5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的不同糖蛋白比与免疫原性的关系

实验中比较了以不同糖蛋白比结合的5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的免疫原性。以氨还原法制备的不同糖蛋白比的5型多糖结合疫苗分别经腹腔注射NIH小鼠,共免疫3次,间隔2周。末次免疫2周后采血分离血清,以间接ELISA测定血清抗体,t检验统计分析数据。结果显示,生理盐水组(R组)无免疫原性;5型荚膜多糖组(H组)免疫原性低,无免疫加强效应;结合疫苗M组、N组第1、2针有免疫加强效应,第2、3针无免疫加强效应,而F组和Q组的两针次间均有明显的免疫加强效应。说明5型肺炎链球菌荚膜多糖结合疫苗的糖与蛋白比较高时能获得较好的免疫原性。

原发与继发免疫性血小板减少症患者血小板膜糖蛋白特异性抗体及其与出血评分关系的研究

目的探讨原发与继发免疫性血小板减少症(ITP)患者抗GPⅡb/Ⅲa及GPΙb/Ⅸ抗体的表达、抗体阳性表达与出血评分的关系,以及不同抗体类型出血评分的差异,为原发与继发ITP患者的诊治和出血严重程度提供临床依据。方法选取2013年10月—2020年8月在新疆医科大学第一附属医院诊断为原发ITP患者(42例)及继发ITP患者(42例)为研究对象,所有患者入院时采用ITP出血评分量表行出血评分。应用改良MAIPA法检测患者抗GPⅡb/Ⅲa和抗GPΙb/Ⅸ抗体。结果原发与继发组患者抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),原发组患者抗体表达以抗GPⅡb/Ⅲa抗体为主,继发组抗体表达以抗GPΙb/Ⅸ抗体为主,两者抗体阳性构成比较,差异有统计学意义(P<0.05)。继发组患者整体出血程度较原发组重(P<0.05)。抗体阳性表达与出血程度的关系:(1)抗GPⅡb/Ⅲa抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重(P<0.05)。(2)抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重(P<0.05),双抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重(P<0.05)。结论抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性表达对原发与继发ITP无鉴别意义,但原发ITP患者抗体表达以抗GPⅡb/Ⅲa抗体为主,继发ITP患者抗体表达以抗GPΙb/Ⅸ抗体为主。继发ITP患者临床出血程度较原发ITP患者重。抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体及抗体双阳性患者出血程度较抗体阴性患者重。

高表达抗β2糖蛋白I(β2GPI)自身抗体可加重结缔组织病炎症程度及免疫功能紊乱

目的 观察抗β2糖蛋白I(β2GPI)自身抗体在结缔组织病表达及其与炎症及免疫功能的关系。方法 观察对象为广义结缔组织病患者,包括结缔组织病(CTD)、类风湿性关节炎(RA)、干燥综合征(SS)和系统性红斑狼疮(SLE)。采用化学发光法进行定量检测抗β2GPI。采用魏氏法检测血沉(ESR),采用全自动生化分析仪检测C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体。结果 RA患者抗β2GPI抗体及其亚型较CTD、 SS、 SLE患者均明显升高。结缔组织病患者中CRP与抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgM呈正比。ESR与抗β2GPI抗体呈正比。与CRP正常组比较,CRP异常组抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgM升高。与ESR正常组比较,ESR异常组抗β2GPI抗体、抗β2GPI抗体IgG升高。RA患者中抗β2GPI抗体与ESR、抗CCP抗体呈正相关。抗β2GPI抗体IgG与RF呈正相关。结论 抗β2GPI抗体水平可作为结缔组织病炎症程度和评估免疫紊乱的一个预测因子。

