去唾液酸糖蛋白受体的研究现状

去唾液酸糖蛋白受体（ asialoglycoprotein receptor ， ASGPR），也被称为肝细胞半乳糖/N-乙酰基葡糖胺受体，或者 Ashwell-Morell 受体[1]。它主要表达于肝窦状间隙的肝实质细胞表面，是第一个被发现的凝集素。由于它结合配体的钙离子依赖性，因此属于 C 型凝集素。ASGPR 能够介导去唾液酸化的糖蛋白被肝细胞内吞降解[2]。目前已知的ASGPR 的配体非常多，提示其在糖蛋白代谢、脂代谢、凋亡细胞降解、调节凝血、介导病毒进入细胞和自身免疫性炎症反应等多个生理环节均发挥着重要的作用[3]。

p-糖蛋白170的表达水平与SRNS的关系及不同药物的干预效果比较

【目的】探讨p-糖蛋白170（P—gpl70）在外周血单个核细胞（PBMC）中的表达与激素耐药型肾病综合征（SRNS）的关系及环磷酰胺（CTX）和他克莫司（TAC）的干预效果。【方法】将160例原发性肾病（INS）患者分为激素敏感型肾病综合征（SSNs）组（A组）和sRNS组（B组），各80名，以30名体检健康者为对照组（C组）。分别于发病初未用糖皮质激素（GC）治疗前（T1）、GC治疗4周后（T2）、B组GC治疗后加用TAC／GTX治疗4周后（T3）及B组加用TAc／GTX治疗8周后（T4）采集外周血标本，比较不同时间各组P—gpl70的表达水平。【结果】T1时A组与B组P—gpl70表达量均高于C组（P〈O．05），且T2时P—gpl70表达均较T1时明显升高（P〈0．01）；B组T3，T4时P—gpl70表达量均较T1时明显回落（P〈0．01）；CTX治疗总有效率（60％）显著低于TAC（80％）。【结论】GC可诱导INS患者PBMC中P—gpl70高表达，参与激素耐药的发生发展，选用免疫抑制治疗SRNS时，TAC干预效果强于CTX。

原发性开角型青光眼患者小梁细胞中GRP78和Myocilin蛋白的共表达

背景Myocilin蛋白的错误折叠是原发性开角型青光眼（POAG）的重要发病机制，GRP78能将错误折叠的蛋白质转移到内质网外，以保持应激状态下内质网蛋白质合成功能的正常运转，但二者的相互关系及其在POAG发病中的作用机制仍未阐明。目的检测体外培养的POAG患者小梁细胞内GRP78与Myolicin蛋白的共定位表达。方法在手术中获取POAG患者的小梁网组织，采用组织块培养法分离和培养小梁细胞，采用免疫化学染色法检测培养的细胞中特征性因子的表达，并将其形态学特征与健康供体眼培养的小梁细胞进行比较。将体外培养的小梁细胞分为衣霉素（Tm）组、十字孢碱（STS）组和正常对照组，分别在培养液中加入含有1μmol／L Tm、0．1μmol／LSTS和不含药物的培养液培养细胞24h，采用免疫荧光法检测各组培养的细胞中GRP78与Myocilin蛋白的共表达情况。结果培养的原代细胞多呈扁平星形或不规则形，可见细胞突起，细胞核呈椭圆形，细胞体较大，细胞质丰富，可见大量黑色吞噬颗粒。POAG来源小梁细胞培养3～7代生长良好，细胞中层黏连蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、神经烯醇化酶（NSE）和波形蛋白（Vimentin）均呈阳性表达。免疫荧光染色结果显示，Tm组、STS组和正常对照组细胞的细胞质中均可见GRP78和Myocilin阳性表达，分别为红色和绿色荧光，正常对照组中人来源小梁细胞的周边部可见GRP78和Myocilin的不完全共表达，POAG来源小梁细胞周边部GRP78和Myocilin呈完全共表达；Tm组和STS组中不同来源的小梁细胞中GRP78和Myocilin均呈完全共表达，Tm组中不同来源小梁细胞均出现细胞核周围GRP78蛋白聚集现象。结论POAG来源小梁细胞中GRP78蛋白与Myocilin蛋白共表达，提示二者在POAG的发病和进展过程中可能存在相互作用。GRP78可能保护小梁细胞免受内质网应激途径诱导的细胞凋亡。

