥)化疗至少2个周期,根据化疗疗效分为有效组(52例)和无效组(75例)。另选择该院的62例体检健康的志愿者为对照组。检测并比较各组血清SGK1、TRAP1、FOXQ1水平。患者出院后随访2年。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析SGK1、TRAP1、FOXQ1预测胃癌化疗疗效的价值,Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险回归分析SGK1、TRAP1、FOXQ1与晚期胃癌化疗疗效及预后的关系。结果胃癌组血清SGK1、TRAP1、FOXQ1水平均高于对照组(P<0.05),无效组血清SGK1、TRAP1、FOXQ1水平均高于有效组(P<0.05)。SGK1、TRAP1、FOXQ1预测胃癌化疗疗效的曲线下面积(AUC)分别为0.836、0.833、0.778,联合预测的AUC为0.917,高于单独指标预测。SGK1高水平、TRAP1高水平、FOXQ1高水平的晚期胃癌患者总生存期(OS)生存率低于SGK1低水平、TRAP1低水平、FOXQ1低水平的晚期胃癌患者(Log-Rank χ^(2)=12.092、10.825、11.653,P<0.05)。多因素Cox比例风险回归结果显示,化疗耐药、SGK1高水平、TRAP1高水平、FOXQ1高水平是晚期胃癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论晚期胃癌患者血清SGK1、TRAP1、FOXQ1水平均升高,其与化疗疗效差及低OS生存率有关。

幽门螺杆菌诱导的胃黏膜上皮细胞凋亡机制的研究进展

胃上皮细胞不断发生凋亡和增殖,两者协同作用,从而维持了胃上皮的完整性。目前,已发现多种凋亡诱发因素。在幽门螺杆菌(HP)诱发的胃炎中,虽然上皮细胞凋亡和增殖均增加,但由于细胞凋亡占优势,破坏了胃上皮细胞的完整性而导致相关疾病的发生,其凋亡的发生机制复杂并且相互影响。由幽门螺杆菌引起的胃黏膜上皮细胞凋亡包括内源性和外源性通路,存在于这两种通路中的具有代表性的因子包括Toll样受体4、Bcl-2家族、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体/受体和Fas/FasL等。

大黄素对刀豆蛋白诱导小鼠急性肝损伤的干预作用及其机制

目的观察大黄素对刀豆蛋白(Con A)诱导小鼠急性肝损伤的干预作用,并探讨其机制。方法雄性Balb/C小鼠随机分为对照组、模型组、大黄素组。大黄素组按25 mg/kg给予大黄素灌胃,2 h后经尾静脉注射20 mg/kg的Con A诱导急性肝损伤模型。模型组以大黄素溶剂代替大黄素预处理,2 h后以同法制作急性肝损伤模型。对照组不做特殊处理。Con A注射10 h后摘眼球取血,检测各组小鼠血清ALT、AST;无菌取肝脏,进行肝组织病理检查评估肝组织损伤程度,采用实时荧光定量PCR法检测肝组织中的糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA及糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(GITRL)mRNA。结果模型组血清ALT、AST水平显著高于对照组,大黄素组血清ALT、AST水平低于模型组(P均<0.01)。相较于对照组,模型组小鼠肝组织出现明显坏死灶,而大黄素组小鼠肝组织坏死明显减轻。模型组GITR、GITRL mRNA相对表达量高于对照组,大黄素组GITR、GITRL mRNA相对表达量低于模型组(P均<0.05)。模型组GITR、GITRL蛋白相对表达量高于对照组,大黄素组GITR、GITRL蛋白相对表达量低于模型组(P均<0.05)。结论大黄素可能通过抑制GITR/GITRL通路而减轻Con A诱导的小鼠急性肝损伤。