健康献血者血浆可溶性糖蛋白A(GPA)在抗-M与抗-“Mia”抗体阳性及阴性中表达差异的分析研究

目的分析健康献血者血浆中可溶性糖蛋白A(glycoprotein A,GPA)表达量与抗-M及抗-“Mia”抗体的相关性。方法收集2022年2月9日~2023年2月15日的健康献血者血浆:不规则抗体阴性的NN型(Ⅰ组,n=118)与MM型(Ⅱ组,n=51),抗-M抗体阳性的NN型(Ⅲ组,n=145)与抗-“Mia”抗体阳性的随机型(Ⅳ组,n=87),分别检测4组人不同个体血浆中GPA的含量,t检验分析GPA表达量的差异。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组血浆中GPA平均含量分别为:9.941±0.252,10.97±0.256,5.139±0.129和4.28±0.139ng/ml。Ⅰ组与Ⅱ组的GPA平均含量较高,Ⅲ组与Ⅳ组的GPA平均含量较低,显示GPA平均含量在不规则抗体阴性(Ⅰ组与Ⅱ组)的血浆中较高,在抗-M与抗-“Mia”抗体阳性(Ⅲ与Ⅳ组)的血浆中较低,差异具有统计学意义(均P<0.01)。结论含有抗-M与抗-“Mia”抗体的健康献血者血浆中GPA含量明显低于抗体阴性的群体。该研究结果为深入探讨血浆中GPA是否有中和抗-M与抗-“Mia”抗体的能力,提高疾病诊断与安全输血打下基础。

香菇糖蛋白对大鼠铅中毒的改善作用

目的:通过优化提取工艺获得具有促排铅功能的香菇糖蛋白,探讨其对醋酸铅诱导铅中毒大鼠的防治效果。方法:利用热水浸提去除蛋白以及层析技术获得香菇糖蛋白纯品,利用红外光谱分析、单糖组成、N端氨基酸及内部氨基酸序列分析技术鉴定了香菇糖蛋白的分子特性。将63只雄性SD大鼠随机分为9组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、香菇糖蛋白处理组(4、8、160 mg/kg)和香菇子实体处理组(4、12、36 g/kg),通过腹腔注射醋酸铅制备大鼠铅中毒模型,连续给药30 d,观察大鼠的外观表现,检测体重变化、血液和脏器中的铅含量以及生化指标。结果:提纯的香菇糖蛋白(LEPP)经过单糖组成分析发现其是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖、岩藻糖、核糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖组成,氨基酸序列分析发现其N端序列为MPEQVVVADA,说明香菇糖蛋白具有多糖和蛋白的成分。动物实验表明,香菇糖蛋白能够促进铅中毒大鼠的体重增长,显著降低血液和肝脏中铅的含量(P<0.05),具有排除铅在肝脏中的沉积作用,显著提高血清中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性(P<0.05),降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量(P<0.05),提高机体的抗氧化能力,同时香菇糖蛋白还可以降低血液中谷草转氨酶(Glutamic Oxaloacetic Transaminase,AST)和谷丙转氨酶(Glutamic-Pyruvic Transaminase,ALT)的水平,具有保护肝脏的作用。结论:香菇糖蛋白可以排除体内的重金属铅,有效地改善大鼠的铅中毒症状。

双嘧达莫与低分子肝素对肾病综合征患儿凝血功能、肾功能、内皮功能及β_(2)糖蛋白Ⅰ/氧化低密度脂蛋白复合物的影响

目的 研究双嘧达莫与低分子肝素对肾病综合征患儿凝血功能、肾功能、内皮功能及β_(2)糖蛋白Ⅰ(β_(2)-GPⅠ)/氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)复合物的影响。方法 选取广西中医药大学第一附属医院2021年4月至2022年6月收治的90例肾病综合征患儿,按照随机数字表法将其分为对照A组(30例)、对照B组(30例)和观察组(30例)。对照A组给予甲泼尼龙+低分子肝素治疗,对照B组给予甲泼尼龙+双嘧达莫治疗,观察组行甲泼尼龙+低分子肝素+双嘧达莫治疗,三组均连续治疗30 d。比较三组治疗效果;比较三组治疗前后凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)],肾功能指标[尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)、血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白定量],内皮功能指标[内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(v WF)]及β_(2)-GPⅠ/ox-LDL复合物;观察组三组不良反应发生情况。结果 观察组与对照A组疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组疗效优于对照B组(P<0.05)。治疗后,观察组APTT、PT水平长于对照A组和对照B组(P<0.05)。治疗后,观察组D-D、FIB、BUN、Cys C、Scr、24 h尿蛋白定量、ET-1、vWF、β_(2)-GPⅠ/ox-LDL复合物水平低于对照A组和对照B组(P<0.05)。观察组与对照A组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照B组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 双嘧达莫联合低分子肝素可提高肾病综合征患儿临床疗效,改善凝血功能及肾功能,且用药安全性高。