肝细胞癌组织上皮性钙黏蛋白表达及其临床意义的研究

目的:研究上皮性钙黏蛋白(E-Cad-herin)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达情况,探讨其与肝癌侵袭转移的关系。方法:选择56例有完整随访资料的HCC及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本,用RT-PCR方法检测E-Cadherin mRNA的表达。结果:E-Cadherin在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织和正常组织,P分别为0.016和0.003,而在癌旁组织和正常组织中的表达差异无统计学意义,P分别为0.076和0.082;E-Cadherin在肝癌组织中的表达与术后复发时间呈正相关,R2=0.887,P<0.05,与病理分级呈负相关,R2=0.823,P<0.05;癌组织中E-Cadherin表达与肝外转移呈负相关,R2=0.839,P<0.05。结论:E-Cadherin表达与肝癌的分化程度,侵袭转移能力,复发倾向相关,通过检测E-Cadherin表达将对肝癌临床转归的评估有一定指导意义。

肺癌组织中桩蛋白和E-钙粘蛋白的表达及其临床意义

目的 :探讨桩蛋白 (Paxillin)、E -钙粘蛋白 (E cadherin)在人肺癌组织中表达及与肺癌病理特征、临床分期、淋巴结转移和预后的关系。方法 :应用免疫组织化学SP方法检测 12 0例肺癌、80例癌旁无癌浸润肺组织、5 3例正常肺组织的Paxillin和E cadherin的表达。结果 :肺癌、癌旁无癌浸润肺组织和正常肺组织Paxillin的阳性表达率分别为3 9 1% ( 4 7/12 0 )、81 3 % ( 65 /80 )、83 3 %( 4 4/5 3 ) ,三者差异有统计学意义 ,P <0 0 1;E cadherin阳性表达率分别为42 5 % ( 5 1/12 0 )、87 5 % ( 70 /80 )、96 2 %( 5 1/5 3 ) ,三者差异也有统计学意义 ,P <0 0 1。肺癌组织中Paxillin和E cadherin的阳性表达与肺癌的临床病理分期、肺癌分化程度、淋巴结转移有关 ,P <0 0 5。Paxillin阳性表达率与肺癌术后 3年生存率之间差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;E cadherin阳性表达率与肺癌术后 3年生存率有关系 ,P <0 0 5。结论 :肺癌组织中Paxillin、E cadherin表达可能与肺癌细胞的侵袭转移有密切联系 ,可作为评价肺癌浸润转移的生物学标志。

E-钙黏蛋白在胰岛细胞瘤中的表达与意义分析

目的:研究胰岛细胞瘤(islet cell tumors)中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及其在胰岛细胞瘤发病机制中的作用。方法:应用免疫组织化学S-P法检测E-钙黏蛋白在18例胰岛细胞瘤患者中的表达情况。结果:恶性胰岛细胞瘤的E-钙黏蛋白表达低于良性胰岛细胞瘤(P<0.05)。结论:E-钙黏蛋白的低表达或表达缺失促进了胰岛细胞瘤的恶性化发展。

