我国新城疫强毒株F糖蛋白基因的体外合成及其抗原性研究

将我国新城疫强毒株Ｆ４８Ｅ９在ＳＰＦ鸡胚增殖后提取ＲＮＡ，用自行设计的一对寡聚核苷酸引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，合成了Ｆ糖蛋白基因片段。将此片段与ｐＵＣ１９质粒重组，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，从阳性克隆中提取重组质粒，再用ＰＣＲ法扩增，获得了同样大小的ＤＮＡ片段。经用特异性抗体探针检测。

马立克病病毒囊膜糖蛋白E基因的克隆及序列分析

用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从中国广西分离的马立克氏病病毒 (MDV)N株和G2 株基因组DNA中 ,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的 1 5 0 0bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进 pUC1 8质粒载体中 ,以Dig标记的gEPCR产物作为探针做斑点杂交及酶切分析筛选到含MDVgE基因的目的重组质粒 pMNE、pMG2 E。通过酶切位点分析显示 ,两毒株的 gE基因内部酶切位点与MDV GA国际标准强毒株的酶切位点基本一致。对重组 pMNE、pMG2 E质粒进行部分序列测定 ,并用DNAStar软件分析 ,结果表明 :插入序列与发表的GA株gE基因序列具有高度同源性 ,gE基因为高度保守基因。