肿瘤细胞／糖脂类分子联合 TLR 9配体治疗小鼠结肠癌的效果研究

目的构建肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗，并探讨上述肿瘤疫苗对小鼠结肠癌的治疗效果。方法运用慢病毒转染GFP-CD1d至MC38肿瘤细胞构建CD1d-MC38细胞系，并加载α-Galcer（α-galactosylceramide ，α-GC）至上述细胞系制备CD1d-MC38/α-Galcer复合物。利用RT-PCR、流式细胞术检测MC38细胞系CD1d的表达情况以及对于α-Galcer结合效率。最后建立小鼠MC38结肠癌皮下肿瘤模型，观察肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗（ CD1d-MC38/α-GC＋CpG1826）对于小鼠肿瘤的治疗作用，免疫组化方法检测肿瘤组织中CD4＋T和CD8＋T细胞浸润情况。结果成功构建了表达CD1d分子的CD1d-MC38细胞系，CD1d阳性的CD1d-MC38细胞比例为（98．10±2．53）％；且该细胞系能有效结合α-Galcer，随着α-Galcer浓度升高和加载时间的延长，其结合效率逐渐上升；CD1d-MC38/α-GC＋CpG1826肿瘤疫苗能有效延缓小鼠皮下肿瘤生长（与其余各组比较，P＜0．01），延长荷瘤小鼠生存时间（与CD1d-MC38/α-GC组比较，P＜0．05；与其余各组比较，P＜0．01）；肿瘤组织免疫组化显示，实验组肿瘤组织中有更多的CD4＋T细胞和CD8＋T细胞浸润，与CD1d-MC38/α-GC组比较，差异无统计学意义（P＞0．05），与其余各组比较，差异有统计学意义（P＜0．01）。结论肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗能抑制小鼠肿瘤生长，延长荷瘤小鼠生存期，发挥抗肿瘤作用有赖于CD4＋T细胞和CD8＋T细胞。