多药耐药基因在原发性卵巢癌中的表达及意义

目的研究多个耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S转移酶(GST-π)、DNA拓扑异构酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)和肺耐药相关蛋白(LRP)在原发性卵巢癌中的表达,探讨其与卵巢癌患者耐药的关系。方法应用免疫组化SP法对80例卵巢癌、16例良性卵巢肿瘤及12例正常卵巢组织中P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ和LRP表达情况进行测定。结果在卵巢癌中,P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ、LRP阳性表达率分别为57.5%、58.8%、76.3%和73.8%,与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织中各自相应的基因蛋白阳性率比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。在良性卵巢肿瘤与正常卵巢组织中P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ、LRP阳性表达率比较,差异也具有统计学意义(P<0.05)。4种耐药相关蛋白存在共同表达现象,且具有不同的化疗反应性。P-gp、GST-π、LRP在卵巢癌中的表达与临床分期有关(P<0.05),Topo-Ⅱ则无关(P>0.05);P-gp、LRP与组织学分级无关(P>0.05),GST-π、Topo-Ⅱ则有关(P<0.05);P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ、LRP与患者年龄、组织学类型、肿瘤大小、术后残余病灶大小均无关(P>0.05)。结论卵巢癌存在原发性耐药并涉及多个耐药基因的共同表达。联合检测对预测化疗药物敏感性和判断化疗疗效具有指导意义。

Id-2和E-cadherin在直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨分化抑制因子‐2（Id‐2）和上皮性钙粘附素（E‐cadherin）在人直肠癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法用免疫组织化学方法观察邯郸市中心医院经手术切除的原发性直肠癌组织标本60例中Id‐2和E‐cadherin在直肠癌和直肠癌旁正常组织中的表达水平，Spearman相关检验检测Id‐2与E‐cadherin表达的相关性，分析Id‐2与E‐cadherin表达与直肠癌临床病理学指标之间的关系。结果60例直肠癌中Id‐2的阳性表达率在直肠癌旁正常黏膜组织和直肠癌组织中分别为：48．33％和71．67％，E‐cad‐herin的阳性表达率分别为：71．67％和46．67％。Id‐2与E‐cadherin表达水平存在负相关性；Id‐2和E‐cad‐herin表达在直肠癌不同分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移之间差异有统计学意义（P＜0．05）；而与年龄、性别差异无关（P＞0．05）。结论Id‐2和E‐cadherin的表达水平与直肠癌的发生、发展存在着密切的关系，直肠癌组织中Id‐2高表达可能是通过E‐cadherin途径来实现对肿瘤侵袭转移的促进作用。

NSCLC原发部位和转移淋巴结中PD-L1的表达及临床分析

目的探讨非小细胞肺癌原发部位和转移淋巴结中程序性细胞死亡因子1配体(programmed death-ligand 1,PD-L1)的表达水平及其临床特征和预后情况。方法收集病理组织学确诊的55例非小细胞肺癌手术标本和40例超声支气管内镜活检的淋巴结标本。采用免疫组织化学法和实时荧光定量PCR法检测PD-L1蛋白和mRNA的表达。采用生存分析探讨PD-L1蛋白表达和肺癌患者预后的关系。结果 PD-L1蛋白在非小细胞肺癌原发部位的阳性率是23.6%(13/55)。PD-L1表达阳性率在病理类型(腺癌vs鳞癌,P=0.047)和病理分期(Ⅰ期vsⅡ~Ⅲ期,P=0.025)方面差异均具有统计学意义。PD-L1蛋白表达阳性患者平均无复发生存时间较短(P=0.049)。PD-L1 mRNA在原发部位鳞癌组织中的表达高于腺癌组织(P=0.017),且随病理分期的增加而升高(P=0.029)。原发部位和转移淋巴结中PD-L1蛋白和mRNA的表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。PD-L1蛋白在转移淋巴结中的表达在患者年龄、性别、吸烟状态、病理类型、分化程度、病理分期和总生存方面差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 PD-L1可促进非小细胞肺癌细胞的浸润和转移,在原发部位鳞癌组织中的表达高于腺癌组织。

动态监测CA_(125)、CEA对鉴别良恶性胸腔积液的价值

目的:探讨动态检测CA125、CEA在良、恶性胸水中的鉴别诊断价值。方法:在初始和预定时间后分别测定92例良、恶性胸水患者的胸水和血清中CA125、CEA水平。结果:恶性组在一个肿瘤倍增时间后胸水和血清中CA125、CEA较初始时有极显著性差异(P<0.01);良性组胸水及血清中CA125、CEA在30d前、后均无明显变化(P>0.05)。结论:动态监测胸水和血清中CA125、CEA变化对于鉴别良、恶性胸腔积液有较大应用价值。