肝特异性对比剂MR扫描联合异常糖链糖蛋白、甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体L3检测在乙肝相关性肝细胞癌诊断中的应用价值

目的探讨肝特异性对比剂MR扫描联合异常糖链糖蛋白(TAP)、甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体L3(AFP-L3)检测在乙肝相关性肝细胞癌(HCC)诊断中的应用价值。方法将62例乙肝相关性HCC患者纳入HCC组,53例良性肝病患者纳入良性肝病组。检测两组的TAP、AFP和AFP-L3,计算AFP-L3/AFP(AFP-L3%);对患者行上腹部MR平扫及肝特异性对比剂增强扫描,分析两组的MR影像表现。绘制受试者工作特征(ROC)曲线并分别探讨MR扫描、TAP、AFP、AFP-L3%单独及联合检测对乙肝相关性HCC的诊断价值。结果HCC组的TAP、AFP及AFP-L3%显著高于良性肝病组,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,MR扫描、TAP、AFP、AFP-L3%单独及联合检测乙肝相关性HCC的曲线下面积(AUC)分别为0.904、0.742、0.772、0.826、0.931,联合检测的诊断效能最高。结论肝特异性对比剂MR扫描联合TAP、AFP、AFP-L3%检测对于乙肝相关性HCC的诊断具有重要的临床价值。

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病的研究进展

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病(MOGAD)属于免疫介导的中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病,各年龄段均可发病,可引起视神经、大脑、小脑、脑干、脊髓等部位脱髓鞘病变。随着检验技术的进步,MOGAD相应的诊断和管理的挑战也在不断扩大。本文将回顾总结MOGAD的流行病学,病理机制、临床表现、辅助检查、诊断与鉴别诊断、治疗预后等相关研究,旨在提高对该病的认识,从而早期识别、尽早治疗、减少复发。

狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节Ⅰ型干扰素作用的差异分析

【目的】狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)引起的一种高致死性人兽共患传染病。Ⅰ型干扰素(IFN-I)通路在抵抗RABV感染中发挥重要作用。RABV可通过磷蛋白及核蛋白的功能逃逸IFN-I的抗病毒作用,本研究旨在探讨对RABV的致病性有重要影响的糖蛋白(Glycoprotein,G)在调节IFN-I通路方面扮演怎样的角色。【方法】将RABV弱毒株Hep-Flury的G基因替换成致病株CVS-11的G基因,拯救得到重组病毒HepG,分析Hep-Flury、CVS-11和HepG这3种毒株在体内和体外感染对IFN-I通路激活和调控的差别,比较它们在神经细胞中对抗IFN-I抗病毒作用的差异性。【结果】替换了CVS-11的G基因后,重组病毒HepG致病力增强,能够100%致死小鼠,在鼠脑中的增殖水平显著高于亲本株Hep-Flury。在感染鼠脑早期及体外神经细胞时,弱毒株Hep-Flury能够较快地激活IFN-I通路相关基因的表达,重组病毒HepG的激活能力介于HepFlury和CVS-11之间。利用Poly(I:C)激活神经细胞的IFN-I通路后,Hep-Flury的增殖被显著抑制,CVS-11和HepG的复制几乎不受影响,表现出一定的抵抗能力。【结论】RABV的G蛋白在调节和抵抗IFN-I通路方面发挥重要功能,为进一步探究RABV致病毒株的G蛋白如何协助病毒在中枢神经系统中逃逸IFN-I提供了线索和依据。