GITR阳性的效应T淋巴细胞参与AAF/PH小鼠肝脏再生调控

目的 分析2-乙酰氨基芴联合部分肝切除(AAF/PH)小鼠肝脏再生模型肝组织中浸润的效应T淋巴细胞的变化情况。方法 C57BL/6J小鼠每天应用AAF连续灌胃5 d后切除1/3肝组织,术后继续每天应用AAF灌胃至术后7 d、14 d。利用免疫荧光染色、蛋白免疫印迹检测肝脏前体细胞活化情况;采用多色免疫荧光染色与流式细胞术检测肝组织中效应T淋巴细胞及其活化标志物GITR阳性细胞比例。结果 AAF/PH组小鼠术后7 d肝组织重量即可恢复至对照小鼠水平。肝组织中炎症细胞浸润和纤维化不明显,但术后14 d时,肝脏汇管区中出现明显的炎症细胞浸润与细胞外基质沉积。随着术后时间延长,肝组织中Sox9+肝脏前体细胞数量逐渐增多,肝组织Sox9蛋白表达水平亦显著增加。流式细胞分析结果显示,随着术后时间延长肝组织中浸润的CD8+T淋巴细胞的比例显著增加,术后14 d为对照组的1.47倍(P=0.0289),而糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)阳性的CD8+T淋巴细胞比例呈先升高再降低的变化趋势,术后7 d、14 d分别为对照组的1.5倍(P=0.0098)、0.65倍(P=0.0427)。尽管术后CD4+T淋巴细胞比例无明显变化,但术后14 d时GITR阳性的CD4+T淋巴细胞比例显著降低,为对照组的0.85倍(P=0.0225)。结论 AAF/PH小鼠肝再生模型中伴随肝脏前体细胞的活化,效应T淋巴细胞参与了小鼠的肝脏再生过程。

SAHA和TRAIL联合应用对雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7生长抑制的分子机制

目的探讨SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联合作用抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7生长的分子机制。方法以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,应用自动细胞分析仪测定SAHA和TRAIL联合作用对乳腺癌细胞活力和细胞凋亡的影响并对细胞周期进行分析;应用实时定量PCR及固相凋亡抗体芯片检测MCF-7细胞凋亡蛋白表达。结果 SAHA和TRAIL联合作用可显著降低MCF-7细胞活力,抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡的产生。SAHA和TRAIL对MCF-7细胞周期的影响主要集中在G_0/G_1期。结论 SAHA和TRAIL联合作用对乳腺癌细胞生长有抑制作用。

CD4^+ CD25^+调节性T细胞和Graves病

Graves病(GD)是一种自身免疫性甲状腺疾病,其发病机制涉及到细胞免疫与体液免疫的异常。新近的研究发现,调节性T细胞(Treg)能够抑制那些逃避的自身反应性T细胞克隆的活性和功能,在自身免疫性甲状腺疾病发病的发生发展中扮演重要角色。在GD的发病过程中,不仅有自身反应性T细胞的参与,也可有抑制免疫反应的自身反应性Treg的参与。而Treg及其表面表达分子叉头/翅膀状螺旋(Foxp3)基因、糖皮质类固醇激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关受体(GITR)及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4的高表达可减少GD等自身免疫性疾病的发生。因此提高Treg的反应性,进而抑制自身免疫,是GD很有希望的治疗策略。

人GITR基因的克隆和序列分析

目的:克隆人GITR基因全长编码区的cDNA,同时对其序列进行分析。方法:采用RT-PCR方法,从正常人外周血单个核细胞获得GITR基因的cDNA,克隆至pGEM-T载体,选择阳性克隆并进行序列测定。结果:扩增得到的人GITR基因编码区cDNA的全长726 bp,编码241个氨基酸残基,与GeneBank注册的序列完全一致。结论:获得人类GITR基因的克隆,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

甲状腺相关眼病患者外周血细胞因子水平与临床表现的关系研究

目的 研究甲状腺相关性眼病(Thyroid -AssociatedOphthalmopathy ,TAO)患者外周血多种细胞因子水平及其变化与病情、疗效和预后的关系,寻找能反映病情和预测疗效的指标。方法 对35例急性期TAO患者进行眼科分级和评分并检测白细胞介素2 (Interleukin - 2 ,IL - 2 )、白细胞介素6 (interleukin - 6 ,IL - 6 )、可溶性白细胞介素2受体(solubleinterleukin - 2receptor,sIL -2R)、可溶性白细胞介素6受体(solubleinterleukin - 2receptor,sIL - 6R)、肿瘤坏死因子(tumornecosisfacters ,TNF)水平,然后进行一个疗程的米歇尔方案治疗,32例完成治疗后再次进行眼科评分及检测上述细胞因子水平并对检测结果进行分析。结果 IL - 6 ,sIL - 2R ,sIL - 6R和TNF水平随眼病的分级和评分增加而升高,各组间有显著差异。对糖皮质激素治疗有反应组在治疗前sIL -2R、sIL - 6R、TNF明显高于无反应组,且治疗后有反应组sIL - 2R和TNF水平较无反应组下降更明显。结论 TAO患者外周血IL - 6 ,sIL - 2RandsIL - 6R水平与眼病严重程度一致,sIL - 2R、sIL- 6R、TNF反应病情的活跃程度。