嗜酸乳杆菌表达载体的构建及其甘露聚糖酶的表达

为获得产甘露聚糖酶的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)菌株,该研究构建甘露聚糖酶表达载体并转化嗜酸乳杆菌,分析重组嗜酸乳杆菌产甘露聚糖酶的酶学性质,并测定重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及甘露聚糖酶的抗蛋白酶活性。结果表明,重组嗜酸乳杆菌发酵24 h,其所产甘露聚糖酶活性为353 U/m L。甘露聚糖酶的最适催化pH值为5.5,最适催化温度为55℃。重组嗜酸乳杆菌在pH 2.0~4.5有一定的耐酸性,在pH 2.0条件下2 h的存活率为77.3%。甘露聚糖酶液用胃蛋白酶、胰蛋白酶处理160 min后,甘露聚糖酶的相对酶活分别为65%、28%。表明该甘露聚糖酶具有一定的抗胃蛋白酶和部分抗胰蛋白酶降解能力。

重组木聚糖酶的高密度发酵及其定向制备低聚木糖

为提高酶水解杨木木聚糖定向转化低聚木糖的效率,同时降低酶法制备低聚木糖的成本,围绕重组大肠杆菌(PET-PdoXyn10A-DE3)高密度发酵制备拟杆菌来源木聚糖酶PdoXyn10A的诱导表达条件和酶水解制备低聚木糖的工艺条件开展了研究。考察了在5 L发酵罐水平下诱导剂浓度、诱导光密度(OD_(600))值、诱导温度和诱导pH值等因素对PET-PdoXyn10A-DE3产重组木聚糖酶PdoXyn10A的影响,反应温度、pH值对玉米芯木聚糖酶水解过程中酶活力的影响,以及酶添加量、酶水解时间对杨木乙酸水解液制备低聚木糖的影响。研究结果表明:在诱导剂浓度0.25 mmol/L、诱导OD_(600)值55、诱导温度34℃和诱导pH值7.0的最佳诱导条件下,经高密度发酵重组酶酶活力可达362.67 U/mL,重组大肠杆菌生物量可达28.83 g/L。酶水解制备低聚木糖的最佳条件为酶反应温度40℃、pH值5.2、酶添加量12 U/mL和反应时间6 h,此条件下低聚木糖的量为3.21 g/L,其中木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖的量分别为1.09、 0.97、 0.84、 0.18、 0.13 g/L,木糖为1.82 g/L。

哈茨木霉UN⁃2β⁃葡聚糖酶诱导及对水稻纹枯病的抑菌防病作用

【目的】优化哈茨木霉UN⁃2菌株产β⁃葡聚糖酶的培养基组分及发酵参数,提高其产酶能力,研究β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病病原菌的拮抗作用及田间防效,阐明哈茨木霉菌株UN⁃2在水稻纹枯病生物防治中的应用潜力。【方法】采用单因素试验考察不同碳源、氮源和金属离子对哈茨木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶的影响,利用正交试验确定木霉菌株产β⁃葡聚糖酶的最适温度、pH、接种量、瓶装量、摇床转速和发酵时间,优化哈茨木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶诱导发酵条件;通过体外拮抗试验和田间防效试验研究β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病的抑菌防病作用。【结果】哈茨木霉菌株UN⁃2发酵产β⁃葡聚糖酶最佳碳源和氮源分别为麦麸和硫酸铵,金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)对木霉产β⁃葡聚糖酶活性具有明显的促进作用。哈茨木霉UN⁃2菌株以10.0 g/L麦麸、0.5 g/Lβ⁃葡聚糖、4.0 g/L硫酸铵、1.5 mmol/L Ca^(2+)、0.5 mmol/L Mg^(2+)为培养基,在温度32℃、起始pH 6.5、接种量8 mL(10^(6) cfu/mL)、瓶装量30 mL/250 mL、摇床转速160 r/min条件下发酵64 h获得β⁃葡聚糖酶活性最高。木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶粗酶液对立枯丝核菌和禾谷丝核菌的菌丝生长和菌核萌发具有明显的抑制作用,对由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病的田间防效达70.45%,与5%井冈霉素处理相当,β⁃葡聚糖酶粗酶液处理可提高水稻结实率和稻粒充实度。【结论】哈茨木霉菌株UN⁃2在最优发酵条件下产酶活性达97.68 U/mL,β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病具有较强的抑菌防病效果,并对水稻植株具有一定的促生作用。