异常糖链糖蛋白不同截断值排查肺癌的效能观察

目的探究异常糖链糖蛋白(TAP)不同截断值排查肺癌的效能。方法选取江西省胸科医院2021年1月至2022年1月收治的66例肺癌患者与同期收治的66例非肺癌患者作为研究对象。计算肺癌与非肺癌疾病患者TAP凝聚物面积指标差异,判断TAP是否能用于诊断肺癌疾病,通过绘制ROC曲线方式得到患者TAP的最佳截断值,进行肺癌诊断,判断诊断效能,并以临床常见TAP正常参考范围(<121μm^(2))与所得截断值比较诊断效能。结果肺癌组的TAP凝聚物面积大于非肺癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。通过绘制ROC曲线,确定>170μm^(2)为最高截断值,比较其与临床常见TAP的正常参考范围(<121μm^(2))的诊断效能,结果显示二者的阳性检出率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对疑似肺癌患者实行TAP不同截断值排查,以170μm^(2)截断值排查效果较佳,值得临床推广应用。

四种食用菌糖蛋白粗提物体外抗氧化和抑菌活性比较

采用超声波辅助水提醇沉法获得美味红菇(Russula delica)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)和翘鳞肉齿菌(Sarcodon imbricatus)糖蛋白粗提物,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其多糖和蛋白质相对分子质量;采用傅立叶变换红外吸收光谱仪测定其化学组成;采用苯酚硫酸法测定其多糖含量、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量;分别测定粗提物对DPPH自由基、ABTS自由基清除能力、总还原力以及对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明:4种食用菌粗提物中均存在糖蛋白,相对分子质量为(2.5~6)×10~4;糖蛋白粗提物中具备典型蛋白和多糖红外吸收特征;在实验范围内,2.5mg·mL^(-1)翘鳞肉齿菌糖蛋白粗提物对ABTS自由基、DPPH自由基的清除率最大,分别为(89.09±4.31)%和(54.95±0.56)%,3 mg·mL^(-1)翘鳞肉齿菌糖蛋白粗提物总还原力0.99±0.051最强;美味牛肝菌、翘鳞肉齿菌分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌活性强。

牛3种妊娠相关糖蛋白可视早孕试剂盒检测效果比较

旨在确定牛妊娠相关糖蛋白(PAGs)可视早孕试剂盒与超声检查的差异、检测准确性的判断标准,并比较牛3种PAGs可视早孕试剂盒的检测效果。采用酶联免疫吸附试验法检测牛的“未孕(特异性)”和“怀孕(灵敏性)”,并将检测结果与超声检查相比较,以此判断牛PAGs的检测准确性及检测效果。结果显示,3种PAGs试剂盒的检测结果与超声检查不存在显著性差别,可以用作商业化检测。该类试剂盒的灵敏性与超声检查的一致性高于93%,但不能达到100%,原因在于PAGs存在一定的半衰期,灵敏性只能作为牛PAGs检测准确性的参考依据,不能作为最终判断依据。而3种试剂盒的检测特异性与超声检查的一致性均可达100%,该类试剂盒可以作为准确性最终判断依据。3种试剂盒中,试剂盒2、3可以在人工输精后第27天达到100%,比试剂盒1提前4 d。

基于pH响应涂层柱的毛细管电泳法在线富集和分离糖蛋白

本研究通过静电自组装法制备了一种3-氨基苯硼酸(APBA)修饰的纳米金(AuNPs@APBA)涂层毛细管柱,该毛细管柱兼具抗非特异性吸附性和富集选择性,将其作为分离通道,建立了基于pH响应涂层柱的糖蛋白在线富集与分离方法。首先,采用柠檬酸钠还原法制备金纳米颗粒(AuNPs),再将APBA通过静电自组装修饰到AuNPs表面,制得AuNPs@APBA纳米材料;利用离子吸附作用将AuNPs@APBA吸附到毛细管内壁上,制得AuNPs@APBA涂层毛细管柱。在pH为8的条件下,糖蛋白能够与毛细管内表面的硼酸基团结合形成硼酸酯,从而被吸附;当pH为3时,硼酸酯发生解离并释放出糖蛋白,基于上述原理,该方法能够实现糖蛋白的选择性在线富集与分离。实验结果表明,与使用普通电泳法的裸柱相比,经AuNPs@APBA涂层毛细管柱富集后,卵清蛋白(OVA)的峰面积增大了2646倍,而牛血清白蛋白(BSA)的峰面积仅增大了847倍;并且,将鸡蛋清样品稀释1×10^(6)倍后,仍可利用该方法对糖蛋白进行检测。该方法样品用量少,操作简单,分离效率高,可用于实际样品中痕量糖蛋白的在线富集与分离。

