我国新城疫强毒株F糖蛋白基因的体外合成及其抗原性研究

将我国新城疫强毒株Ｆ４８Ｅ９在ＳＰＦ鸡胚增殖后提取ＲＮＡ，用自行设计的一对寡聚核苷酸引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，合成了Ｆ糖蛋白基因片段。将此片段与ｐＵＣ１９质粒重组，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，从阳性克隆中提取重组质粒，再用ＰＣＲ法扩增，获得了同样大小的ＤＮＡ片段。经用特异性抗体探针检测。

马立克病病毒囊膜糖蛋白E基因的克隆及序列分析

用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从中国广西分离的马立克氏病病毒 (MDV)N株和G2 株基因组DNA中 ,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的 1 5 0 0bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进 pUC1 8质粒载体中 ,以Dig标记的gEPCR产物作为探针做斑点杂交及酶切分析筛选到含MDVgE基因的目的重组质粒 pMNE、pMG2 E。通过酶切位点分析显示 ,两毒株的 gE基因内部酶切位点与MDV GA国际标准强毒株的酶切位点基本一致。对重组 pMNE、pMG2 E质粒进行部分序列测定 ,并用DNAStar软件分析 ,结果表明 :插入序列与发表的GA株gE基因序列具有高度同源性 ,gE基因为高度保守基因。

应用重组杆状病毒表达NDVF糖蛋白和预防ND

用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）和家蚕核型多体病毒（ＢｍＮＰＶ）构建的杂合杆状病毒表达了鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｄ２６株的融合（Ｆ）糖蛋白，将编码Ｆ蛋白的基因插入宿主范围扩展的改良杆状病毒表达载体，重组杆状病毒ＨｙＦ１２１感染的草地贪夜蛾（ｓｆ）细胞中，表达的Ｆ蛋白定位于细胞表面，ＨｙＦ１２１感染吞蛹后，用感染蚕蛹制取抗ＮＤＶ的亚单位疫苗，这种亚单位疫苗接种鸡后可抵抗ＮＤＶ强毒的攻击。

CDV融合蛋白亚单位组成的生化结构基础研究

哈兽研所科技人员通过差速离心和蔗糖密度离心纯化犬瘟热病毒S8毒株（CDV）,SDS—PAGE和Western Blotting分析确定其结构多肽后,电转移回收并纯化其63KD的融合糖蛋白F。采用胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶消化此F蛋白后,SDS—PAGE分析?结果表明。

副黏病毒HN与F糖蛋白的结合作用域

副黏病毒囊膜表面糖蛋白有两种,即与宿主受体结合的血凝素神经氨酸酶(HN)以及介导膜融合的融合糖蛋白(F).HN与受体的结合可激活F,使其发生构象变化,从而介导病毒囊膜与宿主细胞膜的膜融合,但HN与F蛋白相互结合的区域还不清楚.用基因工程方法获得禽副流感病毒-2(APIV-2)HN蛋白球状头部区域(globularheadregion,HNH)以及F蛋白两段七肽重复区域(heptadrepeat,HR)HR1与HR2三个纯化蛋白.蛋白质体外结合实验及质谱与圆二色谱的结果表明,HNH不仅可与HR2结合,还可与HR1结合,并且结合后的蛋白构象与各组成多肽的构象不同.结果表明,HNH可能是HN蛋白与F蛋白的结合作用域.在此基础上讨论了HN激活F并引致膜融合的分子机制,可为阻止病毒膜融合寻找新策略.

北京地区正常人群血清中呼吸道合胞病毒F和G蛋白特异性IgG抗体水平的观察

以表达呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒作为抗原，用间接免疫荧光法检测北京地区不同年龄组正常儿童及成人血清中ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。其结果表明：成人及产妇静脉血中有中等滴度的ＲＳＶ抗体及较低水平的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。初生婴儿脐带血中的ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平同母亲静脉血中的一致，表明属母传抗体。婴幼儿ＲＳＶ抗体水平在生后６个月内迅速降低，６个月以后抗体的滴度随年龄消长，７－１４岁时水平最高。Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体滴度在生后６个月内无明显降低，但低于大年龄组儿童。６个月后Ｆ和Ｇ蛋白抗体滴度显著升高并随年龄波动，Ｆ较Ｇ蛋白更为显著，分别在３～７岁（Ｆ蛋白）和７－１４岁（Ｇ蛋白）组中达是高滴度。从ＲＳＶ，Ｆ和Ｇ蛋白三种特异性ＩｇＧ抗体间的相关性来看：ＲＳＶ分别同Ｆ和Ｇ蛋白抗体呈现明显的相关性，但Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体间无明显相关性。

人呼吸道合胞病毒亚单位疫苗的研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)是在世界范围内引起婴幼儿下呼吸道感染的重要病毒之一,WHO要求对RSV要严加监控。RSV是副粘病毒科肺炎病毒属的单股负链非节段性RNA病毒。RSV疫苗的研制已有40多年的历史,但至今未被批准使用其疫苗。RSV膜表面融合蛋白F和黏附蛋白G两种糖蛋白,是激发机体产生保护性抗体的最主要的病毒抗原,亚单位疫苗的开发主要针对这两个蛋白。目前研究的有纯化的F糖蛋白(PFP)、BBG2Na、嵌合型F-G糖蛋白及纯化的F、G和基质蛋白M。本文就目前国内外所研究的RSV亚单位疫苗作一综述。

抗感染药物研发动态

FDA公布关于motavizumab的完全回应信 AstraZeneca公司的生物制品部门Medimmune再次收到FDA关于呼吸道合胞病毒糖蛋白F单克隆抗体motavizumab（Numax^TM）用于预防严重的呼吸道合胞病毒感染的完全回应信（complete response letter，CRL）。在这封CRL中，FDA要求公司补充1项临床试验，以证明本品所申请的预防性适应症在患者群中有令人满意的风险-受益概况。