哈茨木霉β-葡聚糖酶诱导、纯化及对黄瓜幼苗的促生防病作用

在实验室条件下分别以β-葡聚糖、麦麸和黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)细胞壁作为唯一碳源诱导哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)Th-30发酵产生β-葡聚糖酶,采用硫酸铵盐析和琼脂糖凝胶色谱柱层析法对β-葡聚糖酶进行分离纯化,以津研4号黄瓜为试验材料,探究β-葡聚糖酶对黄瓜幼苗抗性生理指标、形态指标的影响及黄瓜常见土传病害的防控作用。结果表明:不同诱导条件下木霉Th-30发酵产β-葡聚糖酶活性差异显著,经β-葡聚糖诱导发酵的粗酶液酶活性最高,发酵72 h时达75.63 U·mL^(-1);纯化的β-葡聚糖酶比活力为783.56 U·mg^(-1),是粗酶液的45.32倍;5倍液和10倍液β-葡聚糖酶可显著提高黄瓜幼苗的根系活力、游离脯氨酸含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性以及根冠比和壮苗指数;β-葡聚糖酶10倍液处理对黄瓜立枯病、黄瓜枯萎病、黄瓜疫病、黄瓜猝倒病、黄瓜菌核病的防效为50.36%~80.63%。

木聚糖酶对育肥猪生长性能、血清生化指标及肠道形态的影响

本研究旨在探究日粮中添加木聚糖酶对育肥猪生长性能、血清生化指标及肠道形态的影响。试验将120头平均体重(61±0.71)kg的三元育肥猪随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头。饲喂玉米-豆粕型日粮,分别向基础日粮中添加0、200、400、800 mg/kg的木聚糖酶。试验结果表明:日粮添加木聚糖酶显著提高育肥猪终末体重(P<0.05),日粮添加400和800 mg/kg木聚糖酶显著提高育肥猪平均日增重(P<0.05);日粮添加800 mg/kg木聚糖酶显著降低育肥猪料重比(P<0.05)。此外,日粮中添加木聚糖酶对育肥猪平均日采食量无显著影响(P>0.05)。日粮添加400 mg/kg木聚糖酶可显著提高育肥猪血清白蛋白、球蛋白和总蛋白含量(P<0.05);日粮添加800 mg/kg木聚糖酶可显著降低育肥猪血清尿素氮含量(P<0.05);日粮添加木聚糖酶对育肥猪血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和总胆固醇含量无显著影响(P>0.05)。饲料添加木聚糖酶可显著提高育肥猪十二指肠和回肠绒毛高度和V/C值(P<0.05);此外,日粮添加木聚糖酶对育肥猪十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度均无显著影响(P>0.05)。总之,本试验结果表明,育肥猪日粮木聚糖酶最适添加量为800 mg/kg。

血清壳多糖酶3样蛋白1检测在不同肝脏疾病中的应用价值分析

分析血清壳多糖酶3样蛋白1在不同肝脏疾病患者临床诊断中的应用价值。方法 选择医院收治的130例肝病患者为观察对象,并选择同一时间的130例健康体检者为对照,分别对受试者实施血清壳多糖酶3样蛋白1检测,比较不同受试者的生化指标差异。结果 不同受试者的血清壳多糖酶3样蛋白1、总胆红素、天门冬氨酸氨基转移酶水平比较结果显示,慢性乙型肝炎组水平显著高于健康体检组(P<0.05),肝硬化组高于慢性乙型肝炎组(P<0.05),肝癌组显著高于肝硬化组(P<0.05);血清壳多糖酶3样蛋白1在三种肝脏疾病检查中的敏感度与特异度结果显示,组间数据差异不显著(P>0.05)。结论 在肝脏疾病临床诊断中,血清壳多糖酶3样蛋白1可以作为评估患者病情的重要依据,值得关注。