血清人软骨糖蛋白-39对慢性阻塞性肺疾病急性加重的诊断价值

目的探讨血清人软骨糖蛋白-39(YKL-40)对于慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重(AECOPD)的诊断价值。方法纳入2018年9月至2019年6月在河北北方学院附属第一医院住院AECOPD病人85例及同期70例COPD稳定期病人作为对照组,受试者均检测血清YKL-40、降钙素原(PCT)及C反应蛋白(CRP)水平,收集各受试者在院检测的肺功能、血气分析结果。观察各指标在不同的AECOPD临床分级的变化以及YKL-40与相关临床参数的关系。结果两组YKL-40(58.03±12.78)μg/L比(38.69±8.72)μg/L、PCT(7.54±2.71)μg/L比(3.72±1.79)μg/L、CRP(99.29±34.98)mg/L比(52.91±27.77)mg/L比较均差异有统计学意义。随着病人病情加重,AECOPDⅠ、Ⅱ、Ⅲ级血清YKL-40水平逐渐升高(49.23±11.26)μg/L、(56.70±10.38)μg/L、(67.93±10.32)μg/L,各组间比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。YKL-40与PCT、CRP、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))呈正相关,但与预测的第一秒用力呼气容积(FEV_(1))、第一秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV_(1)%)、第一秒用力呼气量占用力肺活量百分率(FEV_(1)/FVC)和动脉血氧分压(PaO2)呈负相关(P<0.05)。结论AECOPD病人血清YKL-40水平随病情加重而升高,升高程度与病情严重程度相关。

人软骨糖蛋白-39、N端脑钠肽前体在川崎病患儿冠状动脉损伤中的应用价值

目的 探讨人软骨糖蛋白-39(YKL-40)、N端脑钠肽前体(NT-proBNP)在川崎病(KD)患儿冠状动脉损伤(CAL)中的临床应用价值。方法 选取125例KD患儿作为研究对象(KD组),并根据是否合并冠状动脉病变分为CAL组(n=53)及无冠状动脉损伤(NCAL)组(n=72)。选取同期体检的健康儿童(HC组)和同期住院的仅消化道感染的发热患儿(FC组)作为对照。检测血浆YKL-40、NT-proBNP水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估YKL-40、NT-proBNP对KD患儿不同时期CAL的诊断价值。结果 KD患儿不同时期(急性期、亚急性期和恢复期)的血浆YKL-40、NT-proBNP水平高于HC组、FC组,差异有统计学意义(P<0.05);CAL组YKL-40水平高于NCAL组,急性期NT-proBNP高于NCAL组,差异有统计学意义(P<0.05)。YKL-40、NT-proBNP及两者联合诊断KD急性期CAL的曲线下面积(AUC)分别为0.813、0.832、0.886;YKL-40、NT-proBNP及两者联合诊断KD亚急性期CAL的AUC分别为0.699、0.522、0.701;YKL-40、NT-proBNP及两者联合诊断KD恢复期CAL的AUC分别为0.982、0.435、0.986。结论 血浆YKL-40和NT-proBNP水平可作为KD早期辅助诊断指标。血浆YKL-40可联合其他指标用于监测KD疾病活动及CAL并发症的发展。