TLR4参与多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡作用研究

目的:探讨TLR4信号对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法:用RT-PCR和PE染色流式细胞仪检测骨髓瘤细胞株中TLR4基因的转录和蛋白的表达情况;MTT法检测细胞在脂多糖(LPS)刺激下增殖变化;AnnexinV-PI双染色流式检测细胞经LPS预处理后对阿霉素诱导的细胞凋亡的影响。结果:骨髓瘤细胞株中存在TLR4基因的转录和蛋白的表达,但表达水平有差异。骨髓瘤细胞在LPS刺激下,表达TLR4的MM1-s细胞增殖明显(P<0.05),对阿霉素诱导的凋亡有明显的抵抗作用;而不表达TLR4的U266细胞增殖未受明显影响。而且LPS不能保护阿霉素对U266细胞的诱导凋亡作用。结论:TLR4信号对在多发性骨髓瘤的增殖和生存都起重要作用。

E-cadherin和C-erbB2在非小细胞肺癌中的表达及其临床病理意义

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)中E-cadherin和C-erbB2蛋白的表达状况,分析其临床病理意义。方法:用免疫组化方法对82例非小细胞肺癌标本和20例正常肺组织进行免疫组化检测。结果:正常肺组织E-cadherin表达;4例C-erbB2+表达,无C-erbB2过表达。NSCLC中E-cadherin表达率为(49%),低分化组NSCLC E-cadherin表达率为30%,明显低于中高分化组表达率60%(P=0.010);中晚期(+)NSCLC表达率为31%,明显低于早期(+)NSCLC表达率62%(P=0.007);淋巴结转移组NSCLC表达率为39%,低于无淋巴结转移组表达率65%(0.026),均有统计学意义。肺腺癌C-erbB2表达率为45%,高于鳞癌过表达率17%(P=0.017);中晚期NSCLC(+)过表达率为51%,高于早期(+)过表达率21%(P=0.004);淋巴转移组过表达率为41%,高于无淋巴转移组过表达率23%(P=0.028)。E-cadherin的低表达和C-erbB2过表达无相关性。结论:E-cadherin低表达和C-erbB2过表达在肺癌的发生、发展和淋巴结转移中可能扮演重要的角色,联合检测对判断NSCLC生物学行为有病理临床意义。

重组IFN-α-2b-BCG对人PBMC的TLR4表达调节及其抗肿瘤作用的研究

目的了解重组卡介苗(BCG)和野生BCG对人外周单核细胞(hPBMC)上TLR的调节差异,揭示hIFN-α-2b对hPBMC上TLR4的表达是否具有协同增强效应,以及BCG介导免疫细胞活化效应的新机制。方法比较研究重组hIFN-α-2b-BCG和野生型BCG,及其上清和等量干扰素对TLR4表达的调节,以及表达TLR4淋巴细胞的肿瘤杀伤效应。以淋巴细胞作为空白对照,应用流式细胞仪对TLR4进行检测,MTT法检测肿瘤细胞杀伤效应。结果证实了重组BCG和野生BCG对hPBMC的TLR4的表达均有正调节及抗肿瘤效应;重组BCG对hPBMC的TLR4表达的调节优于野生BCG(P<0.05);重组BCG上清和外源性等量干扰素对TLR4表达皆有正调节作用,但差别无统计学意义;重组BCG上清与野生BCG上清相比,对hPBMC诱导TLR4表达差别显著(P<0.05);与野生BCG组相比,重组BCG组表达TLR4的hPBMC杀伤肿瘤细胞的效应显著增强(P<0.05)。结论重组BCG的脂多糖和持续分泌的hIFN-α-2b对hPBMC的TLR4表达均有正调节作用,并加强表达TLR4淋巴细胞的细胞介导的抗肿瘤效应。