响应面法模拟优化蜡样芽孢杆菌W-3菌株产木聚糖酶发酵条件

【目的】应用响应面法对产木聚糖酶的工艺进行优化,为进一步大规模生产提供参考依据。【方法】通过单因素试验分别考察碳源、氮源、pH、温度、接种量和转速6个因素对蜡样芽孢杆菌W-3产木聚糖酶的影响。通过Design Expert 10.0.3软件中的Box-Behnken进行响应面优化设计。通过对小麦麸皮、氯化铵、pH、温度、接种量和转速进行不同组合,系统地优化了发酵条件。利用二次响应面回归方法建立酶产量与各因素之间的数学模型,并通过回归分析确定各因素对酶产量的影响程度。【结果】小麦麸皮添加量、氯化铵添加量、pH和温度是影响发酵的主效应因素,单因子优化显示,蜡样芽孢杆菌W-3发酵产木聚糖酶条件为小麦麸皮35 g/L、氯化铵5 g/L、pH 8.0、温度70℃、接种量2%、转速210 r/min。在单因子优化的基础上进一步应用响应面优化,找到了更优的发酵参数,经过优化后的发酵条件为小麦麸皮33.0 g/L、氯化铵5.1 g/L、pH 8.3、温度73℃、接种量2%、转速210 r/min,该条件下蜡样芽孢杆菌W3发酵产生的木聚糖酶的酶活为523.24 U/mL。【结论】本试验通过响应面法优化了蜡样芽孢杆菌W-3发酵条件,在33.0 g/L小麦麸皮、5.1 g/L氯化铵、pH 8.3、73℃、2%接种量、210 r/min条件下,可获得较高的木聚糖酶的酶活(523.24 U/mL),比优化之前(225.53 U/mL)提高了2.32倍。

黑曲霉耐热型葡聚糖酶纤维素结合结构域的替换与融合体酶性质

该文旨在通过更换纤维素结合结构域(cellulose binding domain, CBD)的方式探索获得具有纤维素水解能力的耐热型葡聚糖酶的方法。黑曲霉(Aspergillus niger)来源的葡聚糖酶AnEglA6具有优越的耐热性能,在禽类饲料生产中具有应用前景。通过更换不同家族来源的碳水化合物结合结构域(carbohydrate binding module, CBM)编码区,构建了融合体葡聚糖酶基因,分别在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行异源表达。AnEglA6催化结构域与分别来源于嗜热菌(Caldicellulosiruptor kristjanssonii)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的木聚糖酶的底物结合结构域CBM9、CBM10结合获得的融合体酶AnEg-CBM9和AnEg-CBM10均具有较高的纤维素水解能力,并且底物范围进一步扩大,对微晶纤维素也具有一定的水解能力。AnEg-CBM10热稳定性有显著的提高,在85℃下酶活力半衰期达到40 min左右,能短时耐受90℃高温。融合体酶AnEg-CBM10是一种热稳定性提高、具有纤维素水解能力的新型葡聚糖酶。

低温β-1,4-内切葡聚糖酶的基因挖掘、异源表达及其酶学性质表征

β-1,4-内切葡聚糖酶在洗涤行业有着广泛的应用价值,其中具有较好的低温和碱性耐受能力是其实现工业应用的重要前提。该论文通过基因挖掘获得一株具有低温耐受能力的Deinococcus cellulosilyticus来源新型β-1,4-内切葡聚糖酶基因EgDC,并将其在大肠杆菌中实现了可溶性表达,其中大部分存在于周质空间,少部分分泌至胞外。对EgDC酶的酶学性质进行了表征,发现该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和pH 6.5,其在20℃能保持70%以上活力,且在pH 8.0和pH 9.0的半衰期分别达到83.43 min和53.79 min。EgDC酶具有较好的催化性质,其比酶活力k_(cat)/K_(m)值分别为(26.38±1.43)U/mg和(520.03±17.07)s^(-1)/mg,且对于金属离子以及表面活性剂均具有较强耐受能力。由此可见,新型β-1,4-内切葡聚糖酶EgDC具有较好的催化能力,且在低温、碱性以及存在表面活性剂环境下较为稳定,因此具有潜在的工业应用价值。