基于P-糖蛋白信号通路研究龙血竭对大鼠失重空肠屏障损伤的保护机制

传统中药龙血竭在航天肠道损伤的防护中发挥重要作用,但其保护失重屏障损伤的作用机制尚不清楚.P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是肠上皮细胞膜上的外排转运体,能够将毒素、有害菌等外排以维持肠屏障完整性.文中采用大鼠尾吊模型模拟微重力效应,灌胃给药龙血竭(Dragon’s Blood,DB)21d后,观察大鼠空肠组织形态、测定肠屏障通透性标志物质量浓度、检测P-gp与Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白的表达.结果表明,龙血竭可通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进空肠中P-gp基因及蛋白的表达,能够缓解模拟微重力效应下的大鼠空肠屏障损伤.研究结果或可为航天员在轨肠道损伤防护提供基础研究数据.

重组人糖蛋白激素β5/α2融合蛋白在CHO-S细胞中的表达纯化及功能活性分析

目的在悬浮中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO-S)中分泌表达、纯化重组hCGH-CTP融合蛋白,验证其对3T3-L1成熟脂肪细胞脂质积累的影响。方法构建CTP连接肽融合人糖蛋白激素β5/α2重组蛋白表达载体pcDNA3.1-rhCGH-CTP,将其瞬时转染CHO-S悬浮细胞中,大量表达纯化并验证rhCGH-CTP蛋白生物学活性;通过干预3T3-L1成熟脂肪细胞24 h,观察细胞内甘油三酯(TG)水平的变化。结果Western blot结果显示,rhCGH-CTP蛋白在CHO-S细胞中成功表达,表达量可达715.4 mg·L^(-1);用AKTA pure蛋白纯化系统纯化蛋白,SDS-PAGE方法鉴定纯化出的蛋白纯度较高可达90%。此外,在高表达TSHR基因的成熟脂肪细胞3T3-L1中,利用ELISA试剂盒测定不同浓度rhCGH-CTP蛋白干预后胞内cAMP含量明显升高,说明rhCGH-CTP蛋白具有生物活性;油红O染色结果发现,与对照组相比,不同浓度rhCGH-CTP蛋白干预组的成熟脂肪细胞中TG含量明显降低(P<0.05)。结论成功表达并纯化了rhCGH-CTP融合蛋白,其具有良好的生物学活性并能有效降低TG,该研究为后续深入揭示CGH蛋白的生理作用及在临床实践中的潜在应用提供了重要基础。

鳜弹状病毒糖蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

近年来,鳜弹状病毒引起的病害频发,该病毒传播快,致病性强,是引起鳜病害的主要病原之一。鳜弹状病毒基因组编码5个结构蛋白,其中糖蛋白G是病毒表面的主要抗原,为实现该抗原蛋白的大量表达,利用分子克隆技术将鳜弹状病毒糖蛋白G片段插入杆状病毒穿梭载体pFastBac1中转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞后,筛选阳性克隆获得重组转移载体pFastBac-G,再将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑与抗性筛选后获取重组杆粒rBacmid-G,随后利用脂质体转染法将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞制备重组杆状病毒。将获取到的P3代重组病毒感染Sf9昆虫细胞进行重组蛋白的SDS-PAGE检测,成功表达后利用镍离子亲和层析柱纯化目的蛋白,随后对重组蛋白进行Western blot鉴定,结果显示在大于50 ku处有一条特异性条带,而对照组无条带,表明制备的抗原能与抗体特异性结合。结果表明,鳜弹状病毒糖蛋白G在杆状病毒表达系统成功表达。本试验结果可为鳜弹状病毒糖蛋白G疫苗的研发和大规模生产提供技术支撑。

