红桂木凝集素糖蛋白的特征及其糖肽键性质的分析

目的：探讨红桂木凝集素（ＡｒｔｏｃａｒｐｕｓＬｅｎｇｎａｎｅｎｓｉｓＬｅｃｔｉｎ，ＡＬＬ）的糖蛋白特征及其糖肽键类型。方法：经Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱层析，从红桂木种子纯化获红桂木凝集素。以链霉蛋白酶将ＡＬＬ降解，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５层析，分离得糖肽，用化学及物理方法分析单糖组成，以β－消除反应及凝集素结合试验分析糖肽键类型。结果：ＡＬＬ和糖肽均含氨基半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖；β－消除反应后，２４０ｎｍ呈明显紫外吸收增加；ＡＬＬ可与木菠萝凝集素结合。结论：ＡＬＬ是一种糖蛋白，由两种分子量接近的亚基组成，其糖链与多肽连接类型为Ｏ—连接。

生姜蛋白酶的分离纯化及其糖肽键型的初步研究

本文报导以生姜为材料，冷丙酮脱脂脱色后，用０．１ｍｏｌ／ＬＰＨ６的磷酸缓冲液提取、硫酸铝盐析，经ＤＥＡＥ－纤维素ＤＥ－５２和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５纯化，得生姜蛋白酶两个组份ＺＥ１和ＺＥ２。它们经凝胶等电聚焦电泳，均为单一的蛋白带，ＰＩ值别为７．０和８．０。苯酚－硫酸法鉴定，其均为糖蛋白。β－消去反应表明：ＺＥ１和ＺＥ２中的糖肽键型均为非０－型糖肽键。

云芝糖肽的结构组成分析

目的 :对云芝糖肽的结构与组成进行研究。方法 :采用还原衍生化气相色谱 ,紫外、核磁、高碘酸氧化、Smith降解、琼脂糖凝胶电泳等方法。结果 :云芝糖肽由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、木糖和鼠李糖组成 ,具有α ,β型糖苷键 ,连接方式有 (1→ 4 )、(1→ 6 )两种 ,含有结合态蛋白 ,糖肽键类型初步确定为N 连接。 结论 :首次对云芝糖肽的化学结构与组成进行了较为细致的研究。

薄芝糖肽结构组成分析

采取薄层层析法分析单糖组成,高效液相色谱法测定分子量及其分布,高碘酸氧化、Smith降解等方法确证糖苷键类型,紫外、Tricine-SDS-PAGE和β-消除等方法确证结合态蛋白的存在,利用柱前衍生化高效液相法测定氨基酸的组成,对薄芝糖肽(Ganoderma Capenseglycopeptide,GCGP)结构组成进行研究。结果:GCGP的多糖部分由葡萄糖组成,连接方式为1→6和1→2两种,含有结合态蛋白,氨基酸组成分析显示GCGP富含谷氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、半胱氨酸,碱水解结果表明GCGP含微量色氨酸。糖肽连接方式初步定为O-连接。

山药糖蛋白纯化条件及其理化方法鉴定

采用热水浸提法得到山药糖蛋白粗提物,经过不同洗脱液进行DEAE-52柱层析纯化和Sepha-dexG-75柱层析纯化,得到山药糖蛋白组分CYG-1和CYG-2。其中,DEAE-52柱层析中以NaHCO3作为洗脱液时,只能得到1个CYG组分。I2-KI显色反应、茚三酮反应、斐林试剂反应、硫酸-咔唑反应、以及与FeCl3反应和与CTAB反应、糖肽键特征等理化方法鉴定的结果表明,得到的CYG-1和CYG-2为纯品,属酸性糖蛋白,糖肽键为O-糖肽键。CYG-1和CYG-2分子中蛋白和多糖质量分数分别为20.62%、15.16%和68.56%7、2.31%。

天门冬糖蛋白AG-b的研究

ＡＧ＿ｂ为４０％丙酮沉淀的天门冬糖蛋白级份，它的β－消去反应产物在２４３ｎｍ有紫外吸收峰，表明其糖和蛋白质连接键为０－型糖肽键。凝胶层析测定ＡＧ－ｂ中多糖部分ＰＡ－Ｉ分子量为２．１９×１０６。１３ＣＮＭＲ波谱显示，ＰＡ－Ｉ具有α１→２、α１→４和α１→６三种糖苷键，不含有糖醛酸组份。ＩＲ光谱显示，ＡＧ－ｂ在１２５０ｃｍ－１和１７３０ｃｍ－１处有吸收峰，说明其含乙酰基团。