高压电场选育高产酸性木聚糖酶菌株的研究

为获得适用于动物饲料的木聚糖酶高产菌株,并验证高压电场诱变方法的有效性,于农田土壤中筛选出高产菌株,在高压电场中进行诱变,筛选最佳的突变菌株。出发菌株初步鉴定为沙福芽孢杆菌,命名为Bacillus safensis B16。该菌株所产木聚糖酶在pH 5、60℃下酶活性为217.34 U/mL,且60℃时的半衰期为229 min,热稳定性良好。在6~24 kV、极间距为3 cm的高压电晕电场中处理0~10 min,最终在10 kV下处理6 min选育出一株木聚糖酶高产菌株B16106-2,酶活性达到256.73 U/mL,较出发菌株提升了18.12%,且传代7次后菌株的产酶能力基本不变,具有良好的遗传稳定性。突变菌株所产木聚糖酶的最适酶反应条件不变。研究证明,高压电晕电场是一种有效的诱变方式,且筛选出的菌株B16106-2性能良好。

两种不同固定化方法对木聚糖酶Xyn11A酶学性质的影响及在低聚木糖制备中的应用

为了提高木聚糖酶Xyn11A的稳定性及在低聚木糖生产中的应用潜力,该研究利用有机-无机杂化纳米花技术和以氨基乙基-琼脂糖为载体共价结合法固定Xyn11A,制备了固定化酶Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)和Xyn11A-Agarose,并比较研究了2种固定化酶的酶学性质,发现2种固定化酶的pH稳定性和热稳定性均有所提高,Xyn11A-Agarose稳定性更佳,在pH 4.0~4.5处理24 h后仍有40%~65%的残余活性,50℃处理3 h后仍有60%的残余活性。以榉木木聚糖为底物,与游离酶相比,Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)和Xyn11A-Agarose对底物的亲和力和催化效率有所降低,但有较好的重复使用次数。特别是Xyn11A-Agarose循环使用12轮后,仍有90%的残余活性。Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)水解甘蔗渣和玉米芯粉生成的低聚木糖中木二糖和木三糖含量最高,木四糖含量最低;而Xyn11A-Agarose催化生成的不同低聚木糖含量相当。2种固定化方法均能显著提高Xyn11A的稳定性,但Xyn11A-Agarose的稳定性和重复性优于Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2),表明Xyn11A-Agarose在生产低聚木糖中具有更大应用潜力。

壳聚糖酶的结构特征及其应用

随着酶学研究和微生物学的发展,壳聚糖酶已从多种菌株筛选、分离和鉴定出来,通过基因工程和蛋白质工程的方法进行系统的酶学性质表征,可获得一系列高活性的壳聚糖酶。文章系统总结和归纳壳聚糖酶的研究进展状况,介绍壳聚糖酶的微生物来源、分类、酶学性质、三维结构和催化机制及其应用研究,指出其在科学研究上的瓶颈并提出展望。

麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征

以大型真菌灵芝中的麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶(MGAM)为研究对象,采用同源序列比对、同源模建、底物对接和定点突变等方法成功构建酶活力显著降低的突变体D246A.酶学性质表征结果表明:最适反应温度由野生型(wild type,WT)的65℃减少至60℃,突变体耐热能力下降;最适pH值由WT的6.0升高至7.0,有利于工程菌生长;半衰期由WT的2.0 h下降至1.5 h,酶稳定性降低.酶动力学结果表明:突变体D246A酶动力学曲线符合Michaelis方程,与WT相比,K_(m)值变大,表明酶与底物亲和力下降;V_(max)约降低至原来的1/4.

响应面法优化木聚糖酶的修饰工艺

探究化学修饰对木聚糖酶(XY)相对活性的影响,以XY相对活性为指标,利用丁二酸酐、乙酸酐、马来酸酐(MA)和邻苯二甲酸酐对XY进行化学修饰。采用单因素试验筛选出最优酸酐修饰剂,并进行响应面法优化酸酐修饰条件。结果表明:MA为最优修饰酸酐,最佳修饰条件为修饰温度14℃、修饰时间4h、pH7.0、MA添加量40%(以XY质量计)。在此条件下,马来酸酐修饰木聚糖酶(MA-XY)的相对活性为154.62%±1.24%。