异常糖链糖蛋白水平与乳腺癌分子分型及临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌中肿瘤异常糖链糖蛋白(tumor abnormal protein,TAP)水平与乳腺癌分子分型、临床病理特征的关系,分析TAP在乳腺癌筛查、诊断和预后中的价值。方法收集357例乳腺癌患者的临床资料,采集患者肘部静脉血检测TAP凝聚物面积。运用免疫组化EnVision两步法分析AR、ER、PR、HER2、p53、Ki67等表达,应用FISH检测HER2基因,分析TAP表达与乳腺癌临床病理特征、分子分型和临床分期的关系,并复习相关文献。结果357例乳腺癌患者中,TAP阴性9例(2.52%),TAP弱阳性36例(10.08%),TAP强阳性312例(87.40%),TAP阳性率为97.48%。免疫表型:AR阳性321例、阴性36例,ER阳性256例、阴性101例,PR阳性214例、阴性143例,HER2强阳性98例、弱阳性214例和阴性45例,p53阳性146例、阴性211例,Ki67增殖指数≥20%者276例、<20%者81例。FISH法:155例乳腺癌免疫组化HER2(2+)患者行FISH检测,其中140例阴性,15例阳性。≥50岁患者TAP表达水平明显高于<50岁患者(P<0.05),Ki67增殖指数高表达者的TAP表达水平高于Ki67低表达者(P<0.05)。不同分子分型乳腺癌患者的TAP表达差异有统计学意义(P<0.05);三阴型乳腺癌患者的TAP表达高于非三阴型患者(P<0.05),Luminal B型患者的TAP表达高于非Luminal B型患者(P<0.05);不同临床分期的乳腺癌患者TAP表达差异有统计学意义(P<0.05),在乳腺癌中TAP表达水平与临床分期呈正相关。结论TAP检测可提高乳腺癌诊断准确率,与乳腺癌患者生存率和预后有相关性。

血清抗糖蛋白210抗体阳性的原发性胆汁性胆管炎患者临床特征分析

目的总结血清抗糖蛋白210(抗gp210)抗体阳性的原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者临床特征。方法2017年1月~2021年1月我院诊治的PBC患者63例,其中血清抗gp210抗体阳性患者21例(观察组),血清抗线粒体抗体(AMA)或AMA-M2阳性42例(对照组)。给予所有患者熊去氧胆酸(UDCA)13~15 mg·kg^(-1) d^(-1)治疗6个月。采用ELISA法检测血清白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和IL-10水平,采用免疫比浊法检测血清IgA、IgG和IgM。结果观察组年龄和性别与对照组比差异均无统计学意义(P>0.05),但观察组乏力发生率为47.6%,显著高于对照组的35.7%(P<0.05);治疗前,观察组血清总胆红素(TBIL)、ALT和AST水平分别为30.1(18.5,66.1)μmol/L、73(42,110)U/L和87(64,126)U/L,均显著高于对照组【分别为20.1(10.4,31.5)μmol/L、53(27,90)U/L和68(53,101)U/L,P<0.05】,而血清白蛋白水平为32.2(29.8,35.2)g/L,显著低于对照组【34.6(30.4,36.8)g/L,P<0.05】;在治疗6个月后,观察组血清白蛋白水平为37.8(35.4,38.5)g/L,仍显著低于对照组【42.3(37.4,45.1)g/L,P<0.05】;治疗前,观察组血清IL-6和IL-10水平分别为12.7(5.8,11.3)pg/ml和125.1(87.4,120.6)pg/ml,均显著高于对照组【分别为9.1(7.0,11.7)pg/ml和103.6(90.1,117.0)pg/ml,P<0.05】;在治疗后,观察组血清IL-2和IL-6水平分别为29.1(18.4,36.5)pg/ml和7.2(5.2,8.5)pg/ml,均显著高于对照组【分别为21.0(9.7,26.3)pg/ml和5.4(4.0,6.9)pg/ml,P<0.05】,而血清IL-10水平为139.5(107.6,152.9)pg/ml,也显著低于对照组【154.8(122.7,168.2)pg/ml,P<0.05】;治疗后,观察组血清IgM、IgG和IgA水平分别为3.1(2.5,3.7)g/L、13.7(12.0,14.6)g/L和3.8(2.9,3.8)g/L,均显著高于对照组【分别为2.2(1.9,2.6)g/L、11.2(10.1,13.4)g/L和2.8(2.5,3.3)g/L,P<0.05】。结论血清抗gp210抗体阳性的PBC患者病情似乎更趋严重,对UDCA治疗应答稍差,值得临床扩大观察和研究。