中药总苷成分群差式蒽酮-糖脎定量测量方法的建立

目的建立中药复方总苷类成分的定量测定方法——差式蒽酮-糖脎比色法。方法用蒽酮比色法测定中药总糖苷（包括糖类）的量,然后采用糖脎硫酸显色法测定还原性糖类的量,两者相减,即得中药总苷类成分的量。结果蒽酮比色法的反应在6 h内完成;测定波长为620 nm;线性范围在80~180μg/mL,R2=0.994;回收率为99.2%,RSD为1.35%。糖脎硫酸显色法的反应在4 h内完成;测定波长为412 nm;线性范围在2~12 mg/mL,R2=0.991;回收率为99.5%,RSD为1.98%。采用本法测得补阳还五汤、六味地黄丸、穿心莲片、黄芪注射剂、茯苓多糖口服液5种中成药总苷的量依次为15.1、26.0、6.68 mg/g及21.3、16.9 mg/mL。结论首次创立了中药复方中总苷类成分定量测定方法,通过蒽酮比色法与糖脎硫酸显色法差值测算建立起以糖苷键为特征的成分群分析方法。方法学证明本法有较好的精确度,能用于中药总苷成分群的定量测定。

1种新的DAHPS酶活性测定方法的探索

探索并首次建立了采用糖脎硫酸显色法测定3-脱氧-D-阿拉伯-庚酮糖酸7-磷酸合酶(DAHPS)酶活性的方法,即赤藓糖-4-磷酸与苯肼反应生成糖脎,而糖脎在加入硫酸显色后,在418 nm处有特征峰,其浓度和吸收值有良好的线性关系,表观摩尔消光系数ε为2.25×104L/mol/cm,最小检出限为0.60 nmol。通过实验证明,此法是1种操作简便、结果准确的DAHPS酶活性测定方法,可用于粗酶液活性的测定。