血清miR-203和壳多糖酶3样蛋白1联合检测对肝显著纤维化/肝硬化的诊断价值

目的探讨微小RNA(miR)-203和血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)单独及联合诊断肝显著纤维化/肝硬化的价值。方法将该院2022年1月至2022年12月住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者80例纳入研究,同时选取体检健康者40例作为健康对照组。根据组织检查结果将纳入研究的CHB患者分为无/轻度纤维化组(50例)和肝显著纤维化/肝硬化组(30例)。检测各组血清miR-203和CHI3L1水平,肝纤维化4项[Ⅲ型前胶原(P-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、层粘连蛋白(LN),透明质酸酶(HA)]和生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)],计算天门冬氨酸氨基转移酶-血小板比值指数(APRI)、肝纤维化指数(FIB-4)。用非参数秩和检验进行组间各项指标的比较。用Spearman相关进行miR-203和CHI3L1与肝纤维化指标的相关性分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-203和CHI3L1单独和联合对肝显著纤维化/肝硬化的诊断效能。结果miR-203与C-Ⅳ、HA、FIB-4、ALT呈负相关(r=-0.282、-0.318、-0.238、-0.224,P<0.05),与血小板计数(PLT)呈正相关(r=0.298,P<0.05)。CHI3L1与C-Ⅳ、HA、LN、FIB-4、APRI、ALT呈正相关(r=0.296、0.467、0.254、0.284、0.300、0.316,P<0.05),与PLT呈负相关(r=-0.506,P<0.05)。ROC曲线显示miR-203预测肝显著纤维化/肝硬化发生的曲线下面积(AUC)为0.820,CHI3L1预测疾病的AUC为0.873,均优于APRI和FIB-4(P<0.05),两者联合诊断的AUC为0.895;抗病毒治疗后miR-203和CHI3L1水平与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清miR-203和CHI3LI的检测可用于肝显著纤维化/肝硬化诊断和抗病毒疗效的评价,两者联合应用可提高诊断效能。

生孢噬纤维菌内切葡聚糖酶的异源表达及CBM6对其酶学性质的影响

内切葡聚糖酶是纤维素酶系的重要组分之一,但大部分内切葡聚糖酶酸碱耐受性较差。为挖掘新型内切葡聚糖酶,本研究从生孢噬纤维菌CX11基因组中克隆了一个内切葡聚糖酶基因Sm_1350。该基因大小为2 196 bp,编码732个氨基酸,编码蛋白包含一个分泌信号肽、GH5催化结构域、6家族碳水化合物结合模块(CBM6)和一个C末端结构域(CTD)。利用实时荧光定量PCR技术对Sm_1350在不同碳源条件下的相对表达水平进行了分析,结果表明,Sm_1350在纤维二糖和滤纸培养基中的表达水平均显著高于在葡萄糖培养基中的表达水平,推测其在CX11降解纤维素过程中发挥一定作用。本研究构建了Sm_1350及其3种截短突变体,分别为Sm_1350、Sm_1350-GH5-CBM6、Sm_1350-GH5和Sm_1350-CBM6,并在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,去除CTD结构域明显提高了目的蛋白的可溶性表达水平。以CMC为底物时,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5酶活力分别为(7 000.00±50.00)U/g和(2 542.73±35.03)U/g,表明去除CBM6降低了Sm_1350-GH5对可溶性多糖的水解能力。酶学性质分析结果显示,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5均有较好的pH稳定性,去除CBM6结构域只改变了Sm_1350-GH5的最适温度,对最适pH以及温度稳定性没有产生影响。此外,Sm_1350-CBM6具有较强的几丁质结合能力,在蛋白纯化方面具有良好的应用前景。

特异性乳糖酶的开发研究进展

乳糖酶是一种重要的生物催化剂,基于其水解和转糖苷功能,能水解乳糖和生产低聚半乳糖。在乳糖酶的实际应用中,受复杂反应体系和反应条件(不适宜的酸碱度、高温和有机溶剂)的影响,乳糖酶的稳定性和酶活性较差,制约了乳糖酶的应用。因此,开发适应工业应用条件的特异性乳糖酶及其高效生产的研究一直是研究者们关注的焦点。本文在介绍耐热乳糖酶、低温乳糖酶、耐盐乳糖酶、酸性乳糖酶和耐溶剂化乳糖酶的研究的基础上,综述特异性乳糖酶的催化机制、高产菌株培育、定向进化以及应用策略等方面的进展,并对工业应用前景进行展望,以期为特异性乳糖酶的深入探索和应用开发提供参考。