OPN和uPA mRNA在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)mRNA及尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)mRNA在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:应用RT-PCR方法检测60例HCC癌组织、20例正常对照肝组织中OPN和uPA mRNA的相对表达量。结果:HCC癌组织中OPN和uPA mRNA的阳性表达率均分别高于对照正常肝组织(P均<0.05);癌组织中OPN mRNA的表达量在有门静脉癌栓形成组及在有早期复发转移组均高于无门静脉癌栓形成组和无早期复发转移组(分别P<0.05和P<0.01),uPA mRNA的表达水平在有包膜浸润和有门静脉癌栓形成组中均高于无包膜浸润和无门静脉癌栓形成组(分别P<0.05和P<0.01);OPN mRNA的高表达和uPA mRNA的高表达呈正相关(P<0.05)。结论:HCC癌组织中OPN的表达水平可以作为判断肝癌细胞转移能力和预示肝癌早期复发的重要指标。阻断OPN的表达可能可以降低uPA的分泌,从而减少肿瘤的浸润和转移。

两种药物促排卵过程中PCOS患者AMH变化

目的:探讨来曲唑(LE)和尿促性腺激素(HMG)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)患者在促排卵过程中抗苗勒氏管激素(AMH)的变化。方法:选择PCOS患者50例,随机分为2组,分别给予来曲唑2.5 mg/d口服,共5 d;或低剂量递增法肌注hMG;对照组50例;阴道超声计数小卵泡数和优势卵泡数,测定月经第3天、第8天以及hCG日(对照组LH峰日)血AMH、E2。结果:在促排卵过程中,hMG组AMH水平逐渐降低,与E2升高间成负相关(r=-0.65);LE组AMH水平略有下降但无显著性;对照组AMH值无明显变化。结论:LE治疗过程中PCOS患者AMH变化及卵泡生长更接近自然月经周期。

浆细胞膜糖蛋白-1基因与肥胖、糖尿病关系的群体水平研究

目的 研究肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗与候选基因PC-1之间的关系.方法 运用PCR-RFLP技术分析53例正常对照者,105例肥胖患者,63例糖尿病非肥胖患者,114例肥胖伴糖尿病患者PC-1基因编码区K121Q多态性.结果 Q等位基因频率在正常对照、肥胖人群、糖尿病非肥胖人群、糖尿病伴肥胖人分别为3%,18%,4%和30%.与正常对照组比较,OB组、OB＋H组、OB＋I组、OB＋L组、OB＋HIL组的相对危险性（RR）分别为4.26,4.12,7.36,5.15,9.70;与单纯糖尿病组比较,DM＋OB组、DM＋OBH组、DM＋OBI组、DM＋OBL组、DM＋OBHIL组的RR分别5.32,7.37,12.07,8.53,13.50.结论 PC-1 Q等位基因与肥胖、肥胖2型糖尿病、胰岛素抵抗的发生呈正相关,它参与了部分中国人肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗的发生.

P-gp、p53和VEGF在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)、p53和血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(N SCLC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化检测84例(化疗组40例和非化疗组44例)N SCLC中P-gp、p53和VEGF的表达水平,40例癌旁组织作为对照组,比较三者的表达与生存率的关系。结果:P-gp、p53和VEGF在N SCLC中的阳性表达率分别为40.5%、70.23%和67.9%;P-gp与VEGF呈正相关(χ2=10.805,r=0.360,P=0.001),P-gp与p53无相关性(χ2=138,r=-0.047,P=0.637),p53与VEGF呈正相关(χ2=9.288,r=0.333,P=0.002);化疗组中P-gp、p53和VEGF表达阳性者生存时间明显低于阴性者(P<0.05);Cox显示:临床分期、P-gp、p53和VEGF与N SCLC的预后有关(P<0.05)。结论:P-gp、p53和VEGF检测对肺癌患者化疗效果、预后的判断具有的指导作用。