非淀粉多糖酶组合对苏淮猪生长性能和肌肉风味氨基酸含量的影响

本试验旨在研究非淀粉多糖酶(NSPases)组方对苏淮猪生长性能、血液生化、肉品质和背最长肌中氨基酸含量的影响。试验选择140头(初始体重为29.8±2.6 kg)苏淮猪随机分成2个处理组,根据体重和性别因素每个处理均匀分配到5个栏位,每个栏14头猪:对照组(CON)饲喂常规玉米-杂粕型基础饲粮;试验组(NSPm)饲喂添加了600 mg/kg NSPases复合酶(700 000 U/g木聚糖酶,100 000 U/g β-葡聚糖酶和9 000 U/g纤维素酶)的玉米-杂粕型基础饲粮。整个饲喂期共98 d,试验结束后分析NSPases对苏淮猪生长性能、血清生化指标、肉质和背最长肌中的氨基酸含量的影响。结果显示:与对照组相比,试验组苏淮猪日增重提高50 g (P<0.05),并有明显提高日均采食量和降低料肉比的趋势,但方差分析未达显著性水平(P>0.1);与对照组相比,试验组苏淮猪背最长肌的水分含量、pH值、滴水损失、剪切力和脂肪含量等没有产生显著性变化;但显著增加了背最长肌中风味氨基酸(天冬氨酸和谷氨酰胺)以及甜味氨基酸(丝氨酸、丙氨酸和苏氨酸)等氨基酸的含量(P<0.05);试验组苏淮猪血清中高密度脂蛋白胆固醇含量显著增加(P<0.05),其他各主要血液生化指标则差异不显著。结果显示,玉米-杂粕型基础饲粮添加NSPases可以提高苏淮猪日增重等生长性能指标和背最长肌中主要风味氨基酸含量。

一株内切葡聚糖酶产生菌株的分离鉴定及其产酶条件优化

从湖南省长沙县养殖场牛胃秸秆发酵物中分离获得了一株高产内切葡聚糖酶的菌株,命名为SCUEC7.通过菌落形态、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定SCUEC7菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis).当培养时间为12 h、pH值为6.0、培养温度为37°C、碳源为20.0 g·L^(-1)麦芽糖、氮源为15.0 g·L^(-1)胰蛋白胨、金属离子为1.5 g·L^(-1)的Mn^(2+)的条件下,枯草芽胞杆菌SCUEC7菌株菌体生长量和内切葡聚糖酶活性均较高.在单因素实验的基础上,响应面法分析显示:培养11.9 h,初始pH值为5.9,麦芽糖含量为19.8 g·L^(-1)时,预测最高酶活力为409.0 U·mL^(-1),内切葡聚糖酶的酶活力实测值与预测值之间有较高的拟合度.SCUEC7菌株产生内切葡聚糖酶活性较高,为其秸秆饲料中的应用奠定基础.

壳多糖酶3样蛋白1在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在肺癌诊断中的临床价值。方法选取2022年1-12月安徽医科大学第一附属医院北区收治的106例肺癌患者为肺癌组,同期收治的76例肺良性疾病患者作为肺良性疾病组及20例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验法检测CHI3L1水平,化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)水平。结果肺癌组血清CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组血清CEA较肺良性疾病组明显升高,而血清CHI3L1较肺良性疾病组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与肺腺癌、肺鳞癌患者比较,小细胞肺癌患者血清NSE、ProGRP水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌、小细胞肺癌患者比较,肺鳞癌患者血清CYFRA21-1水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,肺癌组Ⅰ~Ⅱ期患者血清NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1进行多因素Logistic逐步回归分析,发现NSE、CHI3L1对肺癌的发生产生影响。CHI3L1、NSE联合检测诊断肺癌的灵敏度为96.2%,特异度为90.0%,曲线下面积为0.965。结论血清CHI3L1可辅助肺癌的诊断与鉴别诊断,CHI3L1、NSE联合检测有助于临床对肺癌的早期发现,具有良好的临床